具不同脂肪氧合酶同工酶的大豆种子提取液漂白β-胡萝卜素的能力差异

大豆种子中含有3种脂肪氧合酶同工酶(Lox1、Lox2和Lox3).以含有不同脂肪氧合酶同工酶大豆品系种子为材料,揭示不同提取和反应条件下,不同品系Lox提取液漂白β-胡萝卜素的特性差异.结果表明:Lox1,Lox2,Lox3,Lox1,2和Lox1,2,3的最适提取液是Tris-HCl缓冲液(pH 6.8),而Lox1,3和Lox2,3的最适提取液是磷酸缓冲液(pH6.0).完全漂白β-胡萝卜素所需反应时间长短顺序是Lox1,2,3,Lox3>Lox2,3,Lox1,3>Lox1,Lox2>Lox1,2;在最适反应温度条件下,Lox提取液的漂白能力大小顺序是Lox1,3>Lox1,2,3,Lox2,3>Lox3>Lox1,2,Lox1>Lox2,而在最适pH条件下,Lox提取液的漂白能力大小顺序是Lox1,3,Lox2,3>Lox1,2,3>Lox1,2>Lox2>Lox3>Lox1.随着Lox提取液的放置时间延长,其漂白能力下降.含有Lox3的品系提取液(也就是Lox1,3,Lox2,3和Lox1,2,3的提取液)比不含Lox3或仅含单一同工酶品系的提取液具有更好的漂白能力,说明Lox3是获得高效漂白能力必不可少的同工酶.     

17β-Estradiol Regulates Cultured Immature Boar Sertoli Cell Proliferation via the cAMP-ERK1/2 Pathway and the Estrogen Receptor β

Estrogen plays an important role in regulating Sertoli cell number in the testis. The objective of the study was to identify whether 17β-estradiol affected the proliferation of cultured, immature boar Sertoli cells via the estrogen receptor β （ERβ） and the cAMP-extracellular signal-regulated kinase （ERK1/2） pathway. Low levels （10-10-10-8 mol L-1） of 17β-estradiol increased cell number, but high levels （10-7-10-6 mol L-1） decreased it （P〈0.05）. Sertoli cell number began to recover for an additional 24 h in the medium without 17β-estradiol （10-6 mol L-l） （P〉0.05）. The effects of 17β-estradiol （10-9 mol L-1） peaked at the first 24 h （P〈0.05）. 17β-estradiol activated ERK1/2 from 5 min to 24 h, but the activiy of ERK1/2 began to decrease after 4 h. Both PD98059 and U0126, two ERK inhibitors, blocked cell division （P〈0.05）. 17β-estradiol （10-10-10-6 mol L-1） dose-dependently increased cAMP production （P 〈 0.05）, and both 17β-estradiol （10-9 mol L-1） and forskolin, which increases cAMP levels, induced cell proliferation and activated ERK1/2 （P〈 0.05）. Rp-cAMP, an antagonist of cAMP, blocked this 17β-estradiol activity （P〈 0.05）. Two estrogen receptor antagonists, ICI 182780 and ERβ antagonist （ERβAnt）, reduced Sertoli cell number, cAMP production and ERK1/2 activation （P〈 0.05）, but ERaAnt did not （P〉 0.05）. Therefore, 17β- estradiol mainly promotes pig Sertoli cell proliferation via ERβ to induce cAMP production and ERK activation to promote cell proliferation.     

β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶在农作物病虫害防治中的研究进展

从β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶2种酶的结构特性、抗病性、基因转化及在农作物防治病虫害中的应用等方面进行了综述。     

β-防御素研究进展

β-防御素在黏膜上皮细胞广泛表达,在先天免疫系统中扮演重要角色。因具有独特的抗菌机制和广谱抗细菌、抗真菌、抗病毒活性。极难产生抗药性而日益受到人们的关注。就β-防御素的分子特征、生物学活性、抗菌机理、基因重组表达,目前科研中存在的问题及其应用前景做了综述,为临床医学提供参考。     

FSHβ基因与公鹅精液品质性状的关联分析

采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测了143只籽鹅公鹅FSHβ亚基基因内含子2上SNP(C126T)的多态性,并分析了该SNP位点与精液品质性状(精液体积、精子密度、精子畸形率和精子活率)的相关性。结果显示FSHβ亚基基因内含子2的C126T突变产生三种基因型:CC型、CT型和TT型,其基因型频率分别为0.08、0.44和0.48;TT型精液体积显著高于CC型和CT型(P0.05);CC型和TT型个体的精子密度显著高于CT型(P0.05),CC型和TT型之间差异不显著(P0.05);TT型和CT型的精子活率差异不显著(P0.05),但显著高于CC型(P0.05)。在FSHβ亚基基因第2内含子SNP(C126T)位点,TT型是精液品质性状的优势基因型。FSHβ基因在公鹅精子生成的过程中可能有重要的调控作用。     

