鸡关节炎型葡萄球菌病的感染门试验

通过多种途径实验感染，评定了分离自关节炎型病鸡病变关节的金黄色葡萄球菌对组织的亲嗜性以及病型与感染门的关系。关节内注射感染引起了典型的关节炎疾病；静脉注射感染除引起脓血症外，尚出现急性化脓性关节炎；皮下或肌肉注射感染均能致局部皮肤坏死、出血和蜂窝组织炎，但一般不致关节炎；气管内、气囊内或嗉囊内感染仅引起局部轻度炎症或不能致病。因而推论，关节炎型葡萄球菌病很可能仅由特定菌株经关节伤口感染才能引起。     

西瓜枯萎病田间症状类型及侵染来源的研究

西瓜枯萎病(Fusarium axysporum f.sp.nuveum)在田间的症状表现有猝倒型、侏儒型和萎蔫型三种类型。此病的初侵染来源是土壤,病残体、种子及未经腐熟的农家肥。通过土壤、种子及粪肥蒂菌和灌水进行远、近距离的传播。种子表面和内、外部均可带菌。病残体内可带有大量的分生孢子和菌丝体。一株死病株体内约含六千万至一亿多个分生孢子。因此西瓜枯萎病是一种侵染来源广的维管束病害。     

番茄叶霉病初侵染再侵染及发病条件的研究

本试验研究证明了番茄叶霉病菌以菌丝体在病残体内或以菌丝潜伏在种皮内越冬，是第２年初侵染主要来源。早熟品种发病高峰出现在５～６月，病叶率高达１００％。中晚熟品种高峰出现在６～７月，８月中下旬还有一小高峰，病叶率最高达６８％。湿度是此病害流行的关键因素，保护地设施内昼夜平均湿度大于８０％，有利于该病害的发生。温度对该病源菌潜育期影响较大，潜育期最适温度２０～２５℃。     

大豆灰斑病发生发展规律的研究

１９８０～１９８９年利用室内和室外试验相结合的方法研究了黑龙江省密山虎林地区大豆灰斑病的再侵染条件，初步结果表明大豆叶片病斑在温度２４℃左右，日保湿润１６ｈ以上最利于病菌产孢。病菌孢子在温度２２℃条件下生命力６～１１ｄ，高温环境不利于病菌孢子存活。大豆成林期叶部发病程度取决于日平均气温高于１８℃、日最低温度高于１２℃及日平均相对湿度大于８０％或有降雨量多于０．１ｍｍ的气象条件出现的日数。大豆籽粒发病率与大豆开花后２０～３５ｄ之间的降雨量、雨日、平均相对温度、日平均湿度≥２０℃且日平均相对湿度≥８５％的天数呈显著正相关。     

樟子松枯梢病菌的潜伏侵染

应用森林病理学的研究方法，通过对病区和非病区不同时期健康株针叶、芽、梢、枝、果等不同部位的组织进行分离培养、接种和套袋隔离试验，测定樟子松估梢病在病区和非病区健康株上的潜伏侵染带菌率，并对照病区和非病区不同部位，不同时期健康组织的分离培养结果进行分析研究，以得以樟子松枯梢病的潜伏侵染规律，为此病的防治提供一定的理论依据。     

整合子相关元件多重PCR检测技术建立及其在弧菌中应用

为了建立一种能同时检测1类整合子、4类超级整合子和1型插入序列共同区的多重PCR检测方法,根据Gen Bank中1类整合子整合酶基因int1、4类超级整合子整合酶基因intSXT和1型插入序列共同区转座酶基因ISCR1的序列,应用Primer Plex 2.61设计3对特异性引物,通过改变引物浓度和退火温度对多重PCR体系进行了优化。此后,评价了所建立多重PCR体系的特异性和灵敏度,并应用于222株海水养殖源弧菌中3种整合子相关元件的检测。结果显示,设计的3对引物能分别单独且特异性地扩增出569 bp、430 bp和651 bp的目的条带;当int1、intSXT和ISCR13对引物(10 pmol/μL)的体积依次为0.3μL、0.6μL和0.6μL,退火温度为50℃时,多重PCR体系能特异性地扩增出3个条带清晰、区分度良好的目的条带,方法的灵敏度达到0.02 ng/μL弧菌基因组模板DNA;利用所建立的方法对222株临床分离弧菌进行3种整合子元件检测得到的结果与文献报道的单引物检测结果一致。从上述研究结果可以看出,该多重PCR方法能快速准确地检测Int1、SXT和ISCR1,适用于整合子相关元件流行监测及整合子相关的耐药性研究。     

