紫贻贝野生群体与养殖群体线粒体COI基因的遗传比较分析

[目的]比较紫贻贝野生群体与养殖群体线粒体COⅠ基因的遗传多样性,为其种质资源筛选提供理论依据。[方法]采集山东省乳山市野生紫贻贝(Mytilus edulis Linnaeus)和养殖紫贻贝各12个样本;通过设计特异性引物,采用PCR技术对24个个体的mtDNA COⅠ序列进行了扩增,测序得到的序列总碱基数为706 bp;采用MEGA(Version 4.0)和DnaSP(Version 4.0)软件对序列进行了分析。[结果]24条序列中T、C、A和G碱基平均含量分别为34.6%、16.7%、25.9%和22.8%,其中A+T的含量(60.5%)显著高于G+C含量(39.5%),表现了明显的碱基偏倚。24个个体表现为18种单倍型,包括568个多态位点,单倍型间平均遗传距离为0.683,单倍型多态性(h)为0.953,核苷酸多态性(π)值为0.317 69。[结论]紫贻贝的遗传多样性水平较高,且乳山养殖群体和野生群体无遗传分化。     

基于线粒体COⅠ基因比较分析野生与养殖厚壳贻贝种群的遗传多样性

[目的]通过比较分析线粒体CO I基因,探讨福州厚壳贻贝野生型和养殖型种群的遗传多样性。[方法]以福建省福州市野生厚壳贻贝(Mytilus coruscus Gould)和养殖厚壳贻贝各20个样本为试验材料,通过设计特异性引物,采用PCR技术对该40个个体的mtDNACO I(线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ)序列进行扩增,通过测序分析和序列比对检索,鉴定扩增的序列,并利用MEGA(version 4.10)和DnaSP(version 4.0)软件对序列进行分析。[结果]测序结果显示扩增序列总碱基数为668 bp,40条序列中T、C、A和G碱基平均含量分别为28.0%2、2.8%3、2.3%和16.9%,其中A+T的含量(60.3%)显著高于G+C含量(39.7%),表现了明显的碱基偏倚;40个个体表现为26种单倍型,包括408个多态位点,单倍型间平均遗传距离为0.299,单倍型多态性(h)为0.944,核苷酸多态性(π)值为0.153 06。上述结果表明福州厚壳贻贝的遗传多样性水平比较高,并且养殖群体和野生群体无遗传分化。[结论]该研究揭示了福州厚壳贻贝的遗传资源现状,试验结果可为厚壳贻贝良种筛选提供参考依据。     

紫贻贝多糖脱除蛋白质方法的研究

探讨了酶法与Sevage法联用脱除紫贻贝（Mytilus edulis linnaeus）多糖蛋白。通过正交中心组合实验，应用响应面分析法考察酶法脱蛋白的工艺条件。结果表明，酶法脱蛋白的最优工艺参数为：pH7．1，枯草杆菌中性蛋白酶加入量0．5U／mg粗多糖，温度41℃，氯化钙加入量7．4mg／g，时间3h。在酶解的基础上应用Sevage法脱除游离蛋白，适宜的工艺条件为：氯仿：正丁醇=5：1，料液比4：1，振摇时间20min。酶法与Sevage联用法脱除贻贝多糖蛋白的脱除率为78．5％；与其它传统脱蛋白方法比较，该法适应范围广、样品损耗少、经济、快速、效果理想，为多糖的分离纯化研究提供了有益的参考。     

厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin真核表达载体构建及表达的初步分析

[目的]研究厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin真核表达载体构建及表达。[方法]通过对前期所获得的厚壳贻贝多条mytilin和myticin抗菌肽基因进行筛选,选择其中5条厚壳贻贝抗菌肽基因,采用PCR技术和DNA重组技术构建了相关的真核表达载体,并采用LiAC转化法将其转化到S78酿酒酵母中并进行初步表达分析。[结果]5种厚壳贻贝抗菌肽基因的真核表达载体构建成功,对转化酵母进行mRNA检测结果表明,5种厚壳贻贝抗菌肽的基因在S78酵母中成功转录。[结论]该研究结果为最终采取基因工程手段表达厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin并在此基础上开展厚壳贻贝抗菌肽的后续研究奠定基础。     

厚壳贻贝低温无水保活技术

[目的]探索厚壳贻贝低温无水保活技术。[方法]以低温驯化后的厚壳贻贝为研究对象,进行了以低温保活技术为主的研究。在不同湿度条件下,对厚壳贻贝在0、4、8℃以及常温条件下的保活效果进行了大量的试验。[结果]成活率为98%时,在-1.5~-0.5℃下可保活9 d,在4和0℃下都可保活7 d,8℃可保活4 d。在生态冰温-1.5~-0.5℃下保活最好;用冰藏0℃的方法最实用。同时,控制湿度对厚壳贻贝保活效果有正面的影响。[结论]低温无水法保活厚壳贻贝技术具有成本较低、无污染等优点。     

