硝磺草酮抗性菌株的筛选及抗性hppd基因的克隆表达

为获得高效抗除草剂的基因,提高转基因作物的应用能力,本研究使用含硝磺草酮的酪氨酸无机盐培养基(TMSM)平板筛选法,筛选得到一株能够耐受5 000μmol/L硝磺草酮的革兰氏阴性细菌MST-5,经过16S rRNA序列分析鉴定为嗜麦芽窄食单胞菌属(Stenotrophomonas sp.)。根据4-羟基苯丙酮酸双加氧酶(4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase,HPPD)同源基因设计引物,从MST-5中克隆到编码HPPD的基因Sthppd,序列分析发现Sthppd序列长度为1 071bp,编码356个氨基酸。同源比对发现,St HPPD与已报道的HPPD相似性仅为47%～51%。在大肠杆菌中进行原核表达Sthppd并通过Co2+亲和层析纯化获得St HPPD纯蛋白,活性检测表明此蛋白具有4-羟苯基丙酮酸双加氧酶活性,抗性分析显示其对硝磺草酮具有较高的抗性,IC50为15.5μmol/L,同时对其它HPPD抑制剂类除草剂如苯吡唑草酮和二酮腈也有较强抗性,IC50分别达到10.8和28.2μmol/L。St HPPD的最适反应温度为30℃,最适pH为7.0,大部分金属离子和某些化学添加剂严重抑制St HPPD的活性,Fe3+、Mg2+和Urea对St HPPD酶活基本没有影响。综上,St HPPD具备较高硝磺草酮抗性,在构建抗除草剂转基因作物、与HPPD抑制剂类除草剂搭配在相关转基因作物的田间应用中,具有一定价值。     

大豆品种(品系)对黄淮和长江中下游地区SMV株系群的抗性反应

用混合株系接种法测定了143份大豆品种(系)对SC～1～SC—8混合株系群的抗性反应。结果表明：在SMV新株系群分化条件下，原来表现较好抗病性的大豆品种很多都已不表现抗性．而新近育出的大豆品系却表现较好的抗性。对初步筛选出的32份抗性材料进行流行弱株系群SC—1和强株系群SC—8的专化抗性接种试验，进一步筛选出21份高抗材料，其中包括科丰1号、山东7222等。     

水稻直播栽培试验研究

水稻直播试验表明:哈98-86、龙选9707、空育131是比较好的直播水稻品种;5月11日前是获得高产的最佳播种期;空育131的播种量(芽种)控制在10kg/m~2为宜。提出了直播的灭草方法、注意事项及有待进一步解决的问题。水稻直播经济效益比插秧水稻增加收入100元/667m~2以上,说明水稻直播在北方稻区是可行的。     

凡纳滨对虾肠道铁载体高产菌株筛选与饲料添加应用效果的研究

本研究筛选了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道铁载体高产菌株,并探究了饲料中添加铁载体高产菌株对凡纳滨对虾的生理功效。结果显示,从凡纳滨对虾肠道中筛选出一株铁载体产量高达74.87%的菌株SDVGH3,经鉴定属于泛菌属(Pantoea sp.),产生的铁载体属于异羟肟酸型,该菌株无溶血性,对大部分抗生素敏感;优化了该菌株铁载体产量的培养条件：最适温度为28℃,pH为7.5,盐度为0,装液量为10 mL,Fe3+浓度为0.01 mmol/L;采用滤纸片扩散法检测了菌株抑制病原菌的特性,显示能抑制5种凡纳滨对虾致病菌。通过在饲料中添加SDVGH3菌液,凡纳滨对虾增重率和饲料利用率明显升高,血细胞数量、吞噬率和血浆酚氧化酶、抗菌活性均有不同程度的升高,副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)攻毒后,实验组的死亡率显著低于对照组,1010 CFU/g实验组的死亡率最低,为61.4%;添加107 CFU/g SDVGH3菌液处理组,凡纳滨对虾肠道菌群多样性显著提高,弧菌属(Vibrio sp.)在肠道菌群中所占比例明显下降。研究表明,铁载体高产菌株SDVGH3能明显促进凡纳滨对虾生长、免疫防御能力,增强肠道菌群健康,具有应用于水产养殖中的潜力。     