蚜传烟草花叶病流行规律的探讨 Ⅰ.田间病株率与烟蚜关系模拟

通过绿色诱盘测定迁飞着落蚜虫动态来研究迁飞传毒蚜虫与烟草黄瓜花叶病毒病株率日变化率的关系 ,在概率分析与统计拟合分析的基础上 ,提出了蚜传烟草花叶病具时滞的田间病株日增长率与烟蚜关系模型—— PHYCMV模型 .利用该模型对湖南的 3个地点进行模型拟合检验 ,平均准确率在 90 %以上 .该模型的建立 ,可以通过当时田间的有翅蚜量和田间病株率来预测 12d之后田间病株率的增加值 .     

创伤弧菌铁调基因fur的原核表达及多克隆抗体制备

应用PCR方法克隆了创伤弧菌Vibrio vulnificus FJ03-X2株的铁调基因fur(Ferric uptake regulator),该基因片段大小为450bp,编码149个氨基酸;以pET32a为表达载体,构建了原核表达质粒pET32a-FUR,表达质粒测序结果表明目的基因与GenBank中报道的创伤弧菌fur基因的同源性达98%以上;诱导表达获得可溶性的重组表达蛋白rFUR。镍离子金属螯合亲和层析介质(Ni-NTA)纯化rFUR,SDS-PAGE电泳分析其分子量约33kD。以纯化后的融合蛋白rFUR为抗原,4次免疫SD大鼠,制备抗rFUR蛋白大鼠多克隆抗体。用ELISA方法检测鼠多克隆抗体的效价达到1∶256 000,表明融合蛋白rFUR具有良好的免疫原性。     

湖北省蛋鸡I群禽腺病毒感染的病例诊断

2015年10月,湖北省某规模化鸡场产蛋鸡群相继发生某种疾病,日死亡率达2%。为了明确患病蛋鸡死亡的原因及确定病原,对临床送检患病蛋鸡开展了病理解剖、组织病理学观察、PCR检测和病毒分离等实验室诊断。结果表明,患病蛋鸡临床剖检可见心包内有淡黄色清亮液体,肝脏肿胀、脂肪变性和变色,肾脏肿大、尿酸盐沉淀较多;病理组织学观察发现肝细胞核内形成嗜碱性核内包涵体;病料样品及病料鸡胚接种尿囊液,PCR扩增产物测序结果与I群禽腺病毒hexon基因同源性为99%,表明分离到的病毒为I群禽腺病毒。     

刺激隐核虫感染对大黄鱼生理生化指标及免疫指标的影响

刺激隐核虫感染能够导致海水鱼类感染“白点病”,而大黄鱼是受“白点病”影响最严重的海水养殖鱼类。为了探究刺激隐核虫感染对大黄鱼生理生化指标及免疫指标的影响,本研究利用刺激隐核虫人工感染大黄鱼,分别在感染后0、12、24、48和72 h采集血液、肝脏、脾脏、肠、鳃、头肾和皮肤组织,并检测血清皮质酮、皮质醇以及肝脏谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量等指标的变化。同时使用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）实验检测肝脏、脾脏、肠、鳃、头肾和皮肤组织中TNF-α、IL-8和IL-1β基因的表达量。结果显示,在大黄鱼感染刺激隐核虫后的0~72 h内,实验组大黄鱼表现出刺激隐核虫病的发病症状;血清皮质醇和皮质酮含量显著增加;肝脏GSH-Px活性极显著降低;肝脏SOD活性极显著增加;肝脏MDA含量在0~12 h内急剧增加并达到峰值,随后含量缓慢降低;各组织中的TNF-α、IL-8和IL-1β的表达量均有不同程度的上调,在鳃、头肾、肝脏和皮肤中上调最为显著。研究表明,刺激隐核虫感染后有明显变化的皮质类激素含量和氧化应激指标能够反映大黄鱼的感染程度,有助于进一步辅助抗虫表型测量的优化。