野桑蚕、家蚕海藻糖酶基因5''侧翼区的克隆与序列分析

海藻糖是一种双糖,广泛存在于包括细菌、酵母、植物和无脊椎动物在内的生物体内,主要功能是储备生物代谢所需的能源.在昆虫血液中,海藻糖是一种最重要的糖类,具有供给能量和提供合成生物大分子的底物等功能.其功能主要是通过海藻糖酶(Trehalase)的作用来实现的.家蚕海藻糖酶有可溶型和膜固定型两种类型,可溶型主要存在于蛹期中肠,而膜固定型存在于包括卵巢在内的多种组织.这两种类型酶是由同一个基因表达而形成不同的成熟海藻糖酶.海藻糖酶膜固定型存在于向血液面的卵巢膜内,该基因的表达是由滞育激素诱导调控.卵母细胞通过位于膜内的海藻糖酶,将血液中海藻糖降解成葡萄糖,然后吸收到胞内,最后合成糖原,从而导致蚕卵的滞育.从而海藻糖酶基因是从分子水平来解明家蚕滞育机理的一个重要途径.本实验从野桑蚕、家蚕苏@菊×明@虎基因组中分别克隆了野桑蚕和家蚕的海藻糖酶基因的5′侧翼区片段并进行了测序分析,以供进一步的启动子功能研究,现报道如下.     

T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达

从BL21(DE3)E．coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase，T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中，经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中，构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白，这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌，仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子，而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E．coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。     

硫的营养研究进展及其在生产中的应用

自 1 95 5年 cardon和 sizer首次发现无机硫对家禽具有促进生长作用之后 ,硫元素作为促进动物生长的一种必需元素 ,其营养作用也逐渐为人们所认识。人们对硫在畜禽上的营养作用、开发无机硫酸盐作为硫的添加剂、硫与其他微量元素之间的关系、硫酸盐在生产中的应用等一系列问题都做了大量的研究 ,并取得了许多卓有成效的研究成果 ,提高了畜禽的生产性能。1　硫在畜禽体内的分布硫是生物体必需的非金属元素。对于大多数动物来说硫的含量约占体重的 0 .2 5 %。硫元素分布在动物体内的各个细胞中 ,主要以有机硫的形式存在于蛋氨酸、胱氨酸、半胱…     

人血栓调节蛋白基因的表达及转基因小鼠的建立

用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白（hTM)基因，将其克隆到带有人EF－1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上，得到表达质粒pEF-TM。在转染pEF-TM的COS－1细胞中，hTM得到了瞬时表达，并且正确地定位到细胞膜上。用pEF-TM转染猪内皮细胞（PEC），经G418筛先得到稳定转染的克隆。凝血活性测定结果显示，表达hTM的PEC凝血时间明显延长，表明其抗凝血能力增强。通过显微注射方法，得到了1只F0代hTM转基因小鼠。Southern杂交结果表明，该转基因小鼠整合了9个拷贝的pEF-TM DNA,并能将外源DNA遗传给后代。     

新型生物功能性饲料蛋白源-生物E蛋白对猪的营养价值评定

试验首先对新型生物功能性饲料蛋白源 -生物E蛋白进行了营养成分测定 ,结果干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分、无氮浸出物含量分别为 91.5、6 0 .8、4 .5、3.2、6 .4、16 .7% ,总能为19.4MJ/kg ,赖氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺含量分别为 4 .4、1.4、3.1% ,α -淀粉酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、纤维素酶活性分别为 4 30 0、115、2 5 0、32 0U/g ,有益菌活菌总数 5× 10 9/kg。猪消化试验结果表明 ,粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、无氮浸出物、有机物消化率分别为 80 .4、71.2、4 3.0、95 .9、81.5 % ,消化能为 17.2MJ/kg。试验结果表明 :试验所用新型生物功能性饲料蛋白源—生物E蛋白作为一种新的蛋白原料 ,不仅蛋白含量高 ,而且富含多种生物活性物质 ,易于消化吸收。     

骨骼肌转导的基因DNA药物功能研究进展

基因DNA药物就是将裸露的质粒(naked plasmid)DNA作为一种药物导入机体内，并在细胞中调控蛋白质合成，分泌出细胞，作用于靶器官而达到预防和治疗的一种新型药物。实施基因DNA药物必须具备以下几个条件，即第一是目的性基因，例如病毒抗原基因、蛋白类激素、生长因子等；第二是基因转移系统的安全简便、高效、可控性；第二是有特定