不同蛋白水平下添加晶体氨基酸对罗非鱼生长和饲料利用的影响

实验主要研究不同蛋白水平下添加晶体氨基酸(CAA)对罗非鱼生长和饲料利用的影响。实验饲料为全植物蛋白实用饲料,通过调整豆粕含量,设置出4个蛋白梯度(蛋白含量:34%、32%、30%和28%),每个蛋白水平下设置不添加CAA组(34CP-28CP)和添加CAA组(34AA-28AA),后者通过添加赖氨酸、蛋氨酸和苏氨酸,使之在饲料中的水平分别达到1.43%、0.75%和1.05%,满足罗非鱼的必需氨基酸需要量。实验结果显示,34AA、30AA和28AA组的增重率和特定生长率(1074.75%、951.60%、815.12%和4.11%、3.92%、3.69%)显著高于相应的不添加组(869.85%、641.25%、523.75%和3.79%、3.33%、3.05%),32AA与32CP之间则没有显著差异(917.45%对882.27%、3.87%对3.81%)。从增重率的增长幅度来看,30%和28%蛋白水平下添加CAA的效果更为明显(48.4%、55.6%对23.6%、4%)。饲料效率、蛋白质效率、蛋白质保留率和能量保留率方面,34CP、34AA、32CP和32AA4组间没有显著差异;30CP和28CP组显著低...     

尼罗罗非鱼盐碱选育 F3、F4、F5 代鱼苗盐碱耐受性评估

【目的】对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）盐碱选育三、四和五代（F3、F4 和 F5）鱼苗的盐碱 耐受性进行评估,以期为盐碱选育尼罗罗非鱼提供基础资料。【方法】采用急性致死试验方法,分别测定了尼 罗罗非鱼盐碱选育 F3、F4 和 F5 代对盐、碱（NaHCO3）以及混合盐碱的耐受指标。【结果】在急性致死条件下, F3、F4和 F5代鱼苗 96 h盐度半致死浓度分别为 22.473、24.468、23.833 g/L。96 h碱度半致死浓度分别为 8.256、8.443、 8.453 g/L。混合盐碱试验中,盐度为 10 g/L时,无死亡情况出现;盐度为 15 g/L时,96 h碱度半致死浓度分别为 4.612、 4.538、4.883 g/L;盐度为 20 g/L 时,96 h 碱度半致死浓度分别为 1.861、1.875、1.782 g/L。各急性试验下,F4 和 F5 的半致死浓度值差异均不显著;急性盐度试验,F4 和 F5 盐度半致死浓度显著高于 F3;急性碱度试验和盐碱混 合试验,F4 和 F5 半致死浓度与 F3 差异不显著。【结论】尼罗罗非鱼盐碱选育 F5 代鱼苗盐碱耐受性趋于稳定。     

尼罗罗非鱼肝cDNA文库的构建

用Stratagene技术构建了吉富品系尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus,GIFT strain)肝cDNA文库。首先用TRIZOL法提取肝总RNA,经琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度检测,表明总RNA纯度高且完整性良好。然后分离纯化mRNA,合成双链cDNA之后,加EcoRⅠ接头、EcoRⅠ末端磷酸化、XhoⅠ消化,并用葡聚糖凝胶柱层析分级收集cDNA样品,得到300 mg cDNA,符合建库要求。双链cDNA与Uni-ZAP XR Vector连接后,用GigapackⅢGold Packaging Extract进行体外包装得到cDNA文库。测得的文库滴度为1.25×107pfu/mL,文库噬菌体的滴度符合文库保存和筛选实验的要求。随机挑选20个阳性单克隆噬菌斑进行PCR鉴定后,得出文库的重组率达100%,扩增出的片段主要集中在0.5~2 kb之间,平均插入片段长度约为1.05 kb,结果说明本实验所构建的cDNA文库质量较高。取扩增文库80μL进行体外切割,约含3.6×106个重组子,切割后phagemid量为2.0×106,切割效率为79.4%。经抽提质粒获得质粒DNA约1.2 mg。     

井盐水池塘中国对虾与尼罗=罗非鱼混养的研究

1999年 6～ 9月 ,利用 6个面积为 0 1hm2 的井盐水池塘研究了中国对虾 (Penaeuschinensis)与尼罗罗非鱼 (Orecohromisniloticus)投饵混养的理论和技术。结果表明 ,罗非鱼选择性地滤食大型浮游生物 ,使池水溶氧量增加 ,促进了对虾的生长 ,提高了饲料和空间的利用率。对虾与罗非鱼的密度分别为 1 5 0 0 0 0尾 /hm2 和 1 0 0 0尾 /hm2 时 ,对虾的生产力为 1 2 9g/(m2 ·d) ,成活率达 61 7% ,产量为 5 5 0kg/hm2 ,均比单养对虾高     

