饲料中添加谷氨酸对生长中期草鱼肌肉品质的影响

本试验旨在研究饲料中添加谷氨酸对生长中期草鱼肌肉品质的影响。试验选取初始体重为(370.0±3.8)g的健康草鱼540尾,随机分为3组,每组3个重复,每个重复60尾鱼。3组草鱼分别饲喂谷氨酸添加水平为0(对照)、0.8%和1.6%的试验饲料,试验期为56 d。结果表明:饲料中添加0.8%和1.6%的谷氨酸显著降低了肌纤维直径(P<0.05),显著提高了肌纤维密度(P<0.05),但对肌肉横截面积和p H无显著影响(P>0.05)。饲料中添加0.8%和1.6%的谷氨酸显著提高了肌肉硬度、弹性、咀嚼性和胶黏性(P<0.05),而对肌肉黏聚性无显著影响(P>0.05)。饲料中添加0.8%和1.6%的谷氨酸对肌肉常规营养成分和氨基酸组成均无显著影响(P>0.05)。饲料中添加0.8%和1.6%的谷氨酸显著提高了肌肉肌苷酸含量(P<0.05)。此外,饲料中添加0.8%的谷氨酸还可显著提高肌苷酸合成关键酶腺苷琥珀酸裂解酶mRNA的相对表达量(P<0.05)。本结果揭示,饲料中添加谷氨酸可改善生长中期草鱼的肌纤维结构和肌肉质构特性,提高肌肉中风味物质肌苷酸的含量,从而改善肌肉品质。     

MyoD介导肌肉特异性基因染色质重塑激活与成肌分化控制

骨骼肌纤维的数目由出生前肌源细胞的成肌分化进程所决定,直接影响家畜的生长潜能和肉质.MyoD依赖的肌肉特异性基因的染色质重塑激活是控制成肌分化的重要方式,其作用模式已有一些报道.PI3K/Akt和p38信号也参与了这一过程的调控.对这一研究进展进行了综述.     

IGF1-PI3K-Akt信号通路相关基因在黄羽肉鸡肌肉和肝脏中的表达

【目的】IGF1-PI3K-Akt信号通路是调控生长发育的关键通路,选择慢速型的广西麻鸡和中速型的花山麻鸡作为研究对象,探究IGF1-PI3K-AKT信号通路相关基因胰岛素样生长因子1( Insulin-like growth factors, IGF1)、胰岛素样生长因子1受体( Insulin- like growth factor receptor, IGF1R)和胰岛素受体底物1 (Insulin receptor substrate1, IRS1)在骨骼肌和肝脏中的发育性表达规律,为阐明黄羽肉鸡生长发育调控机理提供参考。【方法】采用SPSS20.0比较广西麻鸡和花山麻鸡在胚胎期至出生后早期的生长发育差异,采用实时荧光定量PCR方法检测上述3个基因在两个品种鸡胚胎期（9、12、16胚龄）和出生后（0、7、21、35、49和63日龄）胸肌、腿肌和肝脏中的表达差异,并将其与体重和组织重进行相关性分析。【结果】鸡生长发育早期体重、骨骼肌重和肝脏重变化呈现显著的品种和时间特异性,经过选育的花山麻鸡体重和组织重的增长在胚胎发育后期已经远远超过广西麻鸡。IGF1、IGF1R和IRS1基因表达存在显著的品种、组织和发育时段特异性,总体上,在胚胎期肌肉中的表达量高于肝脏组织,出生后则为肝脏中的表达量高于肌肉组织,广西麻鸡肌肉中的表达量高于花山麻鸡,而花山麻鸡肝脏中的表达量要高于广西麻鸡。IGF1基因在两个品种胸腿肌中均在9胚龄即可检测到表达,腿肌中表达量均是9胚龄时最高,除与12胚龄差异不显著外,与其他各阶段差异显著,表达量最低点出现在出雏0日龄时;胸肌中则是12胚龄时表达量最高,63日龄时最低;肝脏中则出现品种差异,广西麻鸡胚胎期未检测到表达,从出雏0日龄开始表达,表达高峰出现在21日龄时,而在花山麻鸡中虽然胚胎期检测到表达但表达量极低,49日龄时达到表达高峰。两品种鸡肌肉和肝脏各个阶段均检测到IGF1R mRNA的表达,在胸肌和腿肌中的表达量均表现为9胚龄最高,广西麻鸡9胚龄与其他各阶段差异显著,花山麻鸡9胚龄除与12胚龄差异不显著外,与其他各阶段均差异显著;肝脏中,广西麻鸡表达高峰出现在21日龄,且与9、12、16胚龄和0日龄差异显著,花山麻鸡则是63日龄时最高,与其他各阶段差异显著。两品种鸡肌肉和肝脏各个阶段均能检测到IRS1 mRNA的表达,在两品种肌肉中的表达量均表现为9胚龄或者12胚龄最高,与其他各阶段差异显著,随后下降,并在出雏后维持在较低水平;肝脏中IRS1的表达模式与IGF1R一致。IGF1、IGF1R和IRS1基因的表达两两之间均表现出显著或极显著的正相关关系,同时,肌肉中3个基因的表达与体重、胸（腿）肌重存在显著的负相关,而肝脏中3个基因的表达与体重、胸（腿）肌重、肝脏重均存在显著的正相关。【结论】IGF1-PI3K-AKT信号通路相关基因之间存在一致性趋势,品种间和组织间表达量的差异可能正是不同类型黄羽肉鸡生长发育差异的主要原因之一。     

