大鳍鳠 IL-1β基因cDNA克隆及表达分析

白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)作为炎症反应的关键介导物,通过开启基因的表达来调控免疫反应。为了丰富鱼类该基因的研究,实验采用RT-PCR和RACE-PCR技术,首次从鲇形目鱼类大鳍鳠中获得IL-1β基因cDNA的全序列。大鳍鳠IL-1β基因cDNA全长1 194 bp,包括3’非编码区域(UTR)为224 bp,5’UTR为82 bp,开放阅读框(ORF)为888 bp,编码296个氨基酸。预测的蛋白质分子量为33.843 43 ku,等电点为5.00。与斑点叉尾等其他8种脊椎动物进行同源性分析发现,大鳍鳠IL-1β氨基酸序列与斑点叉尾相似性最高,为79.0%,与原鸡的相似性最低,为22.0%。进化树分析表明,大鳍鳠IL-1β与斑点叉尾聚为一支。半定量PCR显示,大鳍鳠IL-1β基因在肌肉、脑、脾脏、头肾、体肾、胃、皮肤、肝脏及肠等组织中都有不同程度的表达;经嗜水气单胞菌刺激后大鳍鳠IL-1β基因在头肾和脾脏的转录表达显示,1 d后该基因在头肾与脾脏中的表达量都达到最大,15 d后恢复到刺激前的水平。研究显示,大鳍鳠IL-1β在抵御病原感染过程中发挥重要作用。     

密斯特黄彩鲶人工繁殖与胚胎发育的研究

从海南省山溪中捕捞收集到野生密斯特黄彩鲶,在池塘养殖条件下培育到性成熟,于2008年4月至10月,3次对其进行了人工繁殖和胚胎发育的系统研究。结果表明,密斯特黄彩鲶受精卵呈圆球形,透明,略带淡黄色。卵径平均1．0mm,沉性,有黏性,属黏性卵。黄彩鲶胚胎发育过程分为7期,包括受精卵阶段、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期、孵出期,历时约25h,胚胎发育总积温约为693．7h·℃。     

元江水系越鳠年龄鉴定材料的比较

分析比较了元江越鳠(Mystus pluriradiatus)不同年龄鉴定材料的鉴定结果。结果显示:微耳石磨片、星耳石和脊椎骨材料为鉴定元江越鳠年龄的可利用材料,矢耳石细小且脆不适合用于越鳠的年龄鉴定。微耳石磨片和星耳石的年龄判别能力最高,均达到96.0%,脊椎骨的年龄判别能力为93.3%;最大年龄读数出现在微耳石磨片和脊椎骨上,读数为5+龄;微耳石磨片的同一鉴定者两次独立年龄读数的吻合率最高为94.5%、脊椎骨次之为91.7%、星耳石最低为88.1%;两种年龄材料读数之间的吻合率比较中,微耳石磨片与星耳石的吻合率较高为90.9%,两者的年龄读数在低龄组时吻合较好,微耳石磨片与脊椎骨的吻合率为89.3%,3+龄以上时二者的年龄读数吻合率高。结果表明,鉴定低龄个体选择星耳石材料(n+龄≤3+龄),高龄个体用微耳石磨片进行辅助鉴定的年龄鉴定方法对元江越鳠进行年龄鉴定较为准确。     

短期饥饿对大鳍鱯生化组成、氨基酸和脂肪酸组成的影响

在水温(21±1)℃条件下,研究了大鳍鱯(Mystus macropterus)在短期饥饿胁迫下生化组成、氨基酸和脂肪酸含量的变化.实验时间分别为饥饿0 d(S0)、饥饿3 d(S3)、饥饿6 d(S6)、饥饿9 d(S9)和饥饿12 d(S12).随着饥饿时间延长,水分显著升高(P<0.05),蛋白质、肝糖原和肌糖原显著降低(P<0.05),脂肪和灰分先显著降低(P<0.05),饥饿9 d均出现回升(P<0.05).氨基酸总量、必需氨基酸和非必需氨基酸含量均呈规则波动,饥饿12 d均出现反弹现象,略高于实验起始值.饱和脂肪酸(SFA)呈先下降、后上升、再下降的趋势,单不饱和脂肪酸(MUFA)先上升后呈规则波动,多不饱和脂肪酸(PUFA)变化规律与饱和脂肪酸恰好相反,饥饿12 d时仅高不饱和脂肪酸被保留,略高于实验起始值.双键位置不同的脂肪酸在饥饿过程中的损失速度也有差异,具体为∑n-9PUFA＞∑n-3PUFA＞∑n-6PUFA.     

