干细胞在犬嗅觉细胞研究中的应用

干细胞研究是一门新兴的学科。从植物的生根、发芽、生长、凋亡、复苏,人们看到了干细胞巨大的增殖分化潜能和长久不衰的生命力,体会到了干细胞的神奇和美     

鹅细小病毒诱导番鸭胚成纤细胞自噬

细胞自噬在病毒生命周期中发挥着重要作用,目前国内仍然没有鹅细小病毒(GPV)与细胞自噬关系的系统研究。本研究旨在探讨番鸭小鹅瘟病毒(MDGPV)PT株与短喙矮小综合征鹅细小病毒(SBDS-GPV) M15株细胞适应毒感染番鸭胚成纤维细胞(MDEFs)后对细胞自噬的影响,以及细胞自噬对病毒增殖的作用。通过激光共聚焦方法观察自噬标记物LC3-Ⅱ特异绿色荧光聚集颗粒,借助蛋白免疫印迹检测LC3蛋白与p62蛋白的表达量,以及LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白转化分析,确定GPV感染能够促进细胞自噬发生。利用膜通透性半胱氨酸蛋白酶抑制剂阿洛司他丁、自噬诱导剂雷帕霉素以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤,调控自噬来研究细胞自噬对病毒增殖的影响,结果显示细胞自噬有利于GPV在MDEFs中的复制。结果表明GPV感染能够诱导细胞自噬,同时细胞自噬有利于病毒在宿主细胞中的复制。     

脱细胞羊膜基质负载BMSCs和EPCs修复犬尿道缺损

旨在研究使用犬BMSCs和EPCs接种的脱细胞人羊膜基质修复犬长段管状尿道缺损的可行性,评估其修复效果。选取15只健康成年雄性杂种犬,随机分为5组,每组3只。建立会阴部3cm管状尿道缺损模型后,分别用负载骨髓间充质干细胞(BMSCs)、血管内皮祖细胞(EPCs)、BMSCs和EPCs混合的脱细胞羊膜基质修复缺损部位;用未种植细胞的脱细胞羊膜修复和缺损后不修复的犬只作为对照。通过术后排尿观察,尿道造影,剖检观察和组织学观察来评估修复效果。结果显示:BMSCs+EPCs混合组的犬只在术后排尿正常,新生尿道管腔光滑平整,无尿道狭窄,组织学观察显示新生上皮完整;BMSCs组的犬只尿道有小范围狭窄,剖检发现新生段有瘢痕;EPCs组的犬只排尿时间延长,新生尿道段狭窄,剖检显示新生段粗糙,瘢痕较多;组织学观察显示新生段上皮化不完整;羊膜修复组和自体修复组的犬只排尿异常,新生尿道段狭窄,剖检显示新生段瘢痕化严重,有多处皱缩,组织学观察显示上皮化不完整,仅为单层上皮,自体修复组的犬只尿道新生段几乎无上皮细胞覆盖。结果表明:证明用负载BMSCs和EPCs 2种细胞的脱细胞人羊膜基质可成功修复犬长段管状尿道缺损。     

红三叶和白三叶愈伤组织的诱导和胚性细胞悬浮系的建立

以红三叶野生品种巴东红三叶的叶片为外植体,在MB－1至MB－9的固体培养基上诱导愈伤组织,筛选出最佳培养基是MB－9培养基;以白三叶栽培品种“路易斯安娜”和“Huca”的叶片为外植体,接种在MB－9固体培养基上诱导愈伤组织,愈伤组织形成后均经MB－9固体培养基上继代3－4次,获得胚性愈伤组织后再转至MB＋3mg/L2,4-D 0.7mg/L BA 0.2mg/L NAA 2mg/L甘氨酸 500mg/L CH 3％蔗糖的液体培养基中,经强化培养两个月后获得胚性细胞悬浮系,实验结果表明,缩短换液时间（每隔3－4d换液一次）可加快胚性细胞悬浮系的建立。     