猪心肌和骨骼肌miRNA转录组比较分析

【目的】研究microRNA(miRNA)在猪不同类型肌肉生长发育中的作用。【方法】以猪心肌以及2种骨骼肌(背最长肌和腰大肌)为材料,采用Illumina高通量测序技术鉴定其miRNA转录组,并进行差异表达分析和靶基因富集分析。【结果】从猪心肌、背最长肌和腰大肌组织的3个小RNA测序文库中共获得约56M的序列,通过生物信息分析共鉴定出907个非冗余miRNA,其中441个miRNA在3个文库共同表达,123个miRNA在文库间表现为显著的差异表达(P10-6)。对3个文库差异表达miRNA的相关性分析发现,背最长肌与腰大肌的相关性最高(r=0.94),证明2种骨骼肌的表达模式十分相近,而心肌与2种骨骼肌的表达模式不同。通过对各文库高表达的miRNA分析发现,表达量前十的miRNA中有6个miRNA的表达量在心肌中极显著上调。对在心肌内上调的6个miRNA进行的靶基因预测和生物学功能预测发现,这些差异miRNA主要靶向作用于钙信号通路和胰岛素信号通路。荧光定量PCR(qRT-PCR)验证结果表明高通量测序结果准确可靠。【结论】从miRNA层面揭示了猪心肌和骨骼肌的差异,这种差异在一定程度上印证了心肌和骨骼肌之间迥异的生理学特征。     

MYCN基因在鸡成肌细胞和胸肌组织表达及生长发育中变化

MYCN是癌基因中的核蛋白类调控基因.在前期采用Illumina60kSNP芯片开展的胴体性状的全基因组关联(GWAS)研究中发现,MYCN基因与胸肌、腿肌重达显著相关.为进一步验证该基因在肌肉发育调控中的作用,采用Q-PCR技术,系统检测成肌细胞增殖分化期、胚胎发育后期和出生至98日龄肌肉组织中MYCN基因的mRNA表达量,并比较12个组织的特异性表达差异.结果表明,在鸡成肌细胞增殖、分化过程中,MYCN基因mRNA表达量在分化期显著高于增殖期(P＜0.01),并随诱导分化时间的延长表达量上升;在胚胎期14～21胚龄,mRNA表达量随胚龄的延长而持续上升,18至21胚龄变化显著(P＜0.01);在出生至98日龄生产发育阶段,在0～14日龄的表达量呈急剧下降趋势(P＜0.01),14日龄后变化不显著(P＜0.05).通过12个组织特异性表达分析,MYCN在胸肌、腿肌中的表达量仅次于大脑和下丘脑中枢神经系统中的表达水平.综合各发育阶段的结果表明,MYCN基因参与了肌肉组织发育的调控,其功能主要作用在鸡胚胎发育后期至出生后14日龄之内.该研究为阐明鸡肌肉生长发育的遗传机制提供了理论依据.     

WWP1与Myocardin结合调节血管平滑肌细胞的分化研究

【目的】探讨含有WW结构域的E3泛素蛋白连接酶1(WWP1)在平滑肌细胞分化过程中的表达情况及其作用机制。【方法】用实时定量PCR,检测WWP1在人、小鼠主动脉血管平滑肌细胞中以及小鼠胚胎干细胞向平滑肌细胞体外分化过程中表达量的变化情况。用萤光素酶活性试验及免疫共沉淀试验检测WWP1与Myocardin的结合情况。【结果】WWP1在人和小鼠的血管平滑肌细胞中高表达,在全反式维甲酸诱导小鼠胚胎干细胞向平滑肌细胞分化过程中的表达水平明显上调。WWP1能与Myocardin蛋白结合,WWP1的表达水平受Myocardin调控。【结论】WWP1很可能通过与Myocardin结合参与血管平滑肌细胞分化的调节。     