多黏芽孢杆菌HD-1产β-甘露聚糖酶的条件优化

采用DNS比色法,通过单因素试验和正交试验对多黏芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)HD-1产β-甘露聚糖酶的培养基主要成分和培养条件进行优化。结果表明,该菌种产β-甘露聚糖酶的最适培养基为魔芋粉0.75%、酵母膏1.00%、磷酸二氢钾0.04%、硫酸镁0.05%,培养基初始p H 9.0;最适培养条件为接种量6%,培养温度31℃,培养时间27 h。在此优化条件下,多黏芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶活性可达72.6U/m L。     

β-胡萝卜素高产菌株的选育

采用紫外线和硫酸二乙酯对三孢布拉氏霉(Blakeslea trispora)负菌进行了2次诱变处理,通过平板初筛和三角瓶摇瓶复筛,得到了一株突变菌株U-D-2,其β-胡萝卜素产量(1 236 mg/L)较原始菌株(635mg/L)提高了94.6％.遗传稳定性试验结果表明,该突变菌株具有较好的遗传稳定性.     

β-胡萝卜素发酵及提取工艺的研究

[目的]研究三孢布拉氏霉菌β-胡萝卜素发酵及其提取工艺的优化。[方法]利用三孢布拉氏霉菌发酵β-胡萝卜素,并通过分析发酵时间、干燥方法、保藏方式等因素对β-胡萝卜素含量的影响,确定β-胡萝卜素的制取工艺。[结果]试验得出,最适发酵时间为5 d,干燥方法为真空冷冻干燥机干燥法,保藏方法为下罐后较短时间内提取。按此工艺条件得到的β-胡萝卜素胞内含量为5.80%,发酵液中β-胡萝卜素含量可达到0.44 g/L。[结果]研究可为发酵法生产β-胡萝卜素及其提取工艺研究提供参考依据。     

花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子功能区的缺失分析

花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子(Arachis hypogaea promoter of β-1,3-glucanase,Ah-Glu-Pro)属于诱导型的启动子.为分析该启动子序列中对外源信号分子响应的重要顺式调控元件,利用交错式热不对称PCR(thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction,TAIL-PCR)方法扩增得到长度为970 bp的Ah-Glu-Pro序列.PLACE和PlantCARE在线预测结果表明,该启动子序列中含有对病原菌及水杨酸(salicylic acid,SA)响应的顺式调控元件,如GRWAAW、GTl-motif、W-box、RAV lAAT、INRNTPSADB、AMMORESIVDCRNIA1和BIHD 1OS.根据预测结果,在5’端设计5个正向引物Glu-F、Glu-P4、Glu-P3、Glu-P2和Glu-P1,3’端设计一个反向引物Glu-R,5个引物对扩增得到该启动子序列Ah-Glu-P以及5'端4个缺失片段Ah-Glu-P4～Ah-Glu-P1,长度分别为931、767、650、376和217 bp.将这5个片段分别克隆到pCAMBIA 1301-xylA载体中,构建以木糖异构酶基因(xylose isomerase gene,xylA)作为安全筛选标记、以β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase gene,GUS)作为报告基因的相应5个植物表达载体pCAMBIA1301-xylA-Glu-P～pCAMBIA 1301-xylA-Glu-P1.将这5个表达载体分别转化洋葱(Allium cepa)表皮细胞,进行GUS蛋白组织化学染色及GUS酶活性检测,结果表明,经SA诱导后,转入Ah-Glu-P～Ah-Glu-P3 3个载体的洋葱表皮细胞中的GUS酶活性分别提高1.45、2.16和1.27倍,转入Ah-Glu-P2～Ah-Glu-P1载体的洋葱表皮细胞在SA诱导前后GUS酶活性无明显差别.结合软件预测结果推测,在启动子Ah-Glu-P、Ah-Glu-P4和Ah-Glu-P3内部存在的RAV1 AAT、MYBCOREATCYCB1和INRNTPSADB为对SA响应的正调控元件;在Ah-Glu-P～Ah-Glu-P4之间存在的GT1-motif和AMMORESIVDCRNIA1为对SA响应的负调控元件.对这些重要顺式调控元件功能的进一步确认将为通过调控实现花生内源β-1,3-葡聚糖酶基因的高效表达、提高花生(Arachis hypogaea)的抗病性、以及在花生遗传转化过程中特异诱导表达启动子的有效利用提供理论依据.     

β-胡萝卜素生产工艺研究进展

主要介绍了β-胡萝卜素的几种生产制备方法,包括化学合成法、微生物发酵法、藻类培养法、基因工程法、植物提取法等,以期为β-胡萝卜素的生产与研究提供依据。