阿克曼菌对鲤糖代谢的调控作用研究

[目的]本试验旨在探究巴氏灭活的阿克曼菌（Pasteurized Akkermansia muciniphila，P-Akk）调控鲤（Cyprinus carpio L.）糖代谢的分子机制。[方法]本研究通过不同糖水平（20%、30%、40%、50%葡萄糖）试验，探究鲤（10.5±1 g）4周和8周时胰高血糖素样肽-1（glucagon-like peptide-1，GLP-1）分泌及阿克曼菌（Akkermansia muciniphila，Akk）定植的时空变化；在不同糖水平试验基础上，设置40%葡萄糖和三个不同浓度P-Akk（108 cfu/g P-Akk、109 cfu/g P-Akk、1010 cfu/g P-Akk）组，探究添加P-Akk 4周后对鲤（16.38±0.39 g）糖代谢及GLP-1的调控；通过P-Akk孵育鲤原代肝、肠细胞试验，共同探究不同糖水平下鲤肠道Akk、GLP-1对糖代谢的调控机制。[结果]结果显示：（1）随着饲料中葡萄糖含量的升高，鲤血清中GLP-1b含量显著降低（P < 0.05），4周时高糖组鲤肠道GLP-1a、GLP-1b以及肠道内容物中Akk丰度均显著降低（P < 0.05），但8周时无显著性差异（P > 0.05）。（2）P-Akk处理后，鲤血清中葡萄糖、GLP-1含量显著减少（P < 0.05）；中肠绒毛高度、肌层厚度显著增加，GLP-1含量减少，短链脂肪酸含量增加，muc2 mRNA表达水平升高（P < 0.05）；此外，P-Akk上调肝脏中ampk、pi3k、akt及糖酵解基因gk、pfk mRNA表达量，下调糖异生基因pepck mRNA表达量（P < 0.05）。（3）原代肝、肠细胞孵育结果显示，P-Akk处理肠细胞后GLP-1含量显著减少（P < 0.05），而gpr40的mRNA表达量升高；此外肝细胞中糖酵解基因gk、pfk mRNA表达量显著升高。[结论]综上，外源添加P-Akk可以缓解高糖饲料引起的血糖升高，维持葡萄糖稳态。[意义]该研究结果可为Akk作为益生菌在水产饲料中的应用提供理论基础。     

斑马鱼CDKAL1基因的生物信息学分析

[目的]深入了解斑马鱼CDKAL1基因的结构特点。[方法]运用生物信息学方法对斑马鱼CDKAL1基因的基因序列、编码蛋白的理化性质、结构及功能进行分析。[结果]分析结果显示,此基因一部分存在于细胞质,并存在一个跨膜结构域,没有信号肽。该基因编码蛋白质的变异不大;含有3个功能结构域,均为Erk D-domain,分别位于L189L、384、V315;在Y292位置有一磷酸化位点;有UPF0004超家族、Radical SAM超家族和MiaB结构域3个保守结构域;在脑、肌肉、肾脏中表达。推测该基因表达的蛋白质可能是酶、异构酶或者中间代谢产物,与胰岛素受体的作用有关。[结论]该研究为今后进一步研究人类Ⅱ型糖尿病提供了科学依据。     

公钥密码算法及特点

随着计算机网络的发展，信息安全要求的日益提高，公钥密码算法体现出了秘密密码算法不可替代的优越性。本文详细介绍了公钥密码体制常用的算法及其所支持的服务，并就公钥密码新的研究方向进行了展望。     

淡水鱼肝脏中维生素A1,A2含量的研究

本试验建立了用高效液相色谱法同时测定淡水鱼肝脏中的ＶＡ１和ＶＡ２的方法。以μ－Ｐｏｒａｓｉｌ３．９ｎｍ×１５０ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏ．）为色谱柱，正己烷：乙醚（８７：１３）为流动相，紫外３５０ｎｍ，荧光Ｅｘ３２５ｎｍ，Ｅｍ４８０ｎｍ双道检测，ＶＡ１和ＶＡ２的保留时间分别为２６．２５ｍｉｎ和２８．００ｍｉｎ。采用不同波长条件下的紫外吸收特性，对ＶＡ２予以定性，以ＶＡ１为内标物对ＶＡ２予以定量。实验     