草鱼出血病细胞培养灭活疫苗的研究——疫苗株的免疫原性及其有效免疫剂量的比较

本文比较了疫苗株FR—854和FR—836—w的免疫原性,及其对三寸左右草鱼种的有效免疫剂量。疫苗株FR—854和FR—836—w均有较强的免疫原性,其保护力可达70%以上。但试验结果初步证明,FR—854疫苗比FR—836—w疫苗免疫原性更强。经统计分析,FR—854疫苗的免疫保护力可达88.9±12.0（6）%,血清中和抗体效价为160.5±58.9（6）;而FR-838-W疫苗分别只有71.3±14.2（6）%、88.3±26.2（6）;二者有显著的差异（0.05>P>0.01）。注射免疫三寸左右的草鱼种,FR—854的免疫剂量在3—5×10^4.5TCID0/尾左右,FR—836—w在3—5×107.5TCID₅₀/尾左右,其免疫保护力可达80%左右,同时我们测得ER—854的半数免疫量为10^5.1TCID₅₀/ml。     

洋葱伯克霍尔德菌C23抗真菌活性多肽的分离纯化

为了深入研究洋葱伯克霍尔德菌C23(Burkholderia cepacia C23)菌株产生的抗真菌活性物质,以立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)为指示菌进行生物活性跟踪,采用有机沉淀法、超滤法、Sephadex G25分子凝胶过滤法对活性物质进行分离纯化。结果表明,洋葱伯克霍尔德菌C23菌株产生的抗真菌活性物质为分子量5 000～10 000 Da的多肽类物质;建立了用超滤、分子凝胶过滤快速有效分离纯化伯克霍尔德菌C23菌株活性多肽的技术方法,为进一步制备单一的活性多肽成分奠定了基础。     

早熟泰山板栗优系性状分析与综合评价

以早熟品种早丰、宋家早为对照,对选育的7个泰山板栗早熟优系在幼树生长结果、栗实品质等方面进行了调查分析,采用平均隶属度方法进行早熟板栗优系的分析评价。结果表明,7个板栗优系在结果母枝的发枝习性、幼树生长、单位面积产量、栗实外观以及营养品质等方面,与对照品种早丰、宋家早有一定或较大差异。以栗实单粒质量、单位面积产量、单粒质量标准差、含糖量等为主要评价指标,按照平均隶属度排序认为光华栗、上港早熟优系综合性状明显优于宋家早、早丰,黄前早熟、赵峪早熟等优系综合性状较好,建议生产推广应用。八亩地早熟表现产量偏低,不适宜泰安市及山东省丘陵山地发展。     

光纤光栅检测在呼兰河供热工程桥施工的应用

基于光纤光栅传感器原理和施工监控系统,结合数值模拟技术,实现了呼兰河供热工程桥的施工监控,达到了预期设计目标。首先,根据光纤光栅技术原理,结合施工方案和特点,设计工程桥的监控系统;接着,根据施工监控原理,结合施工全过程受力分析,提出了双参数的控制指标;最后,根据实际监测数据,比较理论分析与实际测量结果,修正数值分析模型...     

优质大粒四倍体葡萄新品系"沪30"的选育

“沪30”是以“京亚”为母本,“紫真香”为父本杂交育成的大粒四倍体葡萄优良品系。果穗圆柱形,平均穗重400 g,粒重8 g,紫黑色;可溶性固形物含量14.0%~16.5%,有草莓香味,上海地区露地栽培8月上旬成熟。“沪30”具有座果性能好、早果性和持续结果能力强、着色均称、品质优良等特性,适宜于我国南方地区设施栽培和露地种植。