香草兰生防细菌的筛选、分子鉴定及其抑菌机制的初步研究

通过平板对峙法从香草兰根际微生物中筛选出对香草兰根(茎)腐病菌(Fusarium oxysporum)、香草兰疫病菌(Phytophthora nicotianae)和香草兰细菌性软腐病菌(Erwinia carotovora)均有良好抑制效果的生防菌10株。通过16S r DNA序列比对及系统发育树分析,其中7株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus.amyloliquefaciens),2株为枯草芽孢杆菌(B.subtils),1株为甲基营养型芽孢杆菌(B.methylotrophicus)。提取脂肽类化合物进行抑菌分析,发现10株生防菌脂肽类提取物对香草兰根(茎)腐病菌和香草兰疫病菌均有良好的抑制效果,有4株的脂肽类粗提物对香草兰细菌性软腐病菌有强烈的抑制活性。对其中2个菌株脂肽类粗提物进行MALDI-TOF/TOF-MS检测,发现菌株VX2R11产生表面活性素(Surfactin)和伊枯草素A(Iturin A)2种脂肽类化合物,菌株VX2S02仅产生伊枯草素A,推测产生伊枯草素A是菌株VX2R11和VX2S02拮抗香草兰根(茎)腐病菌和疫病菌重要机制;产生表面活性素是菌株VX2R11拮抗香草兰细菌性软腐病菌的重要机制。     

海参胶原蛋白的提取及其理化性质

胶原蛋白(PSC)是海参蛋白的主要组成,研究其理化性质为海参的进一步利用提供理论基础.以格皮氏海参为原料,采用胃蛋白酶促溶法提取海参胶原蛋白,并通过聚丙烯酰胺凝胶凝胶电泳、氨基酸分析以及傅立叶红外光谱对其理化性质进行研究.结果表明,海参胶原蛋白分子组成为(α1)3,α1的分子量约为150 kD;氨基酸组成以甘氨酸含量最高(6.01％),脯氨酸与羟脯氨酸含量为6.14％,符合水产胶原蛋白特征;傅立叶红外光谱分析结果表明其保持三螺旋结构.     

碱性蛋白酶酶解波纹巴非蛤制备小分子肽

以波纹巴非蛤为原料,用碱性蛋白酶酶解波纹巴非蛤肉蛋白制备小分子肽,并运用响应面方法设计优化波纹巴非蛤酶解的工艺条件。结果表明:在pH值6.5、液固比为3∶1、酶含量为2.50%、酶解温度为50.4℃、酶解时间122.60 min的条件下,小分子肽的提取率最高、为63.04%。     

不同水解程度丝素肽对黑色素生成抑制能力的研究

探讨了脱胶丝素经盐溶解后进行碱水解时 ,不同条件对丝素水解程度及不同水解程度丝素肽对蚕血黑色素生成的抑制能力的影响 .结果发现 ,温度对丝素的水解程度影响最大 ,时间其次 ,浓度的影响最小 ;丝素蛋白液未水解时 ,其对黑色素抑制率很低 ,只有 2 8.34% ,而丝素水解后 ,抑制率迅速提高到 4 8.95 % ,并且随着水解程度的加深不断提高 ,当氨基氮浓度达 0 .4 76 5g·L-1时 ,其对黑色素生成抑制率达最高值 6 7.14 % ;之后 ,随着水解程度的增加 ,其黑色素生成抑制率反而下降 .     

日本鳗鲡胶原蛋白和小清蛋白的过敏原性

以日本鳗鲡皮与肌肉组织为研究对象,采用碱溶、酸溶、盐析、冻干等方法纯化得到胶原蛋白,采用加热、饱和硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析等方法纯化得到两种亚型的小清蛋白(PV-Ⅰ和PV-Ⅱ),纯化的目标蛋白经动物特异性抗体的免疫印迹实验确证。酶联免疫吸附测定和免疫印迹分析结果显示,纯化的胶原蛋白和小清蛋白分别与鱼类过敏患者阳性血清发生特异性反应,且二者之间无免疫交叉反应。体外模拟胃液消化实验和SDS-PAGE分析结果显示,胶原蛋白和小清蛋白均具有较高的消化稳定性。结果提示,日本鳗胶原蛋白和小清蛋白具有较高的消化稳定性和免疫原性,二者可引发不同患者的IgE介导特异性超敏反应。     

水产加工废弃物发酵法制备抗氧化肽的研究

以水产加工废弃物小黄鱼头与鱼骨、日本鼓虾虾皮为原料,接种蛋白酶产生菌ZS2发酵后,以紫外分光光度法和邻苯三酚自氧化法测定不同发酵时间发酵液抗氧化活性及其肽含量。结果表明,两种原料发酵一段时间后,肽的含量趋于稳定,15g左右的样品发酵后肽的含量维持在1600μg／ml左右;发酵液对超氧阴离子的清除效果在开始发酵30小时内处于较低水平,到发酵后期,随着时间的延长,发酵液对超氧阴离子的清除能力显著增强,鱼头鱼骨发酵液的抑制率超过50％;日本鼓虾发酵液对超氧阴离子的清除效果更为显著,抑制率在发酵102小时时超过80％。     

血红素加氧酶1基因表达调控序列的克隆及应用研究

为了获得京尼平苷调节HO-1基因表达的直接证据,克隆了ho-1基因的表达调控序列,并将其构建到以荧光素酶为报告基因的p-GL-3质粒上,通过转染HEK293细胞,对京尼平苷调控报告基因的表达进行了分析,结果证实:京尼平苷能够剂量依赖的提高报告基因的表达水平,提示京尼平苷诱导HO-1水平上调与增强其转录有关.     

桂蚕H9黄茧丝素肽的提取工艺及其护手霜的功效品质评价

蚕丝蛋白在护肤品的研发上具有广阔前景,以桂蚕5号家蚕白茧为对照,对桂蚕H9黄茧进行多种脱胶和溶解方法组合试验,通过检测丝素肽的护肤理化指标,得出黄茧丝素肽的最佳提取方法,再制作成护手霜。结果显示,丝素肽含量在0.5～0.6 mgprot/mL;白茧和黄茧两种丝素肽均有一定美白性、保湿性、抗紫外线及抗氧化性,黄色茧丝素肽的酪氨酸酶抑制率高于白色茧;在抗氧化性方面黄茧与白茧能力相当。     

大豆蛋白的小分子酶解产物抗氧化活性研究

以低温冷轧豆粕为原料、大豆分离蛋白为反应底物,进行酶水解反应,酶解产物经离子交换层析,凝胶排阻层析等方法分离,获得了平均分子量为800 D的小分子活性肽(SBP),用邻苯三酚自氧化法测定其抗氧化性。结果表明:此类小分子活性肽对邻苯三酚(PR)自氧化具有较好的抑制作用(1 mg/mL SBP的抑制率为33.3%)。与谷胱甘肽(GSH)进行比较,二者具有相似的抗氧化活性。