妊娠期山羊卵巢中雄激素受体的免疫组化定位

用免疫组织化学技术对不同妊娠时期山羊卵巢组织中雄激素受体的表达及其变化规律进行研究,以探讨雄激素受体在卵巢生殖功能中的调节作用。结果显示,妊娠期黄体细胞的形态结构随所处妊娠的不同阶段而变化,退化黄体细胞数量随周期进程逐渐增多。在妊娠各时期卵巢的被膜、次级卵泡颗粒层细胞和黄体细胞均存在雄激素受体的阳性表达,从阳性反应产物定位来看,阳性反应主要位于细胞膜和细胞质内;随妊娠进程雄激素受体的表达强度逐渐减弱。     

少精不育患者体细胞与精细胞的雄性激素受体基因突变的比较与分析

目的：了解雄性激素受体基因（ Ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｇｅｎｅ）突变对少精不育病症发生所起的作用及突变的来源。方法：利用 Ｐ Ｃ Ｒ 对４５ 例精液标本和配对的血液标本 Ａ Ｒ基因８ 个外显子分别进行扩增。扩增产物经琼脂糖电泳和聚丙烯胺的 Ｃ Ｄ Ｇ Ｅ电泳分析，检测基因片段的插入和缺失及点突变。结果：４５ 例少精不育患者的精液标本中，外显子 Ａ 即基因转录激活区发生点突变者３ 例，插入突变４ 例，缺失突变３ 例共１０ 例，占２２．２％ ；外显子 Ｈ 发生缺失突变１ 例、外显子 Ｇ 处发生点突变１ 例、外显子 Ｅ发生完全缺失突变１ 例、不完全缺失突变１ 例；同时他们的血液标本中，只有３ 例在外显子 Ａ发生插入突变。结论：雄性激素受体基因外显子 Ａ 即基因转录激活区的突变是造成少精不育的重要原因。突变一般发生在减数分裂期，少数是亲代遗传。     

性激素受体在子午岭黑山羊隐睾及正常睾丸中的分布比较

旨在研究性激素受体[雄激素受体（androgen receptor,AR）、雌激素受体（estrogen receptor,ER）]在子午岭黑山羊正常睾丸与隐睾组织中的分布与隐睾症的关系,应用免疫组织化学及免疫荧光技术方法结合形态计量学统计软件,比较了正常睾丸与隐睾的组织化学特点。特殊染色结果显示：与正常组相比,隐睾组间质组织疏松,管腔面积明显减小,糖原含量明显减少,胶原纤维及网状纤维含量增多。免疫组化及免疫荧光结果显示：1） AR在正常睾丸组Leydig细胞呈高密度强阳性表达,在各级生精细胞呈中等强度阳性表达,隐睾组中Leydig细胞及各级生精细胞表达明显减弱,且在精原细胞偶见表达;2） ER在正常睾丸Leydig细胞呈高密度强阳性表达,管周肌样细胞呈中等强度阳性表达,Sertoli细胞偶见表达,各级生精细胞无表达;3） ER在隐睾Leydig细胞、初级精母细胞、精原细胞和Sertoli细胞中均呈中等强度阳性表达;4）统计结果显示,隐睾组AR的平均光密度较正常组显著降低（P<0.05）,而ER的平均光密度则显著高于正常组（P<0.01）,且隐睾组AR与ER表达量比值基本接近1：1。子午岭黑山羊隐睾组织胶原纤维和网状纤维分布较正常睾丸多,生精小管基膜主要成分以中性糖蛋白为主,酸性糖蛋白含量明显降低影响精子的正常形成;隐睾组织精原细胞及Sertoli细胞ER与AR表达失常尤为明显,可为哺乳动物隐睾的相关研究提供一定参考。     

雄激素对大鼠垂体中AR蛋白表达的影响

利用免疫组化SP法检测去势及补充雄激素后大鼠垂体中雄激素受体(Androgen Receptor,AR)蛋 白的表达,以探讨雄激素对垂体的作用机制。结果表明:去睾丸组(GM组)大鼠垂体AR减少;去睾丸并 补充雄激素组(GM T组)大鼠AR表达恢复到接近正常水平。说明去睾丸大鼠由于缺乏内源性雄激素 引起垂体AR表达减少;而补充外源性雄激素可缓解或抑制这一变化。     

环磷酞胺复制中老年男性雄激素部分 缺乏综合征大鼠模型的研究

〔摘要〕目的应用环磷酞胺复制中老年男性雄激素部分缺乏综合征的大鼠模型建立〔方法取20只大鼠随机 分为2组:正常组,模型组〔分别于造模前、造模后1d、造模后30 d观察大鼠一般情况、体质量、悬尾实验和强迫游 泳实验时间以及辜丸指数,放射免疫法测定各组造模前后血清1"1'' , FT水平,免疫组化法测定各组大鼠辜丸间质细 胞stAR蛋白平均灰度值,并进行统计分析〔结果与正常组比较,模型组大鼠悬尾实验时间延长,差异具有统计学意 义(P<0.01),强迫游泳实验时间缩短,差异具有统计学意义(P<0.01) ,血清1"1'' , FT水平、stAR蛋白平均灰度值均显著 升高,差异具有统计学意义(P<0.05、结论环磷酞胺造成的大鼠血清1"1'' , FT水平卜降,行为学改变的反辜丸组织退 行性变.基木类似PADAM模型、     

