全文获取类型
收费全文 | 20902篇 |
免费 | 568篇 |
国内免费 | 1952篇 |
专业分类
林业 | 289篇 |
农学 | 1623篇 |
基础科学 | 231篇 |
1003篇 | |
综合类 | 8182篇 |
农作物 | 1120篇 |
水产渔业 | 1123篇 |
畜牧兽医 | 8648篇 |
园艺 | 549篇 |
植物保护 | 654篇 |
出版年
2024年 | 223篇 |
2023年 | 709篇 |
2022年 | 828篇 |
2021年 | 865篇 |
2020年 | 656篇 |
2019年 | 839篇 |
2018年 | 398篇 |
2017年 | 669篇 |
2016年 | 821篇 |
2015年 | 750篇 |
2014年 | 923篇 |
2013年 | 949篇 |
2012年 | 1450篇 |
2011年 | 1489篇 |
2010年 | 1339篇 |
2009年 | 1400篇 |
2008年 | 1405篇 |
2007年 | 1158篇 |
2006年 | 1001篇 |
2005年 | 812篇 |
2004年 | 640篇 |
2003年 | 513篇 |
2002年 | 424篇 |
2001年 | 389篇 |
2000年 | 329篇 |
1999年 | 298篇 |
1998年 | 210篇 |
1997年 | 190篇 |
1996年 | 165篇 |
1995年 | 146篇 |
1994年 | 172篇 |
1993年 | 248篇 |
1992年 | 254篇 |
1991年 | 244篇 |
1990年 | 203篇 |
1989年 | 219篇 |
1988年 | 25篇 |
1987年 | 23篇 |
1986年 | 11篇 |
1985年 | 5篇 |
1983年 | 8篇 |
1982年 | 2篇 |
1980年 | 6篇 |
1975年 | 1篇 |
1965年 | 1篇 |
1963年 | 1篇 |
1957年 | 1篇 |
1956年 | 1篇 |
1955年 | 5篇 |
1953年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
111.
以鸭肝炎病毒(DHV)SN株VP1基因序列为基础,运用Garnier-Robson、Chou-Fasman和Karplus-Schulz方法预测VP1蛋白的二级结构,并分别运用Kyte-Doolittle方法、Jameson-Wolf方法和Emini方法预测蛋白的亲水性、抗原指数和表面可及性,最后结合吴玉章的方法综合分析预测其B细胞抗原表位.结果显示,VP1蛋白C端第132~137、177~186、209~219区段有较好的亲水性、表面可及性和较高的抗原指数,并且在二级结构上含有易形成抗原表位的无规则卷曲和β-转角,可能是VP1蛋白的B细胞抗原优势表位;DHV SN株与弱毒疫苗株在推测的VP1 B细胞抗原表位177~186和209~219两个区域氨基酸序列变异较大. 相似文献
112.
新城疫病毒融合蛋白裂解位点基因的分离克隆及在原核细胞中的表达 总被引:4,自引:1,他引:4
用SPF鸡胚繁殖新城疫病毒(NDV)F46E9株(强毒)、LaSotaE4株(弱毒),对病毒进行纯化,抽提RNA。用1对均为27个碱基的引物进行RT-PCR,扩增出了2个毒株的融合蛋白裂解位点(Fc)基因。将Fc基因定向克隆入pUC18的EcoRI和SalⅠ位点之间,获得2个毒株Fc基因克隆pUCF46Fc和pUCLaFc,用EcoRI/SalⅠ双酶切法、PstⅠ单酶切法、PCR法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的LaSotaE4Fc基因定向导入表达载体质粒pBV221,获得重组子pBVLaFc。PCR和内切酶酶切法鉴定表明,Fc插入的位置和方向都正确无误。用E.coliDH5α通过热诱导法进行了表达。用SDS-PAGE和Western-blot法检测了表达产物。结果表明,有1条能够与NDV多抗反应的特异条带,分子量约15700,与预期大小一致,说明是Fc基因的表达产物 相似文献
113.
新城疫病毒融合蛋白裂解位点基因的分离克隆及在原核细胞中的… 总被引:4,自引:4,他引:4
用SPF鸡胚繁殖新城疫病毒(NDV)F46E9株(强毒)、LaSotaE4株(弱毒)、对病毒进行纯一提RNA。用1对均为27个碱基的引物进行RT-PCR,扩增出了2个毒株的融合蛋白裂解位点(Fc)基因。将Fc基因定向克隆人pUCLaFc,用EcoRI/Sal I双酶切法、PstI单酶切法、PCR法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的LaSotaE4Fc基因定向导入表达载体质粒pBV221,aqt 相似文献
114.
