丙型肝炎病毒NS4B蛋白调控Hep3B细胞非折叠蛋白质反应研究

研究表达的丙型肝炎病毒(HCV)NS4B对Hep3B细胞非折叠蛋白质反应的影响。NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染Hep3B细胞,G418筛选和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内XBP1 mRNA剪接,Western blot鉴定ATF6蛋白切割,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78和XBP1启动子活性。G418筛选和Western Blot鉴定证实获得稳定表达NS4B的Hep3B细胞;在该细胞内,XBP1 mRNA剪接、ATF6切割、XBP1和Grp78启动子激活均被检测到。NS4B在Hep3B的稳定表达诱导了非折叠蛋白质反应。     

冰岛硫化叶菌xpb基因缺失突变体的构建及遗传学分析

为在体内研究古菌核苷酸切除修复(nucleotide excision repair,NER)机制,利用基因敲除的方法,对泉古菌核苷酸切除修复机制进行研究,构建了冰岛硫化叶菌编码真核生物NER解旋酶XPB同源蛋白的基因xpb1和xpb2单缺失突变体,从而在体内分析xpb1和xpb2基因的功能。结果表明:基因xpb1或xpb2不是冰岛硫化叶菌存活的必需基因。表型分析发现,xpb1和xpb2基因单缺失突变体相较野生型菌株REY15A,对DNA损伤试剂4-NQO 4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline 1-oxide,4-NQO)分别表现出轻微敏感性和不敏感性,暗示NER解旋酶功能在冰岛硫化叶菌体内存在多重冗余。     

山羊C D 4基因的克隆及组织表达分析

CD4基因是质膜上的转运系统之一,为动物辅助性T细胞(TH)和部分胸腺细胞的共受体与信号传导分子,参与TCR介导的TH细胞活化和胸腺细胞分化过程.该研究首次克隆了山羊CD4基因(GenBank登录号:EU913093),并分析了该基因的组织表达情况.结果表明:所克隆的山羊CD4全长cDNA序列为1 555bp,开放阅读框(ORF)为1 368bp,编码455个氨基酸的蛋白,相对分子质量为5.05×104,等电点为9.52.山羊CD4蛋白前体由信号肽、胞外区、跨膜区和胞浆区4个部分构成.胞外区含有4个Ig样结构域,2个二硫键(C41—C109和C143—C180)及3个N糖基化位点(N231,N263和N343).氨基酸序列比对表明山羊CD4与绵羊CD4的氨基酸相似性为98%,与猪、人、兔、狗、猫、蝙蝠以及小鼠的氨基酸相似性分别为81%,74%,73%,72%,70%,70%和66%.系统发育树表明山羊CD4与绵羊和猪的CD4蛋白聚成一支,表明它们有较近的亲缘关系,其中山羊与绵羊的亲缘关系最近,而与狗、蝙蝠、兔、人和小鼠的亲缘关系相对较远.实时荧光定量PCR分析发现,CD4在山羊淋巴中的表达量最高,在睾丸中表达量较低,表明山羊CD4是一种免疫分子.     

鹅ACSL4基因克隆及其与肝脂质沉积的关系研究

本研究旨在克隆鹅长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)基因,探讨其与鹅肝脂质沉积的关系和品种间的表达差异。本实验通过RT-PCR、实时定量等技术扩增鹅ACSL4基因CDS、检测了该基因在皮脂、腹脂、肝脏等10个组织中的表达情况及填饲对其在肝脏中表达的影响,并探讨其表达量与血浆胰岛素、鹅肝脏甘油三酯(TG)、肝重等指标间的相关性。结果表明:鹅ACSL4基因CDS全长2 013 bp,编码670个氨基酸。保守结构预测发现,其蛋白质与哺乳动物一样,也存在2个保守功能区(ATP/AMP motif和FACS motif),它与鸡、人、猪、小鼠、大鼠的同源性分别为96.9%、80.4%、80.1%、78.5%、78.4%;组织表达结果显示,该基因主要于大脑、腹脂、心肌、睾丸等组织中表达,而在肝脏中表达相对较低;填饲引起ACSL4 mRNA在鹅肝脏的表达丰度极显著增加(P<0.01);且与肝脏脂质沉积相关指标呈显著正相关(P<0.05),暗示其在鹅肝脂肪变性中可能扮演着重要的角色。     

工控网络安全测评系统的设计与实现

为解决工控系统网络安全测评项目繁杂、对测评人员专业化要求高、测评效率低等问题,对工控系统网络安全体系标准及技术要求进行研究分析.基于IEC 62443-4-2标准开发和设计工控网络安全测评系统,系统具备测评计划管理、测评工具管理、测评报告输出等功能.经运行测试,系统功能完备、简洁易用、可扩展性好,极大地提高了测评效率,...     