短期饥饿对大鳍鱯生化组成、氨基酸和脂肪酸组成的影响

在水温(21±1)℃条件下,研究了大鳍鱯(Mystus macropterus)在短期饥饿胁迫下生化组成、氨基酸和脂肪酸含量的变化。实验时间分别为饥饿0d(S0)、饥饿3d(S3)、饥饿6d(S6)、饥饿9d(S9)和饥饿12d(S12)。随着饥饿时间延长,水分显著升高(P<0.05),蛋白质、肝糖原和肌糖原显著降低(P<0.05),脂肪和灰分先显著降低(P<0.05),饥饿9d均出现回升(P<0.05)。氨基酸总量、必需氨基酸和非必需氨基酸含量均呈规则波动,饥饿12d均出现反弹现象,略高于实验起始值。饱和脂肪酸(SFA)呈先下降、后上升、再下降的趋势,单不饱和脂肪酸(MUFA)先上升后呈规则波动,多不饱和脂肪酸(PUFA)变化规律与饱和脂肪酸恰好相反,饥饿12d时仅高不饱和脂肪酸被保留,略高于实验起始值。双键位置不同的脂肪酸在饥饿过程中的损失速度也有差异,具体为∑n-9PUFA>∑n-3PUFA>∑n-6PUFA。     

翘嘴鲌和大鳍鳠和斑鳜肝脏的比较解剖

对翘嘴鲌、大鳍鳠和斑鳜肝脏进行了比较解剖观察,描述了3种鱼肝脏的的外形特征、门静脉、肝管及胆囊。在3种鱼比较解剖的基础上,讨论了鱼类肝脏的位置及外形特征,翘嘴鲌肝脏的2种特有结构,鱼类的肝门及门静脉;进一步探讨了3种鱼肝脏解剖学的进化水平。     

大鳍鳠初级卵母细胞的超微结构

用透射电镜观察大鳍鱯初级卵母细胞的超微结构,在初级卵母细胞早期,细胞器丰富,线粒体发达,并可见到卵黄核和颗粒细胞,在初级卵细胞后期,在滤泡层下面可见到放射层。该时期线粒体、卵黄核的形态和数量以及细胞膜都发生了较大的变化。     

大鳍鳠脑垂体和血清生长激素水平的季节变化

根据大鳍脑垂体匀浆和血清样品的稀释曲线与鲤生长激素（ｃＧＨ）标准曲线的平行性,采用鲤生长激素的标准品和抗血清（ＲＡＧ）测定了周年中几个不同时期大鳍脑垂体和血清样品的生长激素（ＧＨ）含量,发现脑垂体和血清中的ＧＨ含量均表现出明显的季节变化。脑垂体的ＧＨ含量分别在３月份和８月份出现两个峰。４～７月的繁殖期和１１～１月的越冬期间,脑垂体的ＧＨ含量很低,而且波动不大。受水温和光周期的影响,大鳍血清ＧＨ水平表现为从冬季（１１～１月）到春季（２～４月）逐渐上升,夏季急剧升高,到夏末（７月底）达到最高,一直持续到秋季。大鳍血清ＧＨ含量的变化与生殖周期密切相关,最低的ＧＨ含量出现在性腺静止期,其次为性腺发育期,再次为性腺成熟期,在产卵期急剧升高,最高为性腺退化期。     

丝尾鳠肌肉营养成分测定与评价

对丝尾鳠(Mystus wyckioides)肌肉的营养成分进行了测定,并对其营养价值作出评价。结果显示,丝尾鳠含肉率为68.39%,肌肉中水分含量为78.92%,粗蛋白含量17.85%,粗脂肪含量0.80%,灰分含量2.43%;肌肉中水解氨基酸总量为13.00%,含量最高为缬氨酸(Val),占1.24%,最低为胱氨酸(Cys),占0.41%;必需氨基酸含量为5.80%,占氨基酸总量的44.62%。依据1985年FAO/WHO推荐的蛋白质模式为评价标准,计算得出学龄前儿童、学龄儿童和成人3种不同人群水平的氨基酸价(AAS)分别为176.26、255.69和513.82;第一和第二限制氨基酸都是亮氨酸(Leu)和赖氨酸(Lys)。研究表明,丝尾鳠是一种高蛋白质、低脂肪、有开发前景的珍稀和优质鱼类。     

Identification of sex‐specific markers and heterogametic XX/XY sex determination system by 2b‐RAD sequencing in redtail catfish (Mystus wyckioides)

Sex‐specific markers provide significant molecular basis for sex control breeding biotechnology to produce all‐male or all‐female fish in commercial breeding. Redtail catfish (Mystus wyckioides), one of the commercial bagrid catfishes distributed in Southeast Asian, which have a long sexual maturation period that can last 3–5 years and males have apparent growth advantage over females, but its sex determination system remains unknown. In this study, we first applied 2b‐RAD‐seq approach to identify three male‐specific 2b‐RAD‐tags and one male heterogametic SNP locus and validated by blast to the genome survey sequences and PCR amplification in both wild and breeding populations. To get longer sex‐specific region, we performed genome walking and obtained a 4,630 bp of Y‐specific sequence and 4,581 bp of X‐specific sequence from the 2b‐RAD‐tag ref189950 with 92.19% nucleotide identity between them. And 9,923 bp/3,935 bp of Y‐specific sequences and 8,491 bp/5,172 bp of X‐specific sequences were also identified with 77.49% and 57.07% nucleotide identity in ref208528 and ref210837, respectively. Subsequently, three different kinds of sex‐specific primers with different length products were designed based on the detected highly sex differentiated regions and could be used to distinguish males and females both in wild and artificially bred populations. What is more, the X‐specific fragment was discovered to produce the dosage effect association in females and in males. The data suggest that male heterogametic XX/XY sex determination system should exist in the redtail catfish. More significantly, the sex‐specific markers are of great value to protect wild resources and improve the efficiency of all‐male breeding practices for aquaculture in the redtail catfish.