盐酸克伦特罗ELISA法检测质量控制

克伦特罗(Clenbuterol)是一种β-受体激动剂,常用其盐酸盐,即盐酸克伦特罗,化学名为α-〔(叔丁胺基)甲基〕-4-氨基-3,5-二氯苯甲醇盐酸盐。20世纪80年代初,因发现其可明显促进动物生长,并能提高瘦肉率,而被称为“瘦肉精”。后因其可以残留在动物的体内,引起人的不良反应如心跳及心律不正常、引发心脏病而被禁用。但仍有部分养殖户不顾农业部的规定,为了使猪肉少长肥膘,多长瘦肉,在饲料中掺入瘦肉精,严重危害食品安全和人民群众身体健康。目前,克伦特罗的检测方法有GC-MS法、HPLC法、ELISA法、快速试纸条法等多种检验方法。在GB/T5009…     

紫花苜蓿对九种杂草的化感作用

试验运用生物测定法研究了紫花苜蓿叶化感物质对九种受体植物的作用.结果表明,紫花苜蓿叶提取物对多变小冠花的发芽势和发芽率具有抑制作用,与对照差异显著(P＜0.05);提取物对高羊茅种子的发芽势有促进作用,与对照差异显著(P＜0.05),其最终发芽率也增加(P＜0.05);除狗尾草外,其余八种受体植物的胚根长度都受到紫花苜蓿叶提取物的抑制,与对照的差异均显著(P＜0.05);提取物对稗草、狗尾草、高羊茅、毛马唐和多变小冠花的苗长具有促进作用,与对照差异均显著(P＜0.05);反枝苋的苗长则受到抑制(P＜0.05);提取物对受体植物的幼苗鲜重均有不同程度的影响,虎尾草、匍匐翦股颖、巴哈雀稗、反枝苋和多变小冠花幼苗鲜重明显降低,与对照差异达显著水平(P＜0.05).     

1-MCP对番荔枝果实低温保鲜效果的研究

1-MCP(1-甲基环丙烯)是近年来国内外研究比较多的一种乙烯受体抑制剂,它能不可逆地作用于乙烯受体,阻断乙烯的正常结合,抑制其所诱导的与果蔬、切花后熟或衰老相关的一系列生理生化反应[1]。与硫代硫酸银、2,5-降冰片二烯(2,5-NBD)和重氮基环戊二烯(DACP)等乙烯作用抑制剂相比,     

小菜蛾γ- 氨基丁酸受体基因片段的克隆、表达及特征分析

 利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR) 对小菜蛾( Plutella xylostella ) 的γ - 氨基丁酸a(GABAa) 受体基因cDNA片段进行了克隆和序列分析。通过简并性上游引物和下游引物扩增出小菜蛾GABAa受体基因248 bp的cDNA片段。该cDNA基因片段的氨基酸与已报道的烟芽夜蛾(Heliothis viresce)的GABAa受体基因氨基酸序列同源性为100%。以GABAa受体基因片段为基础, 构建了优化的半定量RT-PCR法, 以18S rRNA为内标, 研究小菜蛾不同组织以及不同发育阶段GABAa受体基因表达的差异。结果表明, GABAa受体基因在头部表达量最高, 胸部次之, 腹部最低; 在不同发育阶段的表达量差异不大。     

温度和GA_3对桃果实采后乙烯合成及桃ETR1同源基因表达的影响

为明确桃果实采后成熟衰老期间乙烯的合成与桃ETR1同源基因之间的关系,进一步了解乙烯的转导和作用过程,设计合成了桃ETR1扩增引物RTetr1和RTetr2,用RT-PCR方法研究了温度和GA3处理对白凤桃(Amyg-daluspersicaL.)果实采后乙烯生成和桃ETR1同源基因表达的影响。结果表明,低温处理降低了果实乙烯释放量,低温+GA3处理不仅降低了果实乙烯释放量,还延缓乙烯释放高峰期。PCR分析表明,桃ETR1的cDNA合成受温度和GA3调节,随着乙烯合成能力的增强,ETR1同源基因的表达水平增加,在乙烯信号转导过程中呈正向表达模式。     

草地早熟禾愈伤组织遗传转化受体系统的建立

以草地早熟禾成熟胚为外植体，并去除部分胚乳，或用浓盐酸处理，选择NB＋2，4-D2mg／L为诱导培养基，NB＋6-BA2mg／L为分化培养基，1／2NB＋IAA0．5mg／L＋NAA0．5mg／L为生根培养基，建立了这些品种的胚性愈伤组织高频诱导与再生系统，确定了G418（40-50mg／L）Hpt（50mg／L）的筛选临界浓度，确定了最佳分化时间，探讨了建立草地早熟禾转化受体系统的必要条件。     

