基于RNA-seq 的黄尾鲴肝脏转录组测序与分析

为了发掘黄尾鲴（Xenocypris davidi）功能基因特别是免疫相关基因，为其种质资源评价、群体遗传学多样性分析、基因连锁图谱构建、免疫相关功能基因地位以及分子标记辅助育种提供基础信息，采用Illumina HiSeq 2500 高通量技术平台对黄尾鲴肝脏进行转录组测序。通过去除低质量的raw reads，共获得了50 702 046条clean reads，组装得到53 527 条Unigenes。采用BLAST 相似性比对方法，把这些序列比对NR、String、Swissprot、KEGG和Pfam数据库，共有26 613条Unigenes得到了注释。有15 532条Unigenes获得了GO注释并分类到64个功能类别中，有7 737条Unigenes被归纳到COG的26个功能分类，共有14 642条获得了KEGG注释，共参与33条代谢通路中。根据免疫系统分类，共有1 299条Unigenes参与了16条代谢通路。从 53 527 个 Unigenes 中共找到 98 826个单核苷酸多态性位点（SNP）（转换 64 396 个，颠换 34 430个）和18 119 个 SSR 位点。研究结果为黄尾鲴免疫学、基因组学、基因克隆以及分子标记辅助育种提供了重要依据。     

蛇鮈肌肉营养成分分析

[目的]分析蛇鮈肌肉营养成分,对其营养价值进行综合评价。[方法]采用现有的国家标准测定蛋白质、脂肪、氨基酸和脂肪酸等含量。[结果]肌肉中蛋白质和脂肪的含量分别为(15.34±0.25)%和(2.39±0.82)%(质量分数,鲜样)。肌肉中检测出18种氨基酸和8种必需氨基酸,肌肉(鲜样)氨基酸总量(TAA)、必需氨基酸(EAA)和鲜味氨基酸总量(DAA)分别为13.02%、4.89%和5.10%,第一限制性氨基酸和第二限制性氨基酸分别为色氨酸、缬氨酸,必需氨基酸指数(EAAI)为49.92。肌肉中检测出19种脂肪酸,脂肪酸中PUFA、MUFA与PUFA的含量分别为48.64%、26.57%和24.79%,二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)总含量5.04%。[结论]蛇鮈肌肉口味鲜美,食用价值较高。     

翘嘴鲌连续两代减数分裂雌核发育群体的遗传特征分析

通过异源精子冷休克技术获得翘嘴鲌减数分裂雌核发育一代(meio-G1)、减数分裂雌核发育二代(meio-G2),以太湖野生翘嘴鲌(Culter alburnus Basilewsky)为对照群体,采用微卫星(SSR)标记和随机扩增多态性DNA(RAPD)标记分析了3个群体的遗传特征。SSR结果显示,12个微卫星位点在meio-G1、meio-G2和对照组3个群体中,分别扩增到38、16和47个等位基因,平均等位基因数为3.166 7、1.333 3和3.916 7,平均观测杂合度(Ho)分别为0.430 6、0.333 3和0.675 0,平均纯合度分别为0.569 4、0.666 7和0.325 0。3个群体内个体间的平均遗传相似系数分别为0.543 0、1.000 0和0.571 9;聚类分析结果表明,meio-G1和对照组聚为一支,meio-G2单独聚为另一支。RAPD结果显示,14个引物在3个群体中检测到的位点数分别为74、61和64,3个群体的多态位点比例分别为63.51%、0和51.56%,按照Nei’s指数统计的3个群体的遗传相似度分别为0.801 8、1和0.846 0,meio-G2的基因组DNA同质性远高于meio-G1和对照组。两种分子标记结果均表明,meio-G2的纯合度、个体间的遗传相似系数均高于meio-G1和对照组,且个体间的基因型完全一致,是良好的育种材料。     

Biochemical composition of the wild and cultured seahorses, Hippocampus kuda Bleeker and Hippocampus trimaculatus Leach

The biochemical composition of wild and cultured seahorses Hippocampus kuda Bleeker and Hippocampus trimaculatus Leach was analysed in this study. The crude protein contents (% dry weight) of wild seahorses were high: 72.7±2.5% in H. kuda and 78.5±4.2% in H. trimaculatus . The crude lipid contents (% dry weight) of wild and cultured seahorses (1.1±0.1 vs. 1.4±0.2 for H. kuda and 1.2±0.1 vs. 1.2±0.2 for H. trimaculatus ) were low and did not differ significantly ( F _3, 12=1.461, P =0.12). The essential amino acids and flavour-enhancing amino acids in wild seahorses were higher than those in cultured seahorses, although the essential amino acid index in wild and cultured H. kuda and H. trimaculatus were generally low. The total amino acid content decreased with growth in cultured H. trimaculatus ( F _3, 12=14.927, P <0.05). The poly-unsaturated fatty acid (PUFA) contents in wild and cultured H. kuda and H. trimaculatus were 21.69%, 37.72%, 21.39% and 33.89% respectively. The fatty acid content in seahorses first decreased and then increased with growth both in wild and in cultured H. trimaculatus . The PUFA/saturated fatty acid ratio was 1.31 in cultured H. kuda and 0.87 in cultured H. trimaculatus . The trace metal concentrations in the wild seahorses were relatively low. The results presented in this study provide biochemical information necessary for understanding the medicinal value of H. kuda and H. trimaculatus and for elucidating the potential dietary requirements for their culture.     