弧菌生物被膜的动态演替对厚壳贻贝附着的影响

为探讨生物被膜动态演替过程中如何影响海洋无脊椎动物附着,实验选取了对厚壳贻贝附着具有不同诱导活性的弧菌Vibrio cyclitrophicus、V. chagasii和Vibrio sp. 22形成单一生物被膜,观察弧菌动态演替中生物被膜细菌密度、膜厚度和胞外产物等生物学特性变化,探究其对厚壳贻贝稚贝附着的影响。结果显示,弧菌生物被膜动态演替过程中,被膜细菌随着时间推移出现聚集现象,细菌密度和膜厚度也随着时间变化呈先增多后减少。除了Vibrio sp. 22,V. cyclitrophicus和V. chagasii生物被膜细菌密度和膜厚度与稚贝附着均有不同程度的相关性。所测弧菌生物被膜胞外产物的显微激光共聚焦结果分析发现,胞外多糖随着时间先增多,然后开始下降。相对比而言,胞外蛋白和胞外脂质无显著性变化。因而,胞外多糖变化规律与稚贝在被膜上附着变化相一致,表明胞外多糖是生物被膜动态演替过程中调控厚壳贻贝附着的重要因素。本实验初步探讨了生物被膜动态演替特征及其对厚壳贻贝稚贝附着的影响,对于后续进一步在海区开展生物被膜的动态演替与海洋底栖动物附着相互关系研究具有重要的学术价值,同时对于人...     

紫贻贝消化系统的组织学和组织化学研究

对紫贻贝消化系统进行了组织学和组织化学研究。紫贻贝消化系统由消化腺－肝胰遥和消化道－食道、胃（包括晶杆囊）、肠和直肠组成。消化腺为复管腺,腺上皮有消化细胞和嗜碱性细胞两种类型。消化道管壁由粘膜层、粘膜下层和外膜组成,无肌层。粘膜上皮主要为单层柱状纤毛细胞。组织化学研究表明：消化嗜碱性细胞富含蛋白质和ＲＮＡ,消化细胞富含脂类和多种酶类：蛋白酶、非特异性酯酶、脂酶、酸性磷酸酶及碱性磷酸酶。消化道中酶的     

紫贻贝多糖脱除蛋白质方法的研究

探讨了酶法与Sevage法联用脱除紫贻贝（Mytilus edulis linnaeus）多糖蛋白。通过正交中心组合实验,应用响应面分析法考察酶法脱蛋白的工艺条件。结果表明,酶法脱蛋白的最优工艺参数为：pH7．1,枯草杆菌中性蛋白酶加入量0．5U／mg粗多糖,温度41℃,氯化钙加入量7．4mg／g,时间3h。在酶解的基础上应用Sevage法脱除游离蛋白,适宜的工艺条件为：氯仿：正丁醇=5：1,料液比4：1,振摇时间20min。酶法与Sevage联用法脱除贻贝多糖蛋白的脱除率为78．5％;与其它传统脱蛋白方法比较,该法适应范围广、样品损耗少、经济、快速、效果理想,为多糖的分离纯化研究提供了有益的参考。     

2007-2009年浙江省嵊泗赤潮监控区表层沉积物和紫贻贝重金属含量分析

研究了2007-2009年浙江省嵊泗赤潮监控区表层沉积物和紫贻贝重金属Hg、As、Cu、Pb和Cd含量。结果表明：嵊泗赤潮监控区表层沉积物质量良好,符合一类沉积物质量标准。Cu和Pb的含量明显高于其它3种重金属元素,其次是As〉Cd〉Hg;污染指数大小排序为Cu〉As,Pb〉Cd〉Hg,沉积物将有可能受到Cu的污染,应引起重视。紫贻贝重金属含量大小为Cu〉Cd〉Pb,As〉Hg,Cu、Pb和Cd含量有升高趋势,Pb和Cd的污染指数较高,紫贻贝已受到Pb和Cd的污染。     

不同温度下形成的深海菌膜对厚壳贻贝幼虫变态的影响

为探讨深海细菌生物被膜对温度的适应性及对厚壳贻贝幼虫变态的影响,分别在4、18、25、37°C条件下培养生物被膜,调查温度对细菌密度、膜厚和胞外产物等生物学特性的影响,以及被膜对幼虫变态发育的影响。结果显示,4个温度条件下产生的生物被膜均可有效促进幼虫变态发育。其中,深海菌株Virgibacillus sp. 1在18°C时生物被膜的变态诱导活性最高(35%),且α胞外多糖含量较高,诱导活性与温度和细菌密度均显著相关;同时温度与其细菌密度和膜厚均显著相关。2株深海假交替单胞菌诱导活性与细菌密度均显著相关,温度仅影响Pseudoalteromonas sp. 33细菌密度。研究表明,3株深海细菌均有很好的温度适应性,且都能形成生物被膜;温度变化导致生物被膜的生物学特性改变,最终影响其对幼虫的诱导效果。