高职园林技术专业“1＋1＋1”工学结合人才培养模式研究

为了提高人才对社会需求的适应能力,以职业为导向,以能力为本位,以任务为载体,就苏州农业职业技术学院3年制高职园林技术重点专业建设为例,积极探索和研究工学结合人才培养模式在专业建设上的创新思路及主要实施途径。     

Prokaryotic Expression of Brucella BAB Gene and Establishment of iELISA

In this study,the genome of Brucella Rev.1 strain was used as a template to amplify the BAB gene sequence,clone it into the prokaryotic expression vector pET-30a(+),obtain the recombinant plasmid pET-30a-BAB,and perform prokaryotic expression on the recombinant plasmid.The indirect ELISA method was constructed by using the expression products detected by Western blotting.The results showed that the BAB gene was successfully cloned and expressed in this experiment,and the purified expression product was analyzed by SDS-PAGE.This study obtained a relatively pure recombinant BAB protein;Western blotting test showed that the expressed protein could react specifically with Brucella sheep positive serum and had good reactogenicity;Using the recombinant BAB protein as the coating antigen,an indirect ELISA method for detecting BAB antibodies was established and optimized.The best determined coating conditions were as follows BAB protein coating amount was 0.25 μg/mL,serum dilution was 1:400;blocking solution was 3% pig-derived gelatin;secondary antibody dilution was 1:6 000;color development time was 10 min.The established method was used to detect 40 clinical sheep serums,and the cut-off value was calculated to be 0.607.That was,when the serum tested had P/N ≥ 1.5 and D_{450 nm} ≥ 0.607,it was judged as positive,when D_{450 nm} ≤ 0.561,it was judged as negative,and when 0.607<D_{450 nm}<0.561,it was judged as a suspect value,and retest was required.Compared with the Huhong plate test and the test tube agglutination test,the positive coincidence rate was 100%,the negative coincidence rate was 71.88%,and the total coincidence rate was 77.5%.     

复方中药提取物在新城疫B_1株免疫中的免疫增强作用

用自制的中药提取物与新城疫Ｂ１株混合后免疫５５日龄鸡，以血凝抑制试验测定新城疫抗体效价。结果表明，５５日龄鸡的中药提取物最佳用量为１．０ｍＬ，试验组鸡ＮＤ抗体效价明显高于对照组。免疫后６０ｄ用Ｆ４８Ｅ８新城疫强毒进行攻击，试验组的保护率达到１００％，而对照组相对较低。     

辣椒新品种齐杂尖椒1号的选育

齐杂尖椒1号是以98-4-48为母本,以98-5-33为父本配制的辣椒一代杂种。生长势强,株高70cm,开展度55cm;果实长牛角形,纵径25~28cm,横径4.4cm,肉厚0.26cm;果面光滑,辣味中等,肉质脆,VC含量1.15g.kg-1,可溶性固形物4.97%;坐果率高,整齐度好,每667m2产量4000kg左右。适宜黑龙江地区种植。     

野生大豆GsADF1基因的克隆与表达分析

ADF蛋白是一种在真核生物中广泛存在的低分子量的肌动蛋白结合蛋白,在细胞分裂、细胞运动、植物顶端生长如花粉管伸长,根毛的形成等重要的生命活动中发挥着重要的作用.以野生大豆(Glycine soja)的叶片cDNA为模板,通过RT-PCR方法扩增分离获得GsADF1基因.该基因全长为693 bp,包含417 bp的开放阅读框;其编码的ADF蛋白含139个氨基酸残基.运用生物信息学方法将GsADF1与其他物种ADF蛋白氨基酸序列进行多重比对并构建系统进化树,发现GsADF1与其它生物的ADF蛋白具有很高的同源性.这说明植物ADF基因高度保守.为进一步研究GsADF1在野生大豆不同组织,器官以及不同发育期大豆种子中的表达情况,对它进行了荧光定量分析(Real time RT-PCR).结果表明:GsADF1在野生材料的根、茎、叶、花和种子中都有表达,且以根和花中表达量最高.而对其在不同发育阶段的种子中的分析表明该基因在15DAF、20DAF、30DAF、40DAF和45DAF的种子中都有表达,且以15DAF表达量最低,随后呈上升趋势.其表达量的变化表明GsADFI通过调节肌动蛋白可能参与了种子从胚胎发生到贮藏物质积累的转变.