全文获取类型
收费全文 | 804篇 |
免费 | 11篇 |
国内免费 | 74篇 |
专业分类
林业 | 52篇 |
农学 | 49篇 |
基础科学 | 4篇 |
49篇 | |
综合类 | 305篇 |
农作物 | 46篇 |
水产渔业 | 22篇 |
畜牧兽医 | 295篇 |
园艺 | 36篇 |
植物保护 | 31篇 |
出版年
2023年 | 14篇 |
2022年 | 13篇 |
2021年 | 31篇 |
2020年 | 44篇 |
2019年 | 41篇 |
2018年 | 5篇 |
2017年 | 31篇 |
2016年 | 54篇 |
2015年 | 50篇 |
2014年 | 54篇 |
2013年 | 71篇 |
2012年 | 126篇 |
2011年 | 76篇 |
2010年 | 63篇 |
2009年 | 56篇 |
2008年 | 46篇 |
2007年 | 43篇 |
2006年 | 27篇 |
2005年 | 14篇 |
2004年 | 7篇 |
2003年 | 7篇 |
2002年 | 2篇 |
2001年 | 1篇 |
2000年 | 5篇 |
1998年 | 1篇 |
1994年 | 1篇 |
1992年 | 1篇 |
1990年 | 1篇 |
1988年 | 1篇 |
1985年 | 1篇 |
1984年 | 1篇 |
1956年 | 1篇 |
排序方式: 共有889条查询结果,搜索用时 15 毫秒
21.
YAN Xiao-cheng MU Wei-na QIANG Ye ZHAO Hui-chen SUN Qi YAO Xiao-min ZHANG Yu-chao LIU Yuan-tao 《园艺学报》2000,36(9):1661-1666
AIM To investigate the effects of cytochrome P450 (CYP450) epoxygenase/epoxyeicosatrienoic acid (EET) pathway on insulin resistance in obese mice, and to explore the possible mechanisms. METHODS High-fat diet-induced obesity model was established in C57BL/6Cnc mice, and the obese mice were randomly divided into 3 groups, including obesity group (treated with saline; n =10), EET group (treated with 11,12-EET; n =10) and EET inhibitor 14,15-epoxyeicosa-5(Z)-enoic acid (EEZE) group (n =10). Normal C57BL/6Cnc mice (n =10) treated with saline served as control. Protein expression of CYP2J2 (one of CYP450 epoxygenases) and hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) was measured by Western blot. Vessel-like structure was detected by immunofluorescence staining. The serum levels of insulin, tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin (IL)-1β, IL-6 and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) were measured by ELISA. RESULTS In obese mice, homeostasis model assessment of insulin resistance (HOMA-IR) values were increased, the protein level of CYP2J2 was reduced, and the protein level of HIF-1α was increased in adipose tissues as compared with the controls (P <0.05). The serum levels of MCP-1, IL-1β, IL-6 and TNF-α were also significantly increased in obese mice (P <0.05). After treatment with 11, 12-EET, the HOMA-IR values were decreased compared with vehicle-treated obese mice, HIF-1α expression levels were decreased in the adipose tissue, and the serum levels of MCP-1, IL-1β, IL-6 and TNF-α were reduced (P <0.05). Immunohistochemical results of adipose tissue from vehicle-treated obese mice showed a marked decrease in vessel-like structures (CD31-positive) compared with normal control mice (P <0.05). EET treatment significantly increased the newly formed vessel-like structures in the visceral adipose tissues of obese mice as compared with vehicle-treated obese mice (P <0.05). CONCLUSION High-fat diet-induced obesity and insulin resistance are closely related to the CYP450 pathway. Exogenous EETs effectively decrease obesity-induced insulin resistance possibly through pro-angiogenesis and attenuation of hypoxia and inflammation. 相似文献
22.
