家蚕蛹虫草子实体及大米培养基多糖的提取和纯化

[目的]为家蚕蛹虫草大米培养基的应用和提高养蚕业的综合经济效益提供基础数据。[方法]分别对家蚕蛹虫草子实体及其大米培养基残基进行脱脂、热水浸提、脱蛋白、醇沉、干燥后得到粗多糖,用同种方法提取、纯化,并比较提取、纯化结果。[结果]家蚕蛹虫草子实体提取粗多糖得率为25.75%,培养基为12.85%。家蚕蛹虫草子实体和培养基粗多糖经DEAE-纤维素柱纯化,得到相似单一峰;家蚕蛹虫草子实体多糖的洗脱峰部分多糖含量占上样多糖总量的82%;培养基多糖的洗脱峰部分多糖含量占上样多糖总量的74%。两者所含多糖类似,大米培养基粗多糖得率较低,可不提取,有直接作为添加剂等生产应用价值。[结论]家蚕蛹虫草大米培养基可以作为一种新型添加剂加入饲料或调味品酿制原料中。     

蛹虫草与其他天然抗氧化剂协同抗氧化作用研究

[目的]研究在蛹虫草提取液中分别按不同比例添加灵芝、香菇、猴头、紫苏和银杏提取液后组成的复合液抗氧化活性的情况变化。[方法]用微波法制备提取液,将灵芝、香菇、猴头、紫苏以及银杏提取液中的1种、2种或3种按不同的体积比与蛹虫草提取液组合,测定复合液总还原能力和清除羟自由基能力,并与单一提取液的测定结果相比较。[结果]蛹虫草提取液A与紫苏提取液E、银杏提取液F组合而成的复合液抗氧化性较好,其余组合抗氧化活性相对于单一提取液均有不同程度提高。[结论]食药用菌提取液与药用植物提取液组合而成的复合液具有较高的抗氧化活性,且大多数复合液的抗氧化活性好于单一提取液。     

蛹虫草对幼虫期家蚕感染的探究

[目的]探索对家蚕具有较好感染效果的优势蛹虫草菌株和有效的感染方法。[方法]通过蛹虫草的家蚕感染试验,研究不同感染方法对蛹虫草菌株感染能力和子实体产量的影响。[结果]悬液注射法和表面消毒浸染法的感染率较高。不同蛹虫草菌株对家蚕的感染能力存在极显著差异。菌株04718的感染效果最好,菌株7172次之,菌株04最差。利用表面消毒浸染法对家蚕进行感染,蛹虫草菌子实体得率最高。用不同蛹虫草菌株感染家蚕后,产子实体能力存在极显著差异。菌株04718感染后产子实体能力最强,菌株7172次之,菌株04较差。[结论]表面消毒浸染法和悬液注射法为利用蛹虫草菌株感染桑蚕幼虫的较好方法。     

人工培育蝉花的活性成分含量测定

[目的]明确人工蝉花的活性成分含量。[方法]用微波法提取人工蝉花和野生蝉花的活性成分,用高效液相色谱法测定虫草素和腺苷含量,用高碘酸钠法测定虫草酸含量,用苯酚-硫酸法测定虫草多糖含量。[结果]人工蝉花的虫草酸含量和野生蝉花相当,虫草多糖含量则高达110.09mg/g;腺苷含量较野生蝉花低,虫草素未能检出,但4种活性成分总量是野生蝉花的1.55倍。[结论]从活性成分含量看,人工蝉花可代替野生蝉花,但还需进行进一步试验。     

改良的苯酚-硫酸法测定蛹虫草多糖含量

[目的]改良苯酚-硫酸法测定蛹虫草多糖含量.[方法]采用水提醇沉法制备多糖沉淀并溶解成供试品溶液.精密量取供试品溶液和葡萄糖对照溶液各1.0ml,分别置10 ml具塞试管中,加1.0 ml水,缓慢加入7.0ml浓硫酸,摇匀,恒温放置1h,加入1.0 ml4％苯酚溶液,摇匀,40℃水浴35 min后冰水浴5 min,取出放置20 min,在487 nm处测定吸光度,计算多糖含量.[结果]该方法在10.26 ～102.55 μg葡萄糖的回归方程为Y=0.013 9X +0.007(r =0.999 9);平均回收率为97.7％(RSD=2.3％),精密度试验和重复性试验的RSD分别为1.4％和2.7％.不同来源蛹虫草多糖含量在1.21％ ～4.70％.[结论]该方法显色稳定、准确可靠、重复性好、灵敏度高,可测定蛹虫草多糖含量并为蛹虫草质量研究提供依据.     