环境因子对胭脂鱼精子活力影响的研究

通过观察精子的快速运动时间和寿命,研究了6种环境因子对胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus Bleeker)精子活力的影响。结果表明:胭脂鱼精子对酸碱的耐受能力较强,在pH值为4~10时,精子均可以快速运动,且在pH值为8时精子的活力最强。不同浓度的NaCl、KCl、葡萄糖、CaCl2、MaCl2溶液对胭脂鱼精子运动的诱导效果不同。5种溶液最适于胭脂鱼精子运动的浓度分别为:NaCl 102 mmol/L;KCl 75 mmol/L;葡萄糖100 mmol/L;CaCl275.6 mmol/L;MgCl275.6 mmol/L。且在5种溶液低浓度时精子活力较强,超过一定浓度精子的运动开始被抑制。     

灭活菌苗免疫的中华倒刺鲃外周血免疫指标的变化

以温和气单胞菌灭活菌苗为免疫原,平均体重(100±25)g的健康中华倒刺鲃为实验对象,免疫组腹腔注射0.2mL浓度为1.0×108CFU/mL的免疫原,对照组注射等量灭菌生理盐水,分别在单次注射0、1、2、4、7、14、21、28、35d后随机从两组各取6尾实验鱼,尾静脉采血,测定外周血的血细胞数量、白细胞分类计数、吞噬活性、抗体效价和蛋白质含量等免疫指标的变化,第35天活菌攻毒。结果表明:温和气单胞菌灭活菌苗(F-AS)可诱导中华倒刺鲃红细胞和白细胞数量增加,并引起各种白细胞分类百分比变化,提高吞噬活性和抗体效价,血清中总蛋白及球蛋白含量增加,红细胞也具有免疫功能,灭活茵苗的相对免疫保护力达65.21%。免疫早期(第1周)主要是红细胞、单核细胞和中性粒细胞数量明显增加,吞噬细胞的吞噬活性迅速提高,吞噬百分比和吞噬指数第4天达峰值;随后则是淋巴细胞大量增殖,第21天淋巴细胞、抗体效价及球蛋白达峰值。可见灭活菌苗通过促进中华倒刺鲃血细胞增殖、提高吞噬细胞的吞噬活性、产生特异性抗体等方式提高免疫保护力;免疫早期非特异性细胞免疫起重要作用,之后特异性免疫起主要作用。     

尖塘鳢的形态生物学与细胞核型

观察并解剖30尾活体尖塘鳢（Oxyeleotris marmoratus）,详细记录其形态特征和内部结构。尖塘鳢腹鳍胸位,胸鳍宽大呈扇形;背鳍2个,分离;闭鳔,I形胃,肠粗短,无幽门盲目囊;肝单叶;体被栉鳞,体表外观有纵向线条,无侧线。以肾脏为材料,用空气干燥法制备染色体标本。尖塘鳢的染色体数目为2n=46。核型公式为2Sm 2St 42t,MF=50。     

铜鱼ISSR-PCR反应体系的正交设计优化

采用正交设计方法,对影响铜鱼(Coreius heterodon(Bleeker))ISSR-PCR扩增结果的5个因素,如Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶和模板DNA的浓度,在4个水平上进行了比较优化,建立了适合铜鱼的最佳ISSR-PCR反应体系:在25μL反应体系中含有1.5 mmol/L Mg2+,0.16 mmol/L dNTP,0.2μmol/L引物,1UTaqDNA聚合酶和140 ng模板DNA.检验结果表明,采用该反应体系对铜鱼进行ISSR-PCR扩增可获得多态性高,稳定性和重复性好的电泳条带.     

太湖花产卵类型的确定及繁殖前后鱼体成分的变化

对25对池塘回养花（Hemibarbus maculatus Bleeker）（雄鱼平均体长25cm,平均体重247.9g;雌鱼平均体长25.8cm,平均体重278.8g）繁殖前后体成份的变化进行了测定,并确定了其产卵类型。结果显示,繁殖后亲鱼的粗脂肪含量比繁殖前低了32.14%;粗蛋白含量则升高13.19%;灰分变化不大,水分略呈下降趋势。卵径分布频率结果显示,花属于一次分批产卵类型。     

大海马幼苗人工养殖条件的研究

研究了在人工养殖条件下,大海马幼苗在不同的温度、盐度、光照强度和放养密度下的生长状况及其成活率。实验在室内进行,分别对每一个环境因子设置不同的梯度,每15 d测量记录1次大海马幼苗的体长和成活率,共记录4次,并做了3次重复,最后进行统计分析。结果表明,大海马幼苗生长的最适温度为28℃,水体温度在24~32℃时,其生长速率没有明显的差异;大海马幼苗较喜欢高盐度且盐度较稳定的海水环境(20以上),至60d时,盐度为30的幼苗生长速率最快,成活率也最高;阴暗的环境较适宜幼苗生长,但光照强度过低会降低其成活率;最佳的放养密度为250ind/m3。