云南松松塔提取物对H22实体瘤小鼠模型的抑瘤作用

研究云南松松塔乙醇提取物(PEA)和碱水提取醇沉物(PED)对H22实体瘤小鼠的抑瘤作用。建立H22实体瘤小鼠模型,随机分组,灌胃给药,1次/d,给药10d。末次给药24h后,取血检测γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)含量;剥离肿瘤组织并称重,计算抑瘤率;检测肿瘤组织匀浆中环氧化酶-2(COX-2)和前列腺素E2(PGE2)含量;石蜡包埋HE染色观察肿瘤细胞病理组织学变化。结果显示,PEA和PED各剂量组小鼠平均肿瘤重量较模型组显著减小;最大抑瘤率分别达46.11%和58.05%。PEA和PED各剂量组小鼠外周血中IFN-γ和IL-2含量较模型组显著升高;IL-4和IL-10含量较模型组显著降低。PEA和PED各剂量组小鼠肿瘤组织中COX-2和PGE2含量较模型组显著减少;给药组正常肿瘤组织减少,有出血和坏死,脂肪组织增多。结果表明,PEA和PED可抑制H22实体瘤小鼠的肿瘤生长,其机制与调节Th1/Th2细胞平衡和抑制COX-2与PGE2的表达有关。     

猪弓形虫流行状况与控制技术

猪弓形虫病是由龚地弓形虫寄生于猪的多种有核细胞而引起的一种寄生虫病。该病是一个世界性分布的原虫病．在家畜、野生动物及人群中广泛传播。猪场暴发该病时，死亡率高达60％以上。对养猪业的发展和人类健康造成很大的危害。该文就当前该病的流行特点、临床特征及防控技术作一介绍，以引起广大养猪户(场)的关注。     

植物血凝素的作用及在兽医临床上的应用

植物血凝素是从红芸豆中提取的有丝分裂原,作为低聚糖与蛋白质的复合物,植物血凝素有促进淋巴细胞有丝分裂、激活免疫细胞。机体免疫系统通过植物血凝素而识别病毒,并产生相应的抗体和其他免疫反应,清除体内病毒。植物血凝素与黄芪多糖等多种中草药联用产生增效作用与部分抗生素联用具有相加作用,所以在兽药中的应用日益广泛。本文对植物血凝索的抗病毒机理、增强免疫作用机理及应用前景做简要叙述,希望能对相关药物的研究开发起到一定的促进作用。     

犬生物节律的研究

生物节律广泛存在于自然界生物的生命活动中,如候鸟在春秋季节的迁徙、南北极动物按季节换毛等现象,这都是上亿年生物在其发生和进化过程中,为了与环境影响变化相适应而逐渐形成的内源性的与自然环境周期性变化相近似的节律性的生命活动。它既存在于整个机体中,亦存在于器官乃至游离的单个细胞之中,它能够随着时间的变化,调节生物本身的生理活动,     

乙酸钠对油酸诱导的BRL-3A细胞脂肪变性的影响及机制分析

通过向油酸诱导的大鼠肝成纤维细胞(BRL-3A)脂肪变性模型中添加不同浓度(2、4、8 mmol·L^-1)的乙酸钠,探讨其对脂肪变性细胞模型脂代谢的调控机理及细胞损伤的修复作用。试验方法：1)用不同浓度的油酸(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48) mmol·L^-1刺激BRL-3A细胞24 h后,分别检测细胞相对活力、总脂滴面积、三酰甘油(TG)含量、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,建立脂肪变性细胞模型;2)向BRL-3A细胞中添加不同浓度的乙酸钠,通过流式细胞术检测细胞凋亡率;3)用不同浓度的乙酸钠和0.12 mmol·L^-1油酸共同孵育BRL-3A细胞,试验分为4组,分别为油酸处理组、2 mmol·L^-1乙酸钠+油酸处理组、4 mmol·L^-1乙酸钠+油酸处理组和8 mmol·L^-1乙酸钠+油酸处理组,分别对细胞脂滴、TG含量、AST、ALT活性、AMPK信号通路蛋白以及脂代谢关键基因进行检测。结果显示:1)用0.12 mmol·L^-1油酸处理BRL-3A细胞24 h,成功建立BRL-3A细胞脂肪变性模型。2)不同浓度的乙酸钠对BRL-3A细胞凋亡率没有影响;3)4、8 mmol·L^-1乙酸钠处理脂肪变性细胞模型后,与油酸处理组相比,细胞总脂滴面积、每平方毫米脂滴数、TG含量、AST和ALT活性均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)下降,P-AMPK表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上升;脂合成代谢相关基因ACC、FAS以及SCD-1 mRNA表达水平均有一定程度下降;脂分解代谢相关基因CPT-1、CPT-2以及ACO mRNA表达水平均有一定程度上升。本研究表明,乙酸钠会通过AMPK通路激活脂分解代谢,减轻肝细胞脂质蓄积,并且对油酸诱导的BRL-3A细胞脂肪变性模型的损伤具有一定缓解作用。