虫草菌粉对雏鸡免疫功能的影响

为探讨虫草菌粉对雏鸡免疫功能的影响,以240羽健康余干乌鸡作为研究对象,鸡新城疫苗常规免疫,在饲粮中添加不同剂量虫草菌粉,同时设空白对照组。各组在饲喂虫草菌粉第10、20、30天时随机选择20羽,先采血检测免疫细胞活性、新城疫(NDV)抗体滴度;再处死称取法氏囊与脾脏的质量。通过研究法氏囊与脾脏质量变化、E-玫瑰花环率、淋巴细胞转化率、新城疫抗体滴度等指标来了解虫草菌粉对雏鸡免疫功能的影响。结果表明:虫草菌粉能够加快雏鸡免疫器官的发育,提高T淋巴细胞活性;在饲喂虫草菌粉20 d时中剂量组比对照组抗体水平提高1∶22.1,高剂量组比对照组提高1∶22.53,使特异性抗体提前达到高水平。说明虫草菌粉能够增强雏鸡免疫功能。     

秦巴蛹虫草原生质体的制备及再生条件研究

【目的】研究秦巴蛹虫草原生质体制备及再生的最适条件,建立高效制备和再生原生质体的方法。【方法】以秦巴蛹虫草无性型菌株CM-16为材料,研究细胞壁裂解酶种类、酶解时间、酶解温度、菌丝体菌龄及稳渗剂种类对原生质体制备及再生效果的影响,并在单因素试验结果基础上进行正交优化试验。【结果】(1)以0.6mol/L NaCl为稳渗剂,用混合酶(质量分数1%纤维素酶和质量分数0.5%蜗牛酶按1∶1体积比混合)在(26±1)℃对菌龄6d的菌丝酶解3h,原生质体的产量最高。(2)以0.6mol/L甘露醇为稳渗剂,用混合酶(质量分数1%纤维素酶和质量分数0.5%蜗牛酶按1∶1体积比混合)在(26±1)℃对菌龄5d的菌丝酶解2h,原生质体的再生率最高;验证试验结果表明,在此条件下,原生质体再生率平均为25.7%,此时原生质体平均产量为83.42×105 mL-1。【结论】对酶解温度、酶解时间、菌丝体菌龄、稳渗剂及酶系种类等条件的优化,可提高秦巴蛹虫草原生质体的产量及再生率。     

蓝光诱导蛹虫草虫草素含量和分生孢子数的变化

[目的]研究蓝光对蛹虫草菌丝体中虫草素含量和分生孢子量的影响。[方法]以蛹虫草为材料,在不同的蓝光照射时间取样,以检测菌丝体中虫草素的含量,并计数蛹虫草分生孢子的产生量。[结果]蛹虫草受蓝光照射后,其虫草素的产生受到了一定的抑制,同时虫草素含量的变化也有一定的波动性;在相同的时间点,受蓝光照射的蛹虫草分生孢子数量比黑暗时的分生孢子数量要多,同时在一定时间范围内分生孢子数均呈上升趋势。[结论]该研究为系统性的研究蓝光对蛹虫草的影响奠定了基础。     

一株高雄山虫草的分子鉴定

[目的]利用生物信息学方法初步探讨虫草属日本拟青霉的分类地位。[方法]提取日本拟青霉的基因组,并利用通用引物ITSL和ITS4采用PCR技术扩增rDNA18S-28S ITS序列。采用Clustalx1.83和MEGA5软件构建系统发育树,生物信息学比较分析确定其分类地位。[结果]PCR扩增产物为603 bp。将日本拟青霉重新命名为雪花高雄山虫草(Cordyceps takaomontana strain JLsnow)。将虫草重新分类,并对该类群及其特征进行了描述。[结论]从分子水平上说明日本拟青霉与其他虫草之间的差异,该研究为虫草属真菌的分类提供新思路。     

玉树州冬虫夏草资源与分布

调查表明，玉树州冬虫夏草年产量高达180t，主要分布在玉树、杂多、治多、曲麻菜、囊谦和称多等地；海拔分布范围为4100—5000m；生态地理分布受产地植被类型、温湿度和土壤等因素的影响。