饲料维生素E添加水平对团头鲂生长性能及血液和肌肉理化指标的影响

为了探讨饲料维生素E添加水平对团头鲂生长性能及血液和肌肉理化指标的影响,本试验挑选360尾健康、平均体重为(45.00±1.50)g的团头鲂,随机分为6组(每组4个重复,每个重复15尾),分别饲喂在基础饲料中添加0(对照组)、12.5、25.0、50.0、100.0和200.0 mg/kg维生素E的等氮等能试验饲料,试验期为90 d.结果表明:1)与对照组相比,12.5、25.0、50.0、100.0和200.0 mg/kg添加组的增重率和特定生长率均显著提高(P＜0.05);25.0、50.0、100.0和200.0 mg/kg添加组的摄食率显著提高(P＜0.05).2)与对照组相比,12.5、25.0、50.0、100.0和200.0mg/kg添加组血浆中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性以及甘油三酯含量均显著降低(P ＜0.05);12.5、25.0、50.0、100.0 mg/kg添加组血浆中总胆固醇含量显著降低(P ＜0.05);12.5、25.0、50.0 mg/kg添加组血浆中高密度脂蛋白胆固醇含量显著降低(P＜0.05);100.0 mg/kg添加组血浆中碱性磷酸酶活性显著增加(P＜0.05).3)与对照组相比,25.0、50.0、100.0和200.0 mg/kg添加组肌肉中粗蛋白质含量显著增加(P＜0.05);12.5、25.0、50.0、100.0和200.0 mg/kg添加组肌肉的熟肉率显著提高(P＜0.05);25.0、50.0和100.0 mg/kg添加组肌肉的滴水损失率显著降低(P＜0.05).由此可知,饲料中添加25.0 ～200.0mg/kg维生素E可在一定程度上促进团头鲂生长,改善肉质.以增重率为评价指标,经回归方程预测团头鲂饲料中维生素E的适宜添加水平为138.5mg/kg.     

猪肉中氯霉素残留量测定能力验证分析

为了解我国食品检测实验室的氯霉素残留检测能力,CNAS于2012年委托中国兽医药品监察所组织实施了猪肉中氯霉素残留量测定的能力验证工作.全国21个省、市、自治区的66家实验室参加了本次能力验证,采用的测试方法主要是液相色谱-串联质谱法和气相色谱-质谱法.结果显示:参加实验室满意结果率为80.3％,可疑结果率为9.09％,不满意结果率为10.6％,说明参加能力验证的绝大多数实验室可以准确检测猪肉中氯霉素残留情况.     

Decorin activates Akt downstream of IGF‐IR and promotes myoblast differentiation

Decorin, a small leucine‐rich proteoglycan, plays an important role in cellular activities through modification of growth factors. It also acts as a signaling molecule to non‐muscle cells through epidermal growth factor receptor or insulin‐like growth factor I receptor (IGF‐IR). However, it is unclear if decorin acts as a signaling molecule to myogenic cells. In this study, we investigated the effect of decorin on the differentiation of myoblasts and the signaling via IGF‐IR to myogenic cells. C2C12 myoblasts cultured in media containing decorin for 72 h showed more extensive formation of multinucleated myotubes than control cells cultured in the same media without decorin. The protein expressions of myogenin and myosin heavy chian were higher in decorn‐treated cells than in control cells. These results suggest that decorin enhances the differentiation of myoblasts. Western blot analysis and immunocytochemistry showed that IGF‐IR was expressed in myoblasts and myotubes. Furthermore, Akt, which is downstream of IGF‐IR, was more phosphorylated in myoblasts cultured in media containing decorin than those in media without decorin. These results suggest that decorin activates Akt downstream of IGF‐IR and enhances the differentiation of myogenic cells.     

Caprine sex affects skeletal muscle profile and MRFs expression during postnatal development

The important roles of myogenic regulatory factors (MRFs) have been well addressed in the process of mammalian skeletal myogenesis, while limited research has been performed in small ruminants. Furthermore, the effects of gender on the development of skeletal muscle and MRFs expression remain unknown. In this study, we identified the caprine Myf5, Myf6, MyoD and myogenin genes and quantified their expressions at six different postnatal time points by real‐time RT‐PCR. The sex has a marked effect on the expression differences of Myf5, MyoD and myogenin in the five investigated skeletal muscles, while minor influence on the expression difference of Myf6 except for Semitendinosus and Quadriceps femoris tissues (P < 0.001). The histological sections of muscles revealed a constant increase of muscle fiber diameter with aging but non‐significant differences between genders. We provide novel evidence for MRFs expression in age‐ and gender‐dependent manners, which will contribute to prioritizing these genes as potential candidate genes for trait‐associated study and provide a foundation for understanding the molecular control of skeletal muscle growth in goat species.