塔里木河干流叶尔羌高原鳅种群生物学研究

2009年对塔里木河干流叶尔羌高原鳅[Triyplophysa(Hedinichthys)yarkandensis(Day)]群体生物学进行研究。叶尔羌高原鳅体长、体重相关方程为:W=0.0190L2.8911;相对怀卵量平均为(1160.7±364.7)粒/g,性腺处于Ⅳ期发育阶段的雌、雄鱼平均成熟系数分别为(13.59±5.21)%、(0.79±0.26)%;集中产卵时间在6-7月份,繁殖水温约为22℃。食物组成以水生高等植物(秋季)和水生昆虫(春季)为主,秋季的摄食率、饱满度及摄食强度等指标远高于春季。春季群体,体长5~8cm、体重4.1~8.1g,主要为繁殖群体;秋季群体,体长2~5cm、体重0.1~4.1g,主要为育肥生长阶段的幼小群体。当干流全线有一定流量或有洪水暴发时,叶尔羌高原鳅遍布于塔里木河干流全线,并在干流鱼类种群数量中占优势地位,其种群资源主要集中在塔里木河干流阿拉尔河段;该鱼属于广温性(0.2~33℃)底层小型鱼,具有耐低氧、喜集群及短距洄游特性。     

塔里木河流域叶尔羌高原鳅营养成分分析

利用常规肌肉营养分析方法测定了叶尔羌高原鳅[Triplophysa(Hedinichthys)yarkandensis]的肌肉营养成分。结果表明,叶尔羌高原鳅肌肉中(鲜重)蛋白质含量为24.87%、脂肪为3.61%、水分为70.12%、粗灰分为1.40%;其肌肉(干重)总能值为26760J/g;肌肉中(鲜重)矿物元素含量为钙5466.7mg/kg、磷1083.2mg/kg、钾592.3mg/kg、铁6.0mg/kg、锰0.78mg/kg、锌0.66mg/kg、铜0.12mg/kg。其肌肉中含有常见的17种氨基酸,其中包括8种人体必需氨基酸,氨基酸总量(占鲜重)为22.65%,必需氨基酸总量为11.04%,必需氨基酸的构成比例符合FAO/WHO的标准,鲜味氨基酸含量为3.66%。叶尔羌高原鳅的营养价值高于一般鱼类,适于作名贵鱼类养殖。     

安氏高原鳅胚胎和仔鱼发育的观察

通过人工授精获得受精卵,利用显微镜进行连续观察,并用数码相机拍照记录,对安氏高原鳅胚胎及仔鱼的发育特征进行了详细描述,并确定了到达各发育期所需的时间.成熟卵直径为0.87～1.05 mm,受精卵卵膜径为1.24～1.41 mm,微粘性.水温16.3～18.1 ℃,受精卵历时119 h 44 min孵出,所需积温为2083.4 ℃·h.受精卵发育的理论起始温度为4 ℃,发育所需的理论有效积温为1610.4 ℃·h.胚胎发育过程可划分为6个阶段,35个发育期.初孵仔鱼平均全长约为4.58 mm,仔鱼期历时28 d.     

塔里木马鹿原发性肝癌的病理形态学观察

自然患病的塔里木马鹿,表现为食欲不振、消瘦、结膜黄染、腹围增大,对其进行剖检及病理组织学观察,以确定其是否为肝脏方面的疾病。对濒死期的塔里木马鹿剖检,采集肝、心、脾、肺、肾、淋巴结、胃、肠等固定后进行切片,H.E染色后进行病理组织学观察。结果表明,全身渗出液为黄色,肝表面有散在点状出血,质地硬,色淡,有多个散在性灰白色斑块,形状不规则,边缘不十分清楚;病理组织学观察为胆管细胞性肝癌,癌细胞核呈多形性,核仁增大而明显,数量增多,胞浆较少,且多边集;没有发现癌细胞转移。首次发现了塔里木马鹿胆管细胞性肝癌。     

