鸡Toll样受体15单克隆抗体的制备及其初步应用

旨在制备鸡Toll样受体15 (ChTLR15)的特异性单克隆抗体(mAb),并初步应用.利用PCR技术扩增ChTLR15第162-386位氨基酸,克隆于载体pET-30a中进行诱导表达,获得高纯度的重组ChTLR15 (162-386 aa)蛋白.然后采用皮下多点注射方式将ChTLR15免疫6周龄的雌性BALB/c小...     

罗甘口服液对香烟烟雾凝聚物(CSC)抑制V79细胞间隙连接通讯(GJIC)的保护作用

用划痕标记染料示踪技术(SLDT)观察了几种植物水提取的混合液--罗甘口服液对香烟烟雾凝聚物(CSC)抑制V79细胞间隙连接通讯功能(GJIC)的影响.研究结果证实40μg/ml以上剂量CSC可阻断GJIC功能.0.5～12.5mg/ml剂量罗甘口服液对GJIC无抑制作用.预加罗甘口服液对CSC阻断GJIC功能起保护作用,表明罗甘口服液可抑制CSC的促癌作用.     

家蚕中肠酸性磷酸酶细胞化学的研究

应用超微结构酶细胞化学技术研究了家蚕幼虫中肠ＡＣＰａｓｅ 活性的亚细胞分布,结果表明ＡＣＰａｓｅ 主要分布在圆筒形细胞的细胞核内,核周围的内质网及溶酶体中,杯形细胞的细胞核、细胞底部的内褶膜上也有少量的酶活性存在。不同数量性状的蚕品种间圆筒形细胞细胞核内的ＡＣＰａｓｅ 活性分布有显著差异。     

柔嫩艾美球虫（Eimeria tenella）体外细胞培养

试验比较了玻璃珠层析法,ＤＥＡＥ纤维素层析法,Ｇ３漏斗过滤法３种提纯柔嫩艾美球虫（Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌｌａ）子孢子的方法,柱高８ｃｍ,直径２００μｍ的玻璃株柱用ｐＨ８．０的Ｒｉｎｇｅｒ’ｓ缓冲液作洗脱提纯子孢子,回收率为６４．１％,子孢子洗脱高峰期集中,且易于无菌操作,柱高５ｃｍ的ＤＥＡＥ纤维素柱用ｐＨ８．０的甘氨酸缓冲液作洗脱液,提纯子孢子回收率为６３．２％,但严格无菌操作困难,Ｇ３漏斗法易     

Bcl-2家族分子在细胞凋亡中的作用研究进展

细胞凋亡在多细胞生物中广泛存在,对于细胞正常生命活动是不可缺少的生理过程。Bcl-2家族分子是参与调控细胞凋亡信号途径的一类分子,通过促凋亡和抑凋亡分子相互作用来控制细胞的凋亡和存活,是细胞凋亡研究中最深入广泛的一类分子。在哺乳动物,Bcl-2家族分子的研究有利于研发临床治疗肿瘤的药物,或监测肿瘤发生发展的程度。而在节肢动物,相关研究有利于害虫的生物防控。论文就Bcl-2家族分子功能及其在不同物种的作用机制进行综述。     

伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达

本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中.     

应用流式细胞术检测脂肪肝综合征肉鸡肝细胞生长周期与凋亡

用高能低蛋白饲料饲喂1日龄三黄肉鸡7周,建立脂肪肝综合征(FLS)病理模型,以流式细胞术的方法检测肝细胞生长周期及细胞凋亡,以探讨FLS的发病机理。与对照鸡比较,5~7周龄试验鸡肝细胞S期、G2+M期和增殖指数(PI)降低,G0/G1期升高;肝细胞凋亡率4~7周龄显著升高(P<0.01)。结果表明,高能饲料在体内氧化,产生大量自由基,损伤肝细胞DNA,使肝细胞分裂增殖减缓并发生凋亡,同时低蛋白饲料缺少转运脂质的必要条件,脂肪堆积于肝细胞内,肝细胞的功能受损而发生FLS。