苹果品种新苹4号和新帅在黑龙江林口引种试验

1994年牡丹江市果树协会从新疆奎屯农7师农业科学研究所引入苹果品种新苹4号和新帅,在黑龙江省牡丹江地区栽植。经高接及低接试验成功后,1998年在林口县建堂乡小百顺村大面积栽植。经多年观察,2个品种生长结果正常,在黑龙江省形成规模化的大苹果栽培;新苹4号和新帅的抗寒力在正常年份与当地主栽品种龙丰、金红苹果比较没区别,特殊年份1年生枝条有冻害,花芽受冻,抗寒力比当地龙丰、金红小苹果弱。     

“金丝新4号”枣在阿克苏地区的引种试验

以"金丝新4号"枣为试验材料,2009年在新疆阿克苏温宿县进行"金丝新4号"枣的引种试验。结果表明:经过3a观察试验,该品种嫁接当年即可结果,第3年单株产量达4.859kg,表现了很强的早果丰产性,果实外形美观,风味甘甜,品质上等;鲜枣采收期为30d左右,鲜食制干品质均极佳,果实在当地表现出较强的抗病、抗裂果和抗风能力,在新疆阿克苏地区有较好的发展前景。     

戊型肝炎病毒感染SD大鼠动物模型的建立

为了研究戊型肝炎病毒(HEV)4型感染远交群(SD)大鼠的全过程,试验将HEV阳性猪粪便上清液接种33只SD大鼠,动态观察动物感染前后丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALKP)、总胆红素(TBIL)水平的变化及血清、粪便中HEV RNA的产生,病理组织学变化及HEV在各脏器中的分布情况。结果表明:接种后TBIL水平均正常,感染后血清ALT、AST、ALKP水平均同步上升;肝脏组织出现肝细胞变性、肿胀等变化;脾脏组织出现多核巨噬细胞增多,淋巴细胞稀少等变化;淋巴结无病理变化。感染第5天在肝脏、脾脏、淋巴结细胞核内均检测到HEV病毒抗原。粪便和血清中均能检测到HEV RNA,第28天没有检测到病毒,说明SD大鼠是HEV 4型的易感动物。     

T4噬菌体蛋白的分子改造及其应用前景

T4噬菌体是一种病毒,其基因、结构和生物学特性已清晰,利用各种分子操作技术可以对其进行进一步改造。利用位点特异性诱变,研究T4噬菌体某些基本蛋白的功能;普遍用来进行噬菌体改造的噬菌体展示技术已经成功在T4衣壳平台上展示目的抗原;位点特异性诱变及噬菌体展示技术都可以用于改造噬菌体使其与哺乳动物细胞发生相互作用,也能获得除细菌宿主之外的可被噬菌体感染的细胞;还可在不断发展的噬菌体治疗研究中得到应用。这些噬菌体的改造方法都将会促进疫苗技术、噬菌体疗法和其他生物及医学科学分支的发展。论文对T4噬菌体的蛋白结构、噬菌体展示技术及相关的噬菌体治疗等内容进行了综述。     

猪细小病毒4型在试验猪的感染进程及在组织中的分布研究

研究猪感染猪细小病毒4型（porcineparvovirustype4,PPV4）后的症状、血清中病毒DNA拷贝数的变化以及病毒在猪体内的分布,并研究病毒对猪器官组织的嗜性。对试验猪接种PPV4阳性血清,观察PPV4感染猪后的临床症状以及脏器病理变化,利用已建立的PPV4Taqman荧光定量PCR检测方法,定量检测人工感染试验猪血清和各脏器中PPV4DNA拷贝数。PPV4感染猪呈现病毒血症,在8d后血清中病毒含量最高,之后逐渐降低。试验猪感染PPV4后前期主要是呼吸道症状,之后好转,无其他症状。试验猪主要的病理变化在于肺脏淤血以及全身淋巴结肿大。PPV4可以侵害试验猪多个器官,前期在肺脏以及扁桃体中PPV4DNA含量较高,后期在肠道以及泌尿道含量较高。血清富集PPV4病毒电镜观察可见疑似PPV4病毒粒子。试验证明,PPV4具有快速感染性,PPV4对猪并无致死性,主要影响生产性能,对肺脏以及肠道器官组织的嗜性最强。