115.
味精蛋白对鸡代谢能和养分代谢率影响的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
试验选用24只2kg左右的蛋公鸡,随机分为4个处理,每个处理6只鸡,前3个处理分别给每只鸡强饲占体重3%的待测原料,第4个处理作为内源对照组,测定内源排泄量,以评定味精蛋白对鸡代谢能和养分代谢率的影响。结果表明:味精蛋白的总能比豆粕高3.87%,而比玉米蛋白粉低15.56%;粗蛋白含量达到71.45%,分别比豆粕和玉米蛋白粉高64.03%和22.32%。味精蛋白的表观代谢能、真代谢能、粗蛋白表观消化率和真消化率、总氨基酸表观消化率和真消化率均极显著低于豆粕和玉米蛋白粉(P<0.01)。而干物质表观消化率和真消化率三者间无显著差异(P>0.05)。在已测定的17种氨基酸中,除甘氨酸外,味精蛋白粉其他氨基酸表观消化率和真消化率均极显著低于豆粕和玉米蛋白粉(P<0.01)。这表明味精蛋白的养分利用率低于豆粕和玉米蛋白粉。 相似文献
116.
由植物革兰氏阴性病原菌编码产生的harpin蛋白是激发植物过敏反应的主要因子,具有显著的诱导植物抗性和促进生长发育等多种生物学效应,同时也是研究植物抗病信号传导的理想模型。基于对harpin蛋白的深入研究,国外已开发出新型、高效、安全的生物农药。本文综述了近年来harpin蛋白的研究进展。 相似文献
117.
亲环蛋白(CyP)能与免疫抑制剂环孢霉素A(CsA)结合而作为CsA的胞内受体。在已构建的家蚕蛹cDNA文库中获得了家蚕亲环蛋白A(BmCyPA)基因的cDNA序列。利用生物信息学方法对此序列的开放阅读框(ORF)和序列同源性等进行分析,并以家蚕蛹总RNA反转录的cDNA为材料克隆了BmCyPA,通过原核表达目的蛋白后,将纯化的BmCyPA融合蛋白免疫新西兰兔得到抗血清,Western blotting检测目的蛋白在蚕体中得到表达。利用荧光定量PCR方法检测家蚕5龄幼虫各组织中BmCyPA mRNA的转录水平,由高到低依次为脂肪体、丝腺、中肠、马氏管、表皮、头部、气门、卵巢;Western blotting检测BmCyPA在5龄幼虫各组织中的表达水平,由高到低依次为脂肪体、气门、表皮、马氏管、中肠、丝腺、头部和卵巢。亚细胞定位显示Bm-CyPA在细胞质与细胞核中均有分布。推测BmCyPA与家蚕的生长发育以及促进蛋白质折叠和介导免疫应答等有密切联系。 相似文献
118.
瘦素(leptin)蛋白由肥胖基因编码,对人体能量代谢等多种生理过程起着重要的调节作用。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人瘦素蛋白基因(lep)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,并转化E.coli DH10Bac,获得重组杆粒Bacmid-lep,然后转染家蚕BmN细胞,获得重组杆状病毒。用SDS-PAGE和Western blotting方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞检测到大小约22 kD的蛋白条带,与预期的人瘦素蛋白分子质量相符。给家蚕5龄起蚕注射重组病毒液后的4~5 d出现发病症状,RT-PCR检测发病家蚕的血液中有lep基因转录,并通过SDS-PAGE和Western blotting检测到大小为22 kD的人瘦素蛋白的表达。研究结果表明,利用Bac-to-Bac表达系统能够获得含有人瘦素蛋白基因的重组杆状病毒,并且目的蛋白能在家蚕细胞及幼虫体内表达。 相似文献
119.
本研究采用点突变PCR方法成功克隆并表达了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoiae,M.O)内蒙古分离株(SZWQ株)的黏附因子基因(SZWQ-860)。表达产物经SDS-PAGE电泳检测,与预期目的蛋白的大小一致,将重组蛋白纯化后经Western blot检测,结果表明重组蛋白具有良好的免疫反应性。 相似文献
120.
陕西马种血液蛋白遗传标记特征及聚类分析 总被引:4,自引:0,他引:4
利用血液蛋白多态性标记陕西各马种遗传结构,证实了它们相互间的遗传差异,Tf位点,宁强矮马和中型马具有其它马种没有的E基因;Es位点,山地型关中马有其它马种所没有的D基因,同时该位点6-8条带型者多达15.2%,舍饲型关中马Pr位点缺A基因,Pa位点缺D基因。 相似文献