缺失糖基磷脂酰肌醇锚的Doppel 转基因小鼠的构建

将缺失糖基磷脂酰肌醇（glycosyl phosphatidyl inositol,GPI）的Doppel的质粒（pDoppel 1-155）,用Not Ⅰ酶切,回收并纯化目的基因片段,通过显微注射,导入BALB/c小鼠受精卵的雄原核内,结果32只仔鼠出生,其中有6只PCR检测阳性。将其中1只F0代小鼠与正常小鼠交配,共获得21只F1代小鼠,经PCR检测,有10只仔鼠为阳性。对2只F1代PCR阳性小鼠脑组织进行RT-PCR检测,其中1只为阳性。采集3只F1代PCR阳性小鼠脑组织进行Western blotting检测,在小鼠脑组织能够表达17 ku的Doppel 1-155蛋白。本研究为进一步深入研究Doppel蛋白在体内的生物学特性提供了转基因动物模型。     

培养基质中添加酯化葡甘露聚糖和DON对小鼠脾细胞生长和转化的影响

将体外培养的脾细胞分为5组,以RPMI-1640为基础培养基,第1组为空白对照组;第2组为阳性对照组,添加500 μg/L DON;第3组、第4组和第5组在添加500 μg/L DON的基础上分别添加0.05%、0.10%和0.15%的EGM。在培养72 h后,测定各组培养基质中MDA含量、SOD活性、脾细胞存活率和淋巴细胞转化率。结果表明,第1组、第4组和第5组的脾细胞存活率、SOD活性极显著高于第2组(P<0.01);第1组、第4组和第5组的淋巴细胞转化率显著高于第2组(P>0.05);第2组培养液中MDA含量显著高于第1组、第4组和第5组(P<0.05);第1组、第4组和第5组各项指标差异不显著(P>0.05)。由此表明,EGM能很好地吸附DON,减轻DON对小鼠脾细胞的毒性作用;EGM在饲料中的适宜添加剂量为0.10%。     

发情周期小鼠下丘脑中GPR30的表达

探讨G蛋白偶联受体30(GPR30)在发情周期小鼠下丘脑中的分布和表达规律。分别运用免疫组织化学SP法和RT-PCR法对发情前期、发情期、发情后期和间情期小鼠下丘脑中GPR30的分布和GPR30mR-NA表达进行研究。结果表明,GPR30免疫反应阳性物质分布于发情周期小鼠下丘脑中的大部分核团以及部分胶质细胞的胞膜,其中视上核、视交叉上核、室旁核、室周核、弓状核、乳头体外侧核分布较多;视上核和视交叉上核的GPR30相对表达量分别在间情期与发情前期以及发情前期与发情期间呈极显著差异(P<0.01),均呈上升趋势,而其他核团中GPR30相对表达量在发情各期相对稳定且无显著差异(P>0.05);下丘脑中GPR30的相对表达量以发情前期和发情期较高,整个发情周期呈先升后降趋势。发情前期和发情期下丘脑中GPR30mRNA相对表达量较高,但与其他各期间无显著差异(P>0.05)。说明下丘脑中GPR30在一定程度上参与对动物发情周期的调节。     

小陷胸汤对鼠镇静安神作用的实验研究

目的观察小陷胸汤对小鼠及大鼠血液中、脑组织中5-HT(5-羟色胺)、GABA(r-氨基丁酸)镇静安神作用的影响。方法将50只KM种小鼠随机分为空白组、地西泮组、小陷胸汤高、中、低剂量组,灌胃7 d,观察各组小鼠的睡眠时间;将32只大鼠随机分为空白组、地西泮组、小陷胸汤组、小陷胸汤加地西泮组,于造模第8天开始,各组分别以不同药物连续灌胃8 d后,测定血液和脑组织中5-HT和GABA浓度。结果对小陷胸汤小鼠中剂量组与空白组平均睡眠持续时间比较差异有统计学意义(P<0.05)。小陷胸汤组大鼠与空白组血液和脑组织中GABA及5-HT浓度比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论小陷胸汤能够对小鼠和大鼠产生镇静安神作用,其作用机制可能与提高5-HT、GABA的浓度有关。     

黄芪总苷和三七总皂苷配伍对小鼠脑缺血再灌注脑组织能量障碍的影响

目的探讨黄芪总苷（AST）和三七总皂苷（PNS）对脑缺血再灌注小鼠能量代谢障碍的影响。方法C57BL/ 6 小鼠被随机分成假手术组、模型组、AST 组（110 mg/(kg·d),ig）,PNS 组（115 mg/(kg·d),ig）,AST+PNS 配伍组（AST 110 mg/(kg·d)+PNS 115 mg/(kg·d),ig）和依达拉奉组（8 mg/(kg·d),ip）,分别给药,连用4 d。在最后1 次给药1 h 后 制作脑缺血再灌注损伤模型,检测脑组织三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）含量和Na+-K+- ATPase 酶活性。结果AST 和PNS 配伍对脑缺血再灌注后ATP、ADP 含量、总腺苷酸池（TAN）值和ATP 酶活性的降 低具有协同抑制作用,差异具有统计学意义（P<0.01）,对能荷（EC）值的减少具有相加的抑制作用（P<0.05）。结论 AST 和PNS 配伍可以明显改善脑缺血在灌注后能量代谢障碍, 其作用机制可能与AST 和PNS 能协同提高脑组织能 量的利用和生成,改善能荷、增强Na+-K+-ATPase 的活性有关。     

