外源DNA导入大豆其后代的同工酶酶谱分析

采用聚丙稀酰胺凝效电泳的方法，对通过外源ＤＮＡ导入法所获的大豆变异后代，进行过氧化物酶和酯酶的酶谱分析。其结果是酶谱带清晰，变异后代与亲本的谱带有明显差异，并与该材料的表型性状相一致。因此，我们认为可以用同工酶分析法做为鉴定外源ＤＮＡ导入大豆的生化指标之一。     

类胡萝卜素对合浦珠母贝热休克蛋白基因HSP22表达的影响

虾青素具有多种生理活性,但在自然界中通常以不同脂肪酸结合的虾青素酯形式存在,将虾青素酯水解为游离虾青素是提高其吸收利用度和制备特定构型虾青素酯的重要研究方向。以浅紫色链霉菌 (Streptomyces violascens ATCC 27968) 来源的脂肪酶Sv-lip5为研究对象,将其在枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) 中进行异源表达,分析其酶学性质并探究其在虾青素酯水解中的应用。结果显示,Sv-lip5的最适温度为45 ℃,最适pH为10.0 (Gly-NaOH缓冲液),在35~55 ℃条件下孵育21 h后仍有高于55.7%的酶活。Sv-lip5为耐碱性酶,在碱性条件下孵育48 h后相对酶活仍可保持在70%以上。Sv-lip5可有效水解雨生红球藻 (Haematococcus pluvialis) 油中的虾青素酯,以对硝基苯酚棕榈酸酯作为底物测定该酶的比活力为12.46 U·g⁻¹,水解虾青素酯的最佳反应条件为pH 8.0,乙醇与缓冲液体积比为1∶12,最佳加酶量和时间分别为900 mg和12 h。在5.5 mL反应体系中添加900 mg的酶粉后,1 h有明显水解效果,第12小时可达最高水解率 (98.27%),200 μg虾青素酯中游离虾青素产量为147.48 μg,实现了游离虾青素的高效生物水解制备。     

中国野桑蚕抗病毒蛋白基因(Lipase)的克隆与活性鉴定

从中国野桑蚕幼虫中肠细胞克隆获得了抗家蚕核型多角体病毒BmNPV的脂肪酶基因(Lipase)cDNA(GenBank:AY945212)。该基因cDNA大小906 bp,编码301个氨基酸,蛋白质分子质量约为28.9 kD。进一步克隆了其全长基因组,结果表明该基因由2 147 bp组成,包含4个外显子和3个内含子。该基因在野桑蚕体内的表达具有组织特异性,仅限于野桑蚕中肠组织表达,且在幼虫龄中表达水平较高,而在幼虫眠期和熟蚕期几乎没有表达。通过基因体外表达获得的重组蛋白Lipase,能够有效抑制BmNPV病毒对家蚕的感染,说明该蛋白具有较强的抗BmNPV的生物学活性。     

脂肪酶对蛋鸡生产性能的影响试验

本试验旨在研究脂肪酶对蛋鸡生产性能的影响.试验采用单因子随机分组试验设计,选取9 600只370日龄的罗曼蛋鸡,随机分到2个处理组,每个处理组8个重复,每个重复600只鸡.基础饲粮采用玉米-豆粕型饲粮.试验组在对照组代谢能水平2.65 Mcal/kg基础上,减少油脂添加量而降低30 kcal/kg代谢能,同时添加200 mg/kg脂肪酶（其酶活5 000 U/g）.试验结果表明蛋鸡产蛋中后期（370日龄）,在饲粮代谢能水平降低30 kcal/kg的同时添加脂肪酶,可显著提高平均产蛋率（P＜0.05）,极显著地降低平均死亡率（P＜0.01）.     

