Highly efficient induction of triploid Pacific abalone <Emphasis Type="Italic">Haliotis discus hannai</Emphasis> by caffeine treatment

ABSTRACT:   In order to develop a highly efficient method for mass production of triploid Pacific abalone Haliotis discus hannai , caffeine treatment that is safe and inexpensive was optimized. To suppress the first meiotic division, fertilized eggs were exposed to either a 10- or 15-mM caffeine solution for 24 min beginning at 12 min after fertilization. In most treated batches, the rates of cleaved eggs showed no significant difference from the control batches. However, in most treated batches, the rates of occurrence of normal larvae and the survival rates of the early juveniles were significantly lower than those of the controls. The triploid rates at 6 days to 11 months after settlement in all the treated batches were extremely high (91–100%). There was no significant difference in the mean triploid rates between 10- and 15-mM caffeine treatments. These results suggest that both treatment conditions were conducive to triploid abalone production. One live 2n/3n mosaic specimen was found in the treated batches. However, since the frequency of mosaic was extremely low, the mosaicism would probably not have an adverse effect on the stable production of triploid abalones.     

皱纹盘鲍消化道粘液细胞的类型与分布

采用阿新兰—过碘酸雪夫氏反应 (AB -PAS)染色方法显微观察和分析了皱纹盘鲍成贝消化道粘液细胞的类型与分布。据所显示颜色的不同 ,将粘液细胞分为Ⅰ—Ⅳ 4种类型 :分别呈红色、蓝色、紫红色和蓝紫色。口区唇上皮分布有大量粘液细胞 ,以Ⅱ型为主 ,另有少量Ⅳ型 ,主要为杯形并多为大型细胞。口球上皮及齿舌囊上皮粘液细胞分布密度高 ,以Ⅱ型为主 ,Ⅳ型次之。食道前段上皮有大量粘液细胞分布 ,中段和后段粘液细胞逐步减少 ,主要为Ⅱ型。肠各段上皮均有粘液细胞分布 ,但下行肠道比上行肠的粘液细胞相对多些 ,也以Ⅱ型为主 ,多为杯形和近圆形。直肠内、外上皮均有大量Ⅱ型粘液细胞分布 ,近圆形的较多。在嗉囊、胃盲囊和胃未见明显着色的粘液细胞     

盐度和胁迫时间对九孔鲍α-淀粉酶基因表达量的联合效应分析

采用中心复合设计和响应曲面法研究了盐度和胁迫时间对九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)?-淀粉酶基因表达量影响的联合效应,旨在为九孔鲍盐度驯化及海区推广提供指导。实验设定盐度范围为22~40,时间范围为0~72 h,建立了盐度、胁迫时间与?-淀粉酶基因表达量之间关系的定量模型,并通过分析明确了盐度和胁迫时间的最优组合。结果表明,盐度对九孔鲍?-淀粉酶基因表达量影响的一次效应不显著(P0.05),而二次效应极显著(P0.01),说明盐度与九孔鲍?-淀粉酶基因表达量之间为非线性关系。随盐度升高,淀粉酶基因表达量呈先上升后下降的变化趋势,当盐度为31时淀粉酶基因表达量最大,此时九孔鲍消化能力最强。胁迫时间对淀粉酶基因表达量影响的一次效应显著(P0.05),二次效应不显著(P0.05),表明胁迫时间与九孔鲍?-淀粉酶基因表达量之间呈线性关系,即随着胁迫时间的延长,淀粉酶基因从开始低水平表达逐渐升高并恢复至正常表达水平。盐度和胁迫时间之间不存在交互作用。对实验结果建立模型可知,?-淀粉酶基因表达回归模型达极显著水平(P0.05),且失拟项不显著(P0.05),表明实验拟合出的方程有效。回归方程的决定系数为80.05%,校正系数65.80%,预测系数50.18%,表明方程拟合度较好,模型选择较为恰当,可以为不同盐度和胁迫时间诱导下的淀粉酶基因表达量变化提供参考依据。     

九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)育苗期养殖水体细菌的群落结构

为研究九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)育苗期养殖水体细菌的群落结构,用细菌通用引物构建了细菌16S rRNA基因克隆文库.从文库中随机挑选31个克隆子进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析,得到20个不同的RFLP带型.对代表性克隆子进行测序,序列分析和系统进化分析结果表明鲍苗养殖池水体中细菌遗传多样性非常丰富.主要分为3大类群:γ-变形菌纲、α-变形菌纲和黄杆菌纲细菌,分别占58%、32%和10%.γ-变形菌纲细菌中以弧菌最多,包括已知的鲍病原弧菌,其次是海洋螺菌目细菌.α-变形菌纲细菌主要与GenBank库中未培养的克隆子序列最相似,其中红细菌科细菌最丰富,占所分析克隆子数目的26%.本研究结果表明九孔鲍育苗期养殖水体中存在大量未培养的、未知菌属的细菌.     