SAMP8小鼠衰老海马complexin含量呈环路特异性下降

利用免疫组化技术检测年龄对SAMP8小鼠海马突触前蛋白complexin1/2表达的影响。结果显示,与4.5月龄相比,13月龄组齿状回多形细胞层和外分子层及CA1区放射层的complexin1/2相对含量均显著下降,8月龄组后两者也下降。此外13月龄组CA3透明层complexin1/2低于表达较8月龄组。这些结果提示在SAMP8鼠海马complexin1/2含量随年龄增加而呈现环路特异性下降。     

迷迭香精油对金葡菌感染小鼠的干预作用

【目的】为了探明迷迭香精油在体内外试验中的抗菌作用。【方法】采用药敏试验检测迷迭香精油体外抑菌效果;通过金黄色葡萄球菌(金葡菌)滴鼻法建立小鼠肺炎模型,小鼠每天2次吸入迷迭香精油,每次30分连续7d,试验结束小鼠称重、采血,生化分析仪分析血常规指标,组织固定制备石蜡切片,显微镜观察组织病变,细菌定殖检测。【结果】迷迭香精油组大肠杆菌、金葡菌和链球菌抑菌圈分别为(12.4±2.4)、(12.6±1.2)、(11.5±0.5)mm,茶树精油有抑菌圈出现,薰衣草精油组无抑菌圈。模型组小鼠金葡菌感染后反应明显增强、采食减少、体重明显减轻,肺指数升高,肺细菌定殖率高,白介素-6 (IL-6)和炎性细胞数量明显增加;肉眼观察到小鼠肺脏肿胀充血、色泽暗红,肺叶上均有大小不等的出血斑,肺组织有硬肿块,肺门淋巴结肿大;镜检发现肺脏结构改变明显,肺泡间隙有炎性细胞聚集和浸润,组织实变明显,肺泡壁增厚,肺泡组织结构完整性破坏,肺泡腔内可见出血。与模型组比较,迷迭香组小鼠反应温和,采食和体重增加,肺脏指数降低和细菌定植率下降,后期IL-6和炎性细胞数量明显减少;小鼠肺组织充血减轻,肺泡间隙炎性细胞浸润减少,肺泡结构完整性逐步恢复,接近对照组小鼠。【结论】迷迭香精油体外具有良好的抗菌作用,体内缓解金葡菌引起的肺炎炎症症状。     

从原始生殖细胞分离昆明小鼠EG细胞及其传代培养

为提高昆明小鼠胚胎生殖细胞(embryonic germ cells, EG cells)建系效率，以怀孕8.5～12.5 d小鼠胎儿为材料，比较了胎儿后1/3部位的组织共培养、生殖嵴共培养、差速贴壁和穿刺生殖嵴4种分离胚胎原始生殖细胞(primordial germ cells，PGCs)的方法以及不同传代方式对EG细胞克隆的影响。结果表明：生殖嵴共培养和差速贴壁方式获得了较好分离EG细胞的效果，与其它两组比较差异显著；手工传代方式与连同成纤维细胞一起消化的传代方式相比获得了较高传代比率。对所分离EG细胞经形态观察、AKP染色和体外分化能力检测，证实其符合小鼠EG细胞的集落状生长、细胞未分化特性及细胞多能性等特征。     

黄芪多糖的糖含量与饮片截面积的关系及对小鼠免疫器官指数的影响

[目的]以多糖含量来评价黄芪质量,并研究黄芪多糖对小鼠免疫器官指数的影响。[方法]根据黄芪饮片大小编号为1号、2号和3号,先测量其面积,粉碎机粉碎后过20目筛,经过水提醇沉的方法提取多糖,用酶标仪测定黄芪多糖中的糖含量,选用糖含量最高的提取物制作黄芪多糖药液(10 mg/mL);将小鼠随机分成2组,即对照组和黄芪多糖组(0.01 mL/g)给小鼠灌胃7 d,称量小鼠体重,眼球采血,测量其外周血白细胞数及采集其胸腺、脾脏并称重,比较其内脏系数和外周血白细胞数的变化。[结果]1～3号黄芪多糖的提取率分别为5.75%、5.95%和7.76%,糖含量分别为208.75、209.45和212.35 mg/g,黄芪饮片的内圈大小和多糖提取量呈正相关,3号饮片质量最佳;小鼠灌胃黄芪多糖后胸腺、脾脏系数显著增高。[结论]黄芪多糖改善了小鼠的免疫功能。