一株似鲇高原鳅源蛙病毒的分离与鉴定

从四川乐山某养殖场自然发病的似鲇高原鳅(Triplophysa siluroides)体内分离到一株病毒FYL140220。病毒感染鲤上皮瘤细胞系(epithelima popuasum cuprini,EPC)后,细胞呈现圆缩、坏死、脱落、明显空斑的病变特征。将自然发病鱼组织过滤除菌液和细胞培养病毒液分别接种健康似鲇高原鳅,试验鱼出现与自然发病鱼相同的症状,死亡率分别为30%和40%,而对照组无异常。对经FYL140220感染出现典型细胞病变(CPE)的EPC细胞制备超薄切片进行电镜观察,发现病毒呈正六边形,对称20面体,对角线直径约(103±7)nm;提取细胞培养病毒液、自然发病鱼和人工感染发病鱼的内脏器官总DNA进行蛙病毒主要衣壳蛋白(maior capsid protein,MCP)基因保守区域的PCR扩增,均能扩增出预期大小约500 bp的特异性条带。MCP基因同源性与遗传进化分析表明,分离株FYL140220与蛙病毒属成员聚为一支,尤其与大鲵蛙病毒与沼泽绿蛙病毒同源性最高,分别达99.8%和99.6%。结合PCR检测、电镜观察和系统发育分析,确认分离病毒FYL140220为蛙病毒,这是首次报道蛙病毒可自然感染似鲇高原鳅并致死。     

叶尔羌高原鳅胚胎发育与胚后发育观察

采用形态学和生态学方法,对叶尔羌高原鳅[Triplophysa(Hedinichthys)yarkandensis(Day)]胚胎发育和胚后发育阶段全过程进行观察、拍照并测量。结果显示:叶尔羌高原鳅,卵微黏性,略有沉性,受精卵呈卵圆形,卵径为(0.60±0.052)mm,在水温(20.0±1.0)℃下,历时65 h 34 min完成整个胚胎发育分为7个生理阶段过程;胚后发育主要根据卵黄囊、体色、鼓鳔和须的变化分为仔鱼期、稚鱼期、幼鱼期。初孵卵黄囊仔鱼全长(2.0±0.65)mm,出膜后7 d,卵黄囊吸收完毕,完全消失;初孵仔鱼继续培育至16日龄,仔鱼鳃盖后缘鼓鳔明显长出,须清晰可辨,体色加深,心脏红色素明显,体色与成体相似,标志后期仔鱼发育完全进入稚鱼期,此时鱼苗全长(8.0±0.45)mm;培育至30日龄,仔鱼鼓鳔完全,鳃盖张合明显,身体透明特征消失,稚鱼阶段完成发育进入幼鱼期,此时全长达(13.0±0.55)mm,其外部形态和生态习性均与成鱼相似。试验中,卵黄囊长度(LY)和出膜天数(D)的关系式:LY=0.0286D2–0.0636D+3.1196(R2=0.9050);用直线方程拟合卵黄囊长度(LY)和卵黄囊仔鱼全长(LT)的关系式:LY=–1.315LT+5.368(R2=0.8199);拟合卵黄囊仔鱼全长(LT)和出膜后仔稚鱼天数(D)的关系式:LT=–0.0263D2+0.5113D+1.6169(R2=0.9890)。本研究旨在通过了解叶尔羌高原鳅的早期发育特征为该物种的保护和增殖对策提供科学依据,并对其苗种生产提供理论指导。     