尼罗罗非鱼Dmrt1基因克隆及在不同组织中的表达

Dmrt1基因是Dmrt基因家族的一个重要成员,在动物性别决定过程中发挥重要作用。参照小鼠Dmrt1基因DM保守区及有关文献,设计了1对简并引物．扩增了尼罗罗非鱼的Dmrt1基因．并对扩增产物进行了亚克隆与测序。结果在雌雄尼罗罗非鱼个体中各获得1个预期的基因片段．长度为140bp．序列无性别差异。序列同源性分析表明,尼罗罗非鱼Dmrt1基因DM盒区核苷酸序列与人和鼠相应基因的同源性为78％：编码的氨基酸序列与人和鼠相应基因编码序列的同源性为89％．充分显示了Dmrt1基因在进化上的高度保守性。进一步根据获得的Dmrt1序列,设计1对特异引物,采用RT—PCR技术对尼罗罗非鱼不同组织Dmrt1基因的表达进行了研究。结果发现,Dmrt1只在精巢中特异表达,在卵巢、眼、肠、鳃及心脏组织中无表达,提示该基因在性别分化和功能维持上可能具有重要作用。     

尼罗罗非鱼8个养殖群体遗传差异的微卫星分析

利用18对微卫星引物对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)国内外8个养殖群体进行遗传差异分析.结果表明:(1)8个群体的平均等位基因数(Na)为3.61～5.11,平均有效等位基因数(Ne)为2.81～3.76,平均观察杂合度(Ho)为0.861 1～0.925 0,平均期望杂合度(He)为0.603 9～0.697 7,平均多态信息含量(PIC)为0.522 9～0.637 3.表明这8个养殖群体具有丰富的遗传变异.(2)在对8个群体的遗传距离和遗传相似度进行估算基础上所作聚类分析表明, 8个群体分为两大支,3个"吉富"群体明显聚为一支,其他5个群体聚为一支, 反映了这8个群体的亲缘关系.(3)微卫星引物UNH187可以初步作为区分"新吉富"尼罗罗非鱼和其他尼罗罗非鱼群体的特异性标记.     

2007-2012年中国罗非鱼无乳链球菌流行菌株血清型分析

采用PCR血清型鉴定方法,对2007-2012年从广西、广东、海南、福建和云南等地养殖的罗非鱼Oreochromis niloticus中分离获得的168株无乳链球菌Streptococcus agalactiae流行菌株的血清型进行分析。结果表明：有159株为Ⅰa血清型,6株为Ⅰb血清型,3株为Ⅲ血清型。各区域流行菌株血清型也存在差异：从广西自治区7个地区50个养殖场的罗非鱼中分离的61株无乳链球菌中,有54株为Ⅰa型,4株为Ⅰb型,3株为Ⅲ型;从广东省10个地区59个养殖场的罗非鱼中分离的64株无乳链球菌中,有63株为Ⅰa型,1株为Ⅰb型;从海南省5个地区26个养殖场的罗非鱼中分离的33株无乳链球菌中,有32株为Ⅰa型,1株为Ⅰb型;从福建省漳州6个养殖场的罗非鱼中分离的6株和从云南省文山4个养殖场的罗非鱼中分离的4株均为Ⅰa型。研究表明,2007-2012年中国罗非鱼链球菌病流行菌株血清型存在Ⅰa、Ⅰb和Ⅲ3种血清型,Ⅰa型为主要血清型,研究结果可为准确分析中国罗非鱼链球菌病流行规律和特点提供数据,为该病防治及疫苗候选菌株筛选提供理论基础。     

添加海带废渣饲料养殖尼罗罗非鱼种的试验

试验设计了海带废渣添加量分别为０％、５％、１０％、２０％和３０％等５种水平，粒度小于０．３ｍｍ的５种饲料，饲料中鱼粉添加量均为５％，实测粗蛋白含量平均为２３．１％．结果表明，５％海带废渣饲料组的尼罗罗非鱼种（Ｏｒｅｏｃｈｒｏｍｉｓｎｉｌｏｔｉｃｕｓ）增重效果分别显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）和３０％海带废渣饲料组（Ｐ＜０．０１），１０％和２０％海带废渣饲料组亦分别显著高于３０％海带废渣饲料组（Ｐ＜０．０５），而５％－２０％海带废渣饲料组间的增重效果无显著差异．５％海带废渣饲料组的饲料系数最低，为２．１０．氨基酸蓄积率和蛋白质效率（ＰＥＲ）亦以５％海带废渣饲料组为最高．饲料的必需氨基酸（ＥＡＡ）含量与鱼体肌肉组织的必需氨基酸含量呈微弱正相关，而与鱼体肌肉组织的氨基酸蓄积率呈显著负相关     

尼罗罗非鱼仔鱼个体发育及性腺分化的发育

通过形态学、组织学的描述和显微结构的观察,研究了尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）仔鱼在自然水温条件下（26～30℃）的个体发育和性腺分化发育过程。结果表明,仔鱼个体发育分为2个时期,仔鱼前期（从出膜到卵黄囊消失）和仔鱼后期（卵黄囊消失至奇鳍褶消失）;性腺发育分化的时序为：5DPH时,开始出现生殖嵴;10DPH时,出现少数原始生殖细胞,形成原始性腺;28DPH时,可清晰辨认卵原细胞,呈现明显的性腺分化组织学特征,至42DPH时可辨认精原细胞。