[目的]通过研究外源脱落酸(ABA)和冠菌素(COR)对小麦籽粒萌芽的影响,探索COR用于防治小麦收获期穗发芽的可行性。[方法]以易穗发芽的白皮小麦品种济麦22和抗穗发芽的红皮小麦品种扬麦16为材料,以不同浓度ABA和COR处理两品种小麦籽粒后进行萌芽,测定萌芽率、芽长以及萌芽过程中的α-淀粉酶活性。[结果]38μmol/L以上浓度的ABA处理和0.05μmol/L以上浓度的COR处理均对两品种籽粒的萌发及芽的生长表现出显著的抑制作用,且COR抑制小麦种子萌发的生物活性约为ABA的200~1 500倍;浓度高于76μmol/L的ABA和0.05μmol/L的COR对两品种小麦籽粒萌发过程中的α-淀粉酶活性有抑制作用,且浓度越高抑制程度越大。[结论]ABA和COR可能通过抑制α-淀粉酶活性来抑制小麦籽粒的萌发和芽的生长;同浓度同一抑制剂处理下,白皮的济麦22萌芽及α-淀粉酶活性受抑制的程度显著高于扬麦16。该研究为COR用作控制大田小麦收获期穗发芽的可行性提供理论依据。 相似文献
23.
石榴皮提取物的酶抑制作用研究 总被引:6,自引:0,他引:6
[目的]研究石榴皮提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用。[方法]以液固比、提取时间、微波功率3个因素,石榴皮多酚为响应值进行Box-Behnken设计,对石榴皮进行提取。以淀粉和PNPG为底物,构建符合人体糖尿病病理的生理特征、更加具有临床意义的高通量体外筛选模型。[结果]结果表明,石榴皮提取物对α-淀粉酶的抑制作用随浓度的增加而增加,60 mg/ml时达39.55%;石榴皮提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,浓度在1~10μg/ml时,其抑制率与浓度呈线性关系;当浓度≥10μg/ml时,其增大趋势趋于平缓。提取物浓度在10μg/ml时,其抑制率达90%。[结论]石榴皮提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶都有不同程度的抑制作用,是潜在的降糖功能因子。 相似文献
24.
将100只健康小鼠皮下注射海洛因(10mg/kg)40d,然后分别用不同剂量的(50、100、200mg/kg)油橄榄叶提取物(OLE)进行皮下注射治疗,观察肺脏组织结构的变化,检测肺脏中白介素-1β(interleukin-β,IL-β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-A,TNF-α)的表达情况.结果表明:与模型对照组相比,OLE使海洛因依赖小鼠肺泡直径、肺泡隔厚度减小,肺脏中IL-1β和TNF-α的表达明显减弱,且呈较好的量效关系,表明OLE能够对海洛因造成的肺损害起到保护作用,其作用机制可能是OLE抑制了IL-1β和TNF-α的在肺中的表达. 相似文献
25.
华山新麦草α-醇溶蛋白基因的克隆及原核表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
【研究目的】克隆华山新麦草(Psathyrostachys huashanica)的α-醇溶蛋白基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】采用同源克隆法从华山新麦草基因组DNA中分离克隆出α-醇溶蛋白基因并进行序列分析,将克隆的华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5克隆到表达载体pET-28a (+)上,获得重组质粒pET28a-Gli-Ns转化大肠杆菌BL21 (DE3)并诱导表达。【结果】从华山新麦草基因组DNA中克隆了4个α-醇溶蛋白基因:Gli-Ns-2 (FJ713595)、Gli-Ns-3 (GQ139525)、Gli-Ns-4 (GQ139526)和Gli-Ns-5 (GQ139527)。序列分析表明,4条序列具有α-醇溶蛋白基因的典型结构特征,含有8个或9个半胱氨酸残基,序列FJ713595为假基因。利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核系统中特异性表达。Western-blot证实融合蛋白可成功表达。【结论】克隆了4个华山新麦草的α-醇溶蛋白基因序列,基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核表达系统中成功表达,为小麦品质改良提供了新的候选基因。 相似文献
26.