超早期断奶应激对仔猪消化酶活性的影响初报

试验选用两窝１４ 日龄杜×（ 大×长） 三元杂交商品猪,每窝１０ 头,每窝仔猪按体重平均分为断奶处理组和哺乳对照组,每组两个重复（ 栏） ,每栏５ 头猪。分别于断奶后第０（１４ 日龄） 、２ 、４ 、６ 、９ 天从每栏内随机抽取一头猪,屠宰后取胰腺和空肠内容物样品,测定胰蛋白酶、淀粉酶及脂肪酶活性。试验结果表明,断奶应激不同程度地降低了仔猪胰腺和空肠内容物中胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。随着断奶后时间的推移和采食量的增加,断奶仔猪空肠内容物中胰蛋白酶、脂肪酶以及胰腺中淀粉酶活性得以恢复并呈上升趋势。     

Reconciling apparent variability in effects of biochar amendment on soil enzyme activities by assay optimization

We studied the effects of a biochar made from fast pyrolysis of switchgrass on four soil enzymes (β-glucosidase, β-N-acetylglucosaminidase, lipase, and leucine aminopeptidase) to determine if biochar would consistently modify soil biological activities. Thus, we conducted a series of enzyme assays on biochar-amended soils. Inconsistent results from enzyme assays of char-amended soils suggested that biochar had variable effects on soil enzyme activities, thus we conducted a second experiment to determine if biochar reacts predictably with either enzyme or substrate in in vitro reactions. Both colorimetric and fluorescent assays were used for β-glucosidase and β-N-acetylglucosaminidase. Seven days after biochar was added to microcosms of 3 different soils, fluorescence-based assays revealed some increased enzyme activities (up to 7-fold for one measure of β-glucosidase in a shrub-steppe soil) and some decreased activities (one-fifth of the unamended control for lipase measured in the same shrub-steppe soil), compared to non-amended soil. In an effort understand the varied effects, purified enzymes or substrates were briefly exposed to biochar and then assayed. In contrast to the soil assays, except for β-N-acetylglucosaminidase, the exposure of substrate to biochar reduced the apparent activity of the enzymes, suggesting that sorption reactions between substrate and biochar impeded enzyme function. Our findings indicate that fluorometric assays are more robust to, or account for, this sorption better than the colorimetric assays used herein. The activity of purified β-N-acetylglucosaminidase increased 50-75% following biochar exposure, suggesting a chemical enhancement of enzyme function. In some cases, biochar stimulates soil enzyme activities, to a much greater degree than soil assays would indicate, given that substrate reactivity can be impeded by biochar exposure. We conclude that the effects of biochar on enzyme activities in soils are highly variable; these effects are likely associated with reactions between biochar and the target substrate.     

硅藻土吸附增强的(RS)-2,4-DP对映体选择性酶促水解

利用手性气相色谱技术研究了硅藻土吸附作用对(RS) 2 ,4 二氯苯氧丙酸甲酯(2 ,4 DP)酶促水解对映体选择性的影响。实验结果表明,硅藻土吸附作用显著增强了酶促反应的对映体选择性(ER值由1.5 8增加到5 .31)。进一步研究表明,硅藻土对脂肪酶的吸附,引起酶构象变化,影响农药底物与酶结合的微环境,是酶促反应的对映体选择性增强的主要原因。吸附在硅藻土上的脂肪酶,与R 2 ,4 DP结合更为困难,反应速率下降;而S 2 ,4 DP接近酶反应中心更加容易,反应速率上升。此外,硅藻土吸附作用对农药底物的束缚引起处于“自由状态”的底物减少,也使酶促反应的对映体选择性略有增强     

古代丝织品文物霉斑清洗的生物学方法探析

[目的]为古代丝织品文物的保护提供参考。[方法]综述了古代丝织品的材质、种类、文物保护现状、霉斑清洗技术等,介绍了生物技术保护丝织品文物的优势。[结果]古代丝织品的材料为蚕丝,根据织物组织结构、经纬线组合方式、加工工艺、绸面的外观形态及质地可将其分为14大类和34小类;目前我国各市区博物馆馆藏丝织品文物出现霉斑污染的报告较少;导致丝织物产生霉斑的霉菌大多分属于曲霉属、青霉属、分支孢子菌属、新月菌属、胶霉属、链孢霉属、木霉属等;丝织品文物霉斑的清洗方法主要为化学法;生物技术保护丝织品文物具有清洗过程更加环保、安全,清洗废液无毒、易降解等优势。[结论]生物技术处理可安全、科学、有效地延长古代丝织品文物的寿命。