冷冻管法保存兔胚胎的研究

为建立兔的胚胎库,探索一种效果稳定可靠、方法简捷的冷冻方法,试验选择冷冻管法一步式玻璃化冷冻保存兔胚胎,比较了不同冲胚时间对兔胚胎冷冻保存效果的影响.配种后65 h冲胚保存效果好于60 h和55 h,复苏胚胎囊胚孵化率依次为:63.1%、62.5%和60.7%,差异不显著.不同预处理对冷冻效果的试验中,胚胎在4℃预处理4 min保存效果最好,囊胚孵化率为71.5%.在4℃下2 min的保存效果(21.6%)低于同组的其它处理,差异显著(P＜0.05).室温1 min的保存效果略高于前者(31.0%),但显著低于同组其它处理(P＜0.01).优化冷冻过程以后,比较两品系的冷冻效果,青紫兰兔(Chinchilla Rabbit,CR)有效供体的平均胚胎数高于新西兰兔(New Zealand White Rabbit, NZWR),42.4±8.8 vs 38.9±5.5 枚/只,但差异不显著(P＞0.05).胚胎移植后,新西兰兔6只受体1只死亡,5只妊娠,产活子38只,青紫兰受体5只有4只妊娠,共产活子28只.胚胎活子效率28.8%和25.9%(NZWR和CR),差异不显著.显示冷冻管一步法玻璃化冷冻保存兔胚的方法可以保存兔胚并获得子兔.     

鹅黑素皮质素受体-4基因的克隆与序列分析

黑素皮质素受体-4（Melanocortin receptor-4,MC4R）是其黑素皮质素受体MCR（MC1-5R）家族成员之一,属G蛋白偶联受体。它可与瘦蛋白、神经肽、α-黑素细胞刺激素等一起调节动物体重和采食量。参考鸡MC4R基因序列设计引物,克隆并测序了鹅MC4R基因。结果表明,鹅MC4R基因编码区全长996 bp,其核苷酸序列与鸡的同源性为95.3%,与人、牛、猪等哺乳动物同源性在75%-79%;其氨基酸序列与鸡的同源性达到98.5%。构建哺乳类、鸟类和鱼类MC4R基因核苷酸进化树显示,鹅较早地与哺乳类动物分化开来。分析MC4R蛋白的氨基酸残基特性参数表明,MC4R的7次跨膜结构与MC4R的亲水性区域、电荷密度以及氨基酸残基位于表面概率的变化规律相一致。     

北京鸭PRLR基因部分序列的克隆及分析

利用PCR方法克隆了北京鸭催乳素受体(PRLR)基因部分序列,该序列长1325bp。序列分析结果表明,该序列由第9外显子的一部分(57bp)、第9内含子(635bp)以及第10外显子的一部分(633bp)组成;在核苷酸水平上,北京鸭的该序列(除去内含子)与鹅(U07694)、鸡(D13154)、野鸽(DQ209271)、火鸡(L76587)的相似性分别为94.2%、88.7%、86.8%、86.1%;在氨基酸水平上,与鹅(ABA71353)、鸡(BAA02439)、野鸽(AAA20646)、火鸡(AAB01544)的相似性分别为93.5%、84.3%、80.8%、80.9%。     

苏太仔猪FUT1基因M307位点多态性与F18大肠杆菌抗病相关性的体外鉴定

采用PCR-RFLP方法检测了江苏苏太断奶仔猪FUT1基因M307位点等位基因多态性分布,在所检的49头仔猪中,GG基因型个体16头,AG基因型19头,AA基因型14头。在此基础上,制备上述不同基因型个体仔猪小肠上皮细胞,分别与表达F18ab菌毛的野生型大肠杆菌、表达F18ac菌毛含fed操纵子全基因的重组大肠杆菌和V型系统表面分泌表达F18abFedF亚单位的重组大肠杆菌进行体外黏附试验和黏附抑制试验。研究结果表明:FUT1基因M307位点中GG型和AG型仔猪小肠上皮细胞均能黏附上述3种大肠杆菌,而AA型个体小肠上皮细胞则不能黏附。将上述3种大肠杆菌分别与抗F18ab菌毛高免血清、F18ac菌毛高免血清及抗F18abFedF亚单位单因子血清作用后,则失去黏附仔猪肠上皮细胞能力。上述结果对苏太猪从体外试验上证明了FUT1基因M307位点多态性与断奶仔猪腹泻和水肿病存在着直接的相关性。