食品中柑橘红2号与罗丹明B及苏丹红Ⅰ~Ⅳ的高效液相色谱检验方法

建立高效液相色谱同时测定食品中多种脂溶性染料的含量测定,脂溶性着色剂用正己烷提取后经中性氧化铝固相萃取柱净化,用反相色谱柱分离,高效液相色谱仪测定,外标法定量。样品前处理简单快捷,分离度高,灵敏度高且结果准确可靠,大大提高了实验室的工作效率。     

“芜菁花叶病毒的逆转录环介导等温扩增快速检测方法”发明专利获公开

<正>近日,国家知识产权局公开一件由山东农业大学和山东烟草研究院有限公司共同申请的发明专利:芜菁花叶病毒的逆转录环介导等温扩增快速检测方法。该发明根据芜菁花叶病毒核酸序列,设计了一套特异引物(F3、B3、FIP、BIP,如SEQIDNO.1~4所示)样品提取总RNA后,进行LAMP反应,反应产物经电泳或者荧光染料的方法实现芜菁花叶病毒的检测。据称,该发明的方法,对     

番茄斑萎病毒NASBA检测方法的建立

为建立一种快速检测番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)的方法,以TSWV-CP1/TSWV-CP2为引物对TSWV的N基因进行PCR扩增及序列测定,在TSWV N基因的高度保守区设计特异性扩增引物NA-P1/NA-P2进行核酸序列依赖性扩增(NASBA)反应,并对NASBA方法的特异性和灵敏度进行验证。结果表明,建立的NASBA方法最佳反应时间为1.5 h。该方法特异性较好,只有TSWV阳性样品中出现了预期大小为235 bp的扩增产物,与烟草环斑病毒(Tobacco ring spot virus,TRSV)、番茄黑环病毒(Tomato black ring virus,TBRV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus,ToMV)、番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow curl virus,ToYCLV)无交叉反应。灵敏度验证中,实时荧光RT-PCR的灵敏度最高,为1.56×10~(-5)ng/μL感病植物RNA模板,NASBA次之,为1.56×10~(-4)ng/μL,普通RT-PCR最低,为1.56×10~(-3)ng/μL。在对9份实际样品检测中,NASBA的阳性检出率与实时荧光RT-PCR、普通RT-PCR相同,均为33%,高于ELISA检测的22%。表明NASBA方法适用于实际样品检测,可对TSWV进行快速检测。     

适配体试纸在霉菌毒素检测中的应用研究

适配体试纸是将核酸适配体的灵敏特异性与试纸条技术的简单快速相结合而开发的一种新型检测方法,在食品安全检测、环境污染物监测以及临床诊断方面具有很好的应用前景。本文在介绍适配体以及适配体试纸基本原理的基础上,综述了目前已经筛选到的霉菌毒素适配体以及适配体试纸在霉菌毒素检测中的应用研究进展,讨论了适配体试纸在霉菌毒素检测领域的发展趋势。     

转基因植物检测技术研究进展

对国内外转基因植物及产品的检测技术进行综述,重点介绍目前使用较广泛的PCR技术、酶联免疫吸附技术、环介导等温扩增技术、基因芯片技术及其他转基因检测技术的原理和特点,并展望今后转基因检测技术的发展趋势和研究方向。     

鲑鱼甲病毒阳性核酸物质制备及RT-PCR检测方法的建立

为建立快速检测鲑鱼甲病毒(Salmonid alphavirus,SAV)RT-PCR方法,根据Gen Bank公布的E2基因序列(1 375 bp)设计引物,扩增S AV E2全长基因,利用假病毒制备技术获得包裹E2核酸物质(RNA)的SAV假病毒溶液。以SAV假病毒作为阳性核酸物质质控品,以E2F:5'CCG-TTG-CGG-CCA-CAC-TGG-ATG 3',E2R:5'CCT-CAT-AGG-TGA-TCG-ACG-GCA-G 3'为引物,优化反应条件,建立SAV的RT-PCR检测方法。结果表明,该方法可扩增SAV E2特异性516 bp的DNA片段,引物最适反应浓度为1.0μmol·L-1,最佳退火温度为57.5℃,对SAV的三种亚型SAV1(V4640)、SAV2(V4619)、SAV5(V4638)检测结果均为阳性,对SVCV、IHNV和IPNV的PCR扩增结果均为阴性;并确定对SAV的核酸最低检出量达1.59 pg;以RT-PCR方法在不同时间对每份样品作3次重复检测,检测结果一致。表明此方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性较好,可用于SAV临床诊断和检测。     

鸡蛋膜的生物吸附作用研究新进展

由于人类社会的工业发展和重大安全事故,重金属离子与有机污染物不断向环境排放,造成土壤和水体的污染日益严重。鸡蛋膜(eggshell membrane,ESM)作为一个独特的富含二硫键的天然生物吸附材料在环境水污染处理中应用研究不断拓展。综述近年来鸡蛋膜及改性材料对重金属离子及有机污染物的吸附研究进展,为充分利用廉价吸附材料鸡蛋膜研究提供参考。     

兽用核酸疫苗的研究进展及应用展望

本文主要介绍了核酸疫苗的构建、作用机理和兽用核酸疫苗的研究进展以及应用,为兽用核酸疫苗乃至其他领域核酸疫苗的进一步研究提供了有益的参考。     

三种不同核酸分析系统的效率比较分析

以4种转基因玉米基因组DNA为研究对象,使用转基因事件特异性引物进行普通PCR及多重PCR扩增,并分别应用普通琼脂糖电泳以及ABI 3730XL、岛津MultiNA、QIAGEN QIAxcel这3种核酸分析仪进行分析,比较了各种检测方法的优缺点。研究结果对不同检测需求的核酸片段大小分析方法提供了重要参考。     

GeneFinderTM核酸染料对玉米花粉管通道导入路径的研究

花粉管通道法是一种借助于植物自身卵细胞或受精卵为转化对象的直接转化技术,是一种颇具特色的转基因技术。本试验将GeneFinderTM核酸染料加入外源DNA中,通过紫外成像仪对外源DNA导入后不同时期玉米花丝在亮度上的对比差异来观察外源DNA不同时间段所通过的路径变化,因而为研究外源DNA导入路径提供了一种新的试验方法。