猪链球菌蛋白表面展示系统的构建及展示蛋白的初步观察

为构建猪链球菌(Streptococcus suis)蛋白表面展示系统,本研究通过序列分析,确定猪链球菌的LPxTG蛋白及其信号肽(SP)和胞壁锚定基序(CWA),通过PCR扩增Peno-SP、GFP、CWA的DNA片段并融合,构建强启动子Peno控制表达编码SP-GFP-CWA融合蛋白的DNA片段,将该重组DNA片段连接pSET2载体,获得蛋白表面展示质粒,转化猪链球菌,构建得到以GFP为报告蛋白的猪链球菌蛋白表面展示系统。结果显示,利用猪链球菌的10个LPxTG蛋白及其SP和CWA序列,构建了10个含有Peno-SP-GFP-CWA融合片段的重组pSET2表面蛋白展示质粒pSsPSD1至pSsPSD10,分别转化猪链球菌05ZYH33,PCR鉴定显示其中7个转化猪链球菌。采用western blot初步检测其展示蛋白,结果显示,7个转化阳性菌株均能有效表达GFP蛋白,以成熟GFP条带为指标,均表现出了一定的外源GFP表面展示水平,分别命名为SsPSD1、SsPSD2、SsPSD4、SsPSD7-SsPSD10,其中SsPSD1、SsPSD4、SsPSD8和SsPSD9表面展示水平相对较好,在猪链球菌表面展示外源蛋白方面具有很好的潜力。本研究首次尝试建立猪链球菌蛋白表面展示系统,为猪链球菌表面递呈外源蛋白或抗原提供了新的策略。     

猪链球菌对红霉素耐药性的研究

从发病猪体内分离、鉴定猪链球菌，采用肉汤稀释法和纸片琼脂扩散法筛选对红霉素耐药的猪链球菌，用双纸片法确定耐药株的耐药表型，通过聚合酶链反应检测对红霉素耐药的基因ermb/mefA。猪链球菌对红霉素的耐药表型为cMLS表型，即同时对克林霉素耐药。在3株红霉素耐药株中扩增到ermb基因，其余未能检测到ermb或mefA基因。     

三黄连散预防罗非鱼链球菌病临床应用研究

在开展三黄连散对人工感染罗非鱼无乳链球菌病预防效果研究的基础上,进一步验证以每千克饲料中添加13.2 g的三黄连散为推荐剂量,在生产中大面积应用的临床效果及安全性。设立三黄连散试验组、中药对照组和空白对照组3个组,每组300尾罗非鱼,连续用药7 d后,每组随机取30尾,测定增重率、器官指数、血液生理生化指标和肝脏抗氧化指标。用药后第8天,采用同居感染的方法感染鱼群,于感染后第14天计算保护率。结果表明,给药7 d后,与空白对照组相比,三黄连散试验组罗非鱼的增重率明显提高,器官指数和多项肝脏抗氧化指标均明显升高,血液生理生化指标总体无明显异常,预防无乳链球菌感染的保护率为43.67%。综上提示,三黄连散能够提高罗非鱼机体抵抗力,降低无乳链球菌感染罗非鱼的死亡率。     

罗非鱼链球菌的分离鉴定

从济南、泰安、枣庄、德州等地的几个罗非鱼养殖场发病的罗非鱼中，分离到一株G^ 链球菌。将该菌人工感染罗非鱼，证实为致病菌。对该菌的形态特征、培养特性、生化特性、致病特性、对药物的敏感性等进行了试验，证明核菌为S.iniae。     

保蚕宁2号防治柞蚕空胴病的研究

室内药敏试验０．１％—０．５％保蚕宁２号对柞蚕链球菌有抑制作用，四龄盛食期添食０．１３％保蚕宁２号对柞蚕再感染空胴病有防治作用，旦效果显著。小区试验经添食药物的空胴病发病率下降６９．５％，死笼茧率平均下降３８．２５％，结茧率平均提高５０．２５％。农村多点试验治愈率达６３％，发病率下降６７．３％，结茧率提高５２．１１％。保蚕宁２号药源充足，价格适宜，可在柞蚕生产区普遍推广应用。     

Acquired antimicrobial resistance in the intestinal microbiota of diverse cat populations

The aim of this study was to investigate the prevalence of acquired antimicrobial resistance in the resident intestinal microbiota of cats and to identify significant differences between various cat populations. Escherichia coli, Enterococcus faecalis, E. faecium and Streptococcus canis were isolated as faecal indicator bacteria from rectal swabs of 47 individually owned cats, 47 cattery cats and 18 hospitalised cats, and submitted through antimicrobial sensitivity tests. The results revealed that bacteria isolated from hospitalised and/or cattery cats were more frequently resistant than those from individually owned cats. E. coli isolates from hospitalised cats were particularly resistant to ampicillin, tetracycline and sulfonamide. Both enterococci and streptococci showed high resistance to tetracycline and in somewhat lesser extent to erythromycin and tylosin. Most E. faecium isolates were resistant to lincomycin and penicillin. One E. faecalis as well as one E. faecium isolate from hospitalised cats showed 'high-level resistance' (MIC > 500 microg/ml) against gentamicin, a commonly used antimicrobial agent in case of human enterococcal infections. The results of this research demonstrate that the extent of acquired antimicrobial resistance in the intestinal microbiota of cats depends on the social environment of the investigated population. It is obvious that the flora of healthy cats may act as a reservoir of resistance genes.     

表观健康猪群携带猪链球菌2型毒力因子的分布特征

为了研究钦州市猪链球菌2型(SS2)的毒力因子分布特征,采用多重PCR方法对从我市健康猪扁桃体分离的11株SS2相关毒力基因——荚膜多糖(Cps2J),溶菌酶释放蛋白(Mrp),胞外蛋白因子(EF),溶血素(Sly),进行毒力基因检测。检测结果显示:毒力基因型为Mrp+epf+Sly+共有8株,毒力基因型为Mrp+epf+Sly-共有1株,这两种毒力基因型可归为强毒力基因型,占此次健康猪源毒株的81.8%;另外Mrp-epf-Sly-共有2株,属于弱毒和无毒基因型,占健康猪源毒株的18.2%。通过结果分析,预示我市目前SS2的主要流行菌株是同时具有4种毒力因子的高致病性菌株。     

赛里木拉丝酸奶中优势菌株发酵乳对血管紧张素转化酶的抑制作用

利用改进的紫外分光光度法,测定从新疆赛里木拉丝酸奶中分离出的瑞士乳杆菌mb2-1、嗜热链球菌mb5-1以及马克斯克鲁维酵母Y6单菌和混菌发酵脱脂乳对血管紧张素转化酶抑制率。结果表明:瑞士乳杆菌mb2-1、嗜热链球菌mb5-1单菌发酵对血管紧张素转化酶抑制率48h达到最高,分别为70.75%、47.17%;与马克斯克鲁维酵母Y6混合发酵48h,对血管紧张素转化酶抑制率分别为75.68%和44.85%。