杂色鲍对底泥悬浮物胁迫的生理响应

研究了不同浓度的底泥悬浮物(100、200、300、400 mg/L)对杂色鲍Haliotis divericolor的急性毒性以及对其血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的影响。分别在处理后24、48、72、96 h从杂色鲍足部取血,测定其血清中NO含量和NOS、SOD、CAT活性,并记录了24、48、72、96 h时杂色鲍的存活情况。结果表明:在处理后96 h内,对照组和试验组的杂色鲍均未出现死亡,但300 mg/L和400 mg/L试验组鲍的活性明显下降;用悬浮物处理后,杂色鲍血清中NO含量及NOS活力显著高于对照组(P<0.05),且NOS活性的最大值出现的较NO最大值早;试验组SOD活性和CAT活性在24 h后显著低于对照组(P<0.05)。表明底泥悬浮物浓度对杂色鲍的生理生化存在一定影响。     

不同生态因子对岩扇贝幼贝耗氧率和排氨率的影响

为研究岩扇贝Crassadoma gigante的代谢生理状况,为其人工育苗和规模化养殖提供依据,采用不同生态条件对岩扇贝幼贝耗氧率和排氨率进行了相关研究。结果表明:温度、盐度、pH和体质量对岩扇贝幼贝耗氧率、排氨率均有极显著影响(P0.01);在试验温度为6~22℃时,岩扇贝幼贝单位体质量的耗氧率、排氨率随温度的升高而增大;经回归分析,体质量(X)与耗氧率或排氨率(Y)均呈负相关幂指数关系,岩扇贝幼贝单位体质量的耗氧率、排氨率随体质量的增大而降低;岩扇贝幼贝的耗氧率与排氨率先随盐度(24~30)的升高而增大,在盐度为30时达到最大值,而后随盐度(30~36)的升高而降低;岩扇贝幼贝的耗氧率与排氨率先随pH(7.0~8.0)的升高而增大,在盐度为8.0时达到最大值,而后随pH(8.0~9.0)的升高而降低;岩扇贝幼贝一昼夜的耗氧率及排氨率最高峰均在13:00,耗氧率和排氨率最低峰均在1:00。本研究结果可为岩扇贝的生理生态学研究提供理论依据。     

用电子鼻和SPME-GC-MS分析鲍鱼熟制前后挥发性风味物质的变化

为了揭示熟制鲍鱼主要特征气味的成因,采用电子鼻及固相微萃取结合气-质联用(SPME-GCMS),对熟制过程中皱纹盘鲍Haliotis discus hannai香气差异和挥发性成分变化进行了研究。结果表明:电子鼻能够灵敏地检测到熟制鲍鱼的香气变化,经PCA分析发现,熟制鲍与生鲍整体气味有显著差异;GCMS分析表明,熟制前后鲍鱼的挥发性成分发生明显变化,从生鲍和熟制鲍中分别鉴定出42种和61种风味物质,主要物质有醇、醛、酮、烃、酯、酸、芳香族、含氮化合物、酚类;生鲍中挥发性风味物质含量较高的为苯甲醛(68.15%)和1-辛烯-3-醇(9.22%),熟制鲍中挥发性风味物质含量较高的为2,3-丁二醇(22.80%)和(2R,3R)-(-)-2,3-丁二醇(19.84%)。研究表明,运用电子鼻和固相微萃取结合气-质联用(SPME-GC-MS)能够很好地分析鲍鱼熟制前后气味的变化。     

皱纹盘鲍自污染及其对幼鲍生长及成活率的影响

在水温12～14℃条件下,进行了不同自污染程度对皱纹盘鲍HaliotisdiscushannaiIno幼鲍生长和成活率影响的生产规模试验。结果表明,随着换水频率或水交换量的减小,总氨(TNH+4-N)、活性磷(PO4-P)、亚硝态氮(NO-2-N)和化学耗氧量(CODMn)的含量增加(单位体重鲍所对应的平均污染速率依次为0 176、0 050、0 184、0 294mg/(g·d)),pH下降。自污染对成活率影响较小,对生长影响较大。总氨和pH是自污染水中影响幼鲍生长的主要因子。天然水(pH=8 11±0 06)条件下,总氨对幼鲍相对增长率的EC5(使相对增长率下降5%的总氨浓度)为0 18mg/L(非离子氨为0 004mg/L),EC10(使相对增长率下降10%的总氨浓度)为0 307mg/L(非离子氨为0 007mg/L);总氨在0 75mg/L(非离子氨0 02mg/L)以下时对幼鲍成活率无明显影响。pH的下降对幼鲍的相对增长率有影响,pH的频繁波动对幼鲍相对增重率影响明显。加入Na2CO3适当提高pH,对幼鲍生长有促进作用。作者建议用总氨作为监控鲍养殖闭路循环体系的水质指标,推荐总氨警戒线为0 30mg/L,危险线为0 8mg/L。pH为辅助指标。     

红鲍人工育苗及其与皱纹盘鲍杂交试验的初步研究

对引进的美国红鲍进行人工育苗及与纹盘鲍杂交的试验研究,人工育苗及杂交都取得了成功,红鲍受精率为８５．０％,杂交受精率介于２．１－１．８％,后代稚鲍成活率较高,抗病能力强,生长良好。     

对硫磷对皱纹盘鲍血细胞吞噬化学发光的影响

在体外条件下,利用化学发光法定量研究了对硫磷浓度对皱纹盘鲍Haliotis discus Hannm血细胞吞噬化学发光的影响。结果表明,用对硫磷浸泡1h和12h处理的皱纹盘鲍血细胞都能够抑制鲍血细胞吞噬时的化学发光,即抑制了血细胞吞噬时释放活性氧(BOS)杀菌的活性,而且这种抑制程度随着对硫磷浓度的增加而加强。用对硫磷浸泡处理皱纹盘鲍血细胞后,测定了血细胞吞噬酵母细胞的吞噬百分率和吞噬指数,结果显示,用低浓度的对硫磷(0．5、5．0、10．0mg／L)处理的血细胞能提高其吞噬酵母细胞的活力;用高浓度的对硫磷(20、30、40mg／L)处理的血细胞能抑制其吞噬酵母细胞的活力。研究还表明,当水中对硫磷浓度为20mg／L以上时,对皱纹盘鲍血细胞免疫活性有抑制作用。