外源雄激素促进绵羊附睾GPx5基因的表达

为研究外源雄激素丙酸睾酮对绵羊附睾特异表达基因谷胱甘肽过氧化酶5(GPx5)的影响,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清和附睾头部内睾酮(T)、二氢睾酮(DHT)的含量,及附睾头部雄激素受体(AR)蛋白表达量;应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测了附睾头部GPx5-mRNA和AR-mRNA相对表达量;并结合免疫印迹(WB)法检测了附睾头部GPx5蛋白相对表达量。结果表明:丙酸睾酮处理(TPT)组与对照组相比绵羊血清DHT含量,附睾头部T含量、DHT含量均显著提高,分别是对照组的0.5、6.0、0.8倍;GPx5-mRNA和ARmRNA相对表达量显著提高,分别是对照组的0.75和0.77倍(P0.05);AR及GPx5蛋白表达量显著提高,分别是对照组的0.63和0.58(P0.05)。因此,外源雄激素丙酸睾酮可大量提高绵羊附睾头部GPx5基因的表达,对绵羊附睾头部GPx5基因的表达具有促进作用。     

稀有鮈鲫雄激素受体基因的克隆和内分泌干扰物对其表达的影响

采用RT-PCR和RACE法分离了稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)精巢雄激素受体基因(AR)的cDNA,其核苷酸序列3 130 bp,编码844个氨基酸。它的氨基酸序列与鲤科鱼类AR的同源性较高。AR基因在稀有鮈鲫的性腺、肝、脑、肠和肌肉等组织中均有表达,在雄性个体中精巢和肝脏的表达量最高,其他组织较低,而在雌性个体除肌肉中表达量较低外,其他组织均为中等水平的表达。0.01和0.1 nmol/L的乙炔基雌二醇暴露3 d后,能够分别非显著和显著地提高稀有鮈鲫幼鱼AR的mRNA表达,而1 nmol/L的乙炔基雌二醇则对其表达有下调的趋势,0.1~10 nmol/L的双酚A对其表达均有显著下调,0.01μmol/L壬基酚对其表达有显著下调,而0.1和1μmol/L壬基酚对其表达均有下调的趋势,因此不同种类内分泌干扰物及其不同暴露浓度对稀有鮈鲫AR的mRNA表达有不同影响。     

雄激素受体类似物在雄性拟黑多刺蚁性腺中的表达和定位

[目的]探讨雄激素类似物在雄性拟黑多刺蚁性腺中的表达情况。[方法]以雄性拟黑多刺蚁为试验材料,采用SABC免疫组织化学方法检测雄性拟黑多刺蚁性腺是否存在雄激素受体类似物,并研究雄激素类似物在其性腺中的表达情况。[结果]免疫组织化学研究结果显示,在雄蚁的性腺内有雄性激素受体类似物的免疫阳性颗粒表达,主要分布在雄性附腺与精巢里。表明拟黑多刺蚁体内存在内源性类固醇雄激素类似物,其信号通路在调解其精卵发生方面有重要的作用,并且有与脊椎动物类似的性激素调控性征的通路。[结论]该研究为雄激素类似物功能的研究奠定了基础。     

小体鲟AR基因克隆、序列分析及其组织mRNA表达

采用RT-PCR 和RACE技术, 克隆了小体鲟(Acipenser ruthenus)雄激素受体(AR)基因cDNA全长序列, 应用real-time qPCR法对雌、雄个体不同组织中AR mRNA 的表达进行检测。序列分析表明, AR基因cDNA全长为2 953 bp, 包括5′端68 bp的非编码区(untranslation region, UTR), 2 528 bp的开放阅读框ORF(open reading frame)和3′端327 bp的非编码区(不包括ploy A 的尾巴)。AR前体蛋白由843个氨基酸组成, 理论分子质量为94.24 kD。同源比较结果表明, 小体鲟AR氨基酸序列与其他鱼类的AR氨基酸序列同源性较高, 与杂交鲟(A. ruthenus × Huso huso)、西伯利亚鲟(A. baerii)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)和日本鳗鲡(Anguilla japonica)的雄激素受体同源性分别为99%、98%、83%和83%。real-time qPCR分析小体鲟雌雄个体不同组织中的表达结果显示, AR基因在雌雄个体中相对表达基本相同, 都是在性腺、肌肉和肾中高量表达, 而在其他组织中少量表达。AR基因在小体鲟体内广泛表达, 表明该基因可能对其生长和繁殖有重要作用。