不同浓度Ca2+对塔里木马鹿冻融精子体外获能及蛋白酪氨酸磷酸化的影响

为探讨不同浓度Ca²⁺对马鹿精子体外获能的影响,本研究以塔里木马鹿冻融精子为试验材料,将精子分别悬浮于含不同浓度Ca²⁺（0、1.1、2.2、3.5、5.0 mmol/L）的台氏液（sp-TALP液）中,在培养0、2、4 h时,采用金霉素（CTC）染色法评价精子获能状态,采用SDS-PAGE分离精子膜蛋白,进行免疫印迹分析,检测酪氨酸磷酸化蛋白的表达水平。结果表明,Ca²⁺浓度为1.1、2.2 mmol/L有利于精子活力的维持（P<0.05）,精子获能率极显著高于对照组和高浓度组（3.5、5.0 mmol/L;P<0.01）,精子存活时间最长（P<0.01）,但高浓度Ca²⁺（5.0 mmol/L）对精子活力具有显著抑制作用（P<0.05）,精子获能率极显著低于低浓度组（P<0.01）,精子存活时间最短（P<0.01）;另外,随着培养时间的推移精子发生酪氨酸磷酸化蛋白的表达水平有所不同,培养2、4 h时,1.1 mmol/L组精子蛋白磷酸化水平极显著高于其他各组（P<0.01）,高浓度Ca²⁺（3.5、5.0 mmol/L）组酪氨酸磷酸化蛋白的表达水平极显著下降（P<0.01）。结果表明,塔里木马鹿精子体外获能所需的适宜Ca²⁺浓度为1.1 mmol/L,且获能过程中Ca²⁺的存在是必要的。     

雅鲁藏布江中游东方高原鳅的年龄与生长特性

利用微耳石对雅鲁藏布江中游东方高原鳅的年龄与生长特征进行研究.结果发现,东方高原鳅由7个年龄组组成,其中4～6龄占80.87％;体长和微耳石的半径长呈直线正相关关系,雌雄群体间没有显著差异,表达式为L=253.81Ro-26.725;t检验结果表明,各年龄组雌、雄的实测体长的均值和退算体长的均值没有显著性的差异;体长与体质量的关系呈幂函数,但雌、雄之间差异较显著,东方高原鳅雌、雄群体的体长—体质量关系表达式分别为W=0.00001L2.9797(♀),W=0.00002L2.8475(♂);比较后发现yon Bertalanffy方程能更准确地表达东方高原鳅的生长,其表达式分别为:Lt=151.65[1-e 0.133(t+0.01786)],Wt=31.496[1-e-0.133(t+0.01786)]2.9797(♀);Lt=125.19[1-e-0.177(t+0.0695)],Wt=18.787[1-e-0.177(t+0.0695)]2.8475(♂);雌、雄东方高原鳅的生长拐点年龄分别为8.19和5.83,对应的体长和体质量分别为100.77mm、9.32 g以及81.13 mm、5.46 g.     

基于Cytb基因序列的拟硬刺高原鳅遗传多样性研究

[目的]探究拟硬刺高原鳅种群的遗传多样性和分化程度。[方法]采用聚合酶链式反应（PCR）和直接测序方法获得拟硬刺高原鳅线粒体DNA（mtDNA）细胞色素b（Cytb）基因的全序列。[结果]拟硬刺高原鳅3个种群共58个个体均获得Cytb基因的全长序列（1 140 bp）,共定义了20个单倍型,拟硬刺高原鳅宝库河种群遗传多样性低于黄河种群。[结论]拟硬刺高原鳅黄河种群和宝库河种群间存在显著的分化,建议在实践中将2种群分开管理和保护,以达到保护种群遗传多样性的目的。     

叶尔羌高原鳅血液生理生化指标的测定

以雌、雄叶尔羌高原鳅[Triplophysa(Hedinichthys)yarkandensis]各26尾为研究对象,比较其血液生理生化指标的差异.结果显示,雌鳅血清中谷草转氨酶活性显著低于雄鳅(P＜0.05),碱性磷酸酶活性极显著低于雄鳅(P＜0.01),而尿酸、肌酐、钙含量显著高于雄鳅(P＜0.05),其它各血液指标雌雄鳅虽有所不同,但差异均不显著(P＞0.05).该研究为叶尔羌高原鳅的疾病防治、人工养殖及遗传育种提供了参考资料.