基于α_s-酪蛋白特异性的牛乳总蛋白质ELISA定量检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究旨在建立牛乳中总蛋白质的ELISA定量检测方法,并评价该方法在牛乳掺假辨识中的应用效果。首先用αs-酪蛋白标准品免疫新西兰白兔,制备αs-酪蛋白特异性抗血清,并建立αs-酪蛋白的间接ELISA检测方法,结果显示血清效价为1∶640,αs-酪蛋白检测的线性范围是25~600 ng/ml,R2=0.999 5,回收率是96.6%~105.2%。再应用乳成分分析仪,凯氏定氮法和所建立的ELISA法测定8份来源不同的原料乳中总蛋白和αs-酪蛋白含量,结果显示不同牛乳中总蛋白质含量在0.029 2~0.029 8 g/ml,αs-酪蛋白含量在0.008 4~0.009 2 g/ml,占牛乳总蛋白质的比例恒定,平均为0.3,并用该系数建立牛乳中总蛋白质的定量方法。最后对5份人为兑水稀释、添加尿素、BSA和三聚氰胺的模拟掺杂牛乳样品进行检测,测定结果表明基于αs-酪蛋白的ELISA方法比乳成分分析仪法和凯氏定氮法具有更高的灵敏性和特异性,含氮添加物对测定结果无显著影响(P0.05),更适合于作为原料乳及含乳产品中牛乳蛋白质的定量分析。 相似文献
27.
[目的]构建含人雌激素相关受体α配体结合域区段的原核表达载体,并在大肠杆菌表达系统中表达。[方法]用Trizol试剂提取人肺腺癌A549细胞总RNA,逆转录为cDNA;应用PCR扩增人EERα-LBD基因片段,插入表达载体pET-30a-c(+)中;转化大肠杆菌BL2 l(DE3)PLysS,经IPTG诱导后表达并鉴定。[结果]应用PCR方法扩增出约687 bp的基因片段,酶切、纯化、连接至载体后,经测序与GenBank中的一致,表达蛋白相对分子质量约32 kD,纯化后用生物大分子相互作用系统鉴定为目的蛋白。[结论]已成功获得人EERα-LBD融合蛋白,为进一步的研究和应用奠定了基础。 相似文献
28.
[目的]获得研究鸡CD8分子的单克隆抗体。[方法]用自行设计的引物PCR扩增鸡CD8分子α链部分基因片段,构建2个原核重组质粒,该片段经原核表达和纯化后免疫BALb/c小鼠,最后将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,细胞上清液用ELISA检测。[结果]PCR扩增获得大小约为510 bp的基因片段。构建的pET-32a-CD8α导入大肠杆菌,诱导表达获得了大小为39 kD的融合蛋白H is-CD8α。融合细胞经亚克隆,其上清液用ELISA检测和筛选,获得1株稳定传代和分泌抗CD8α的抗体的杂交瘤细胞株。该株细胞被命名为C11。上清液的ELISA抗体效价达1:600。[结论]该研究以原核表达的CD8α为抗原制备了1株单克隆抗体。 相似文献
29.
柔嫩艾美耳球虫MIC4-N的真核表达 总被引:1,自引:1,他引:1
应用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫的MIC4-N端基因并去掉信号肽,为了表达检测和纯化的方便,设计引物时改变了3'端的终止密码子,使MIC4-N的C末端带有c-myc和6His抗原标签。通过双酶切,使加工好的MIC4-N基因连接到毕赤酵母表达载体pPICZαA上,转化JM109感受态细胞。再经EcoRⅠ与NotⅠ双酶切、菌落PCR及测序鉴定,证明目的基因与真核表达载体pPICZαA构建成功,单酶切重组表达载体、电转转入GS115酵母感受态细胞中。用含高浓度Zeocin的YPD平板筛选酵母菌落,菌落PCR法鉴定转化成功的阳性菌,在BMMY培养基中摇瓶培养,并用甲醇诱导,经SDS-PAGE及Western Blot鉴定,蛋白分泌表达成功。 相似文献
30.
郑德森 《福建农林大学学报(自然科学版)》1990,(3)
甘蔗品种(种)叶片α-淀粉酶活性变化的基因型效应较大,12个供试材料间的差异明显,种间的差异大于品种间的差异,在个体发育过程中变化幅度较小。β-淀粉酶的活性变化与生长发育的关系较为密切,其变化呈典型的单峰曲线,活性的最高峰出现在甘蔗的旺长时期。几乎所有供试材料酶活性变化趋势是一致的,但变化幅度有差异。分蘖末期至伸长初期,同一材料的β-淀粉酶活性通常高于α-淀粉酶。 相似文献