鸡毒霉形体TM-1基因原核表达载体的构建及表达

对从含有鸡毒霉形体H3株TM-1基因的大肠埃希氏菌DH5α中提取的质粒，进行EcoR Ⅰ和Sα／Ⅰ双酶切，获得了大约为786bp的目的片段。将此片段与经EcoRⅠ和Sαl Ⅰ双酶切的线性原核表达载体pET-30a-1连接。转化宿主菌BL21(DE3)，筛选阳性克隆。提取质粒，经酶切、PCR扩增和测序分析确证其插入正确，从而构建成了重组表达载体。阳性克隆用IPTG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE电泳分析，证明其分子质量约为29ku；Western-blotting分析表明，该蛋白可被鸡毒霉形体阳性血清识别，具有生物学活性。     

堆型艾美球虫表面抗原基因cSZ1在大肠埃希氏菌中的表达

根据已克隆的堆型艾美球虫(Eimeria acervulina)广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA序列设计了特异性引物，用PCR方法扩增cSZ1的开放阅读框架(ORF)后克隆至表达载体pET-32a( )，构建了重组表达质粒pET-32a( )-cSZ1，并将其转化至大肠埃希氏菌BL21(DE3)。经IPTG诱导，获得了cSZ1重组抗原在大肠埃希氏菌中的高效表达，表达产物量可达菌体总蛋白的9．3％，融合蛋白的分子质量约为40ku。重组菌诱导表达的产物经SDS—PAGE后，用堆形艾美球虫感染鸡的超免疫血清进行免疫印迹分析，结果为阴性，提示cSZ1所编码的抗原可能主要是T细胞抗原表位。     

猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因的克隆、表达及其免疫活性研究

以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础.     

纤维素酶渣替代黄豆饲喂杂交奶牛试验

采用纤维素酶渣替代黄豆对西黄杂奶牛(西门塔尔×本地黄牛)作饲喂对比试验,并对其产奶量及奶品质进行观察。结果表明:试验组比对照组牛日产奶量平均提高1 88kg,其乳蛋白和乳糖含量也有不同程度的提高。     

奶牛肢蹄病的影响因素

奶牛肢蹄病是奶牛四肢和蹄部疾病的总称,是危害奶牛生产的三大疾病之一,其临床主要表现为跛行、站立姿势异常、起卧困难、泌乳量减少、渐瘦等,急性肢蹄病局部有红肿热痛的炎症反应.奶牛肢蹄病的高发病率及其对生产的严重影响,引起有关人员的高度重视,并进行了一系列的研究,积累了大量的研究资料.研究表明,引发奶牛肢蹄病的主要因素有5个方面,即营养、环境、遗传、疾病和饲养管理.     

过量使用抗倒酯对海滨雀稗草坪生长的影响

抗倒酯(Trinexapac-ethyl,TE)具有抑制草坪垂直生长,减少修剪频率的作用,近年来被广泛应用于高尔夫球场草坪,但常常因为过量使用而造成草坪伤害。为此,本研究分别对3种抗倒酯类产品(P、M、N)设置常规浓度(1mL·L~(-1))、中高浓度(1.5mL·L~(-1))、特高浓度(2mL·L~(-1))、超高浓度(10mL·L~(-1)),通过比较其对海滨雀稗(Paspalum vaginatum)草坪草屑量、生物量、颜色、密度、生长速度的影响,为抗倒酯产品的合理使用提供参考依据。结果表明,与清水对照相比,产品P、M、N在常规浓度下,草屑量分别下降70.0%、78.5%、80.0%,生长速度分别下降66.0%、51.5%、53.6%;超高浓度下,草屑量分别下降82.2%、87.8%、81.3%,生长速度分别下降71.1%、72.2%、83.6%,浓度越高下降幅度越大,但不同浓度处理间差异不显著(P0.05)。不同浓度处理对生物量影响也不显著。P、M、N这3种产品超高浓度处理使草坪草颜色分别从常规浓度处理的7.9、7.9、8.0分下降到7.3、7.2、7.2分,使草坪草密度分别从常规浓度处理的8.1、8.1、8.2分下降到7.5、7.4、7.4分。综合分析得出,在1 mL·L~(-1)常规浓度下,产品P对草坪生长速度抑制最强,且对草屑量、草坪颜色和密度影响较小,调控效果最好。过量使用抗倒酯不仅抑制效果不再明显,还会降低草坪质量。