全文获取类型
收费全文 | 1355篇 |
免费 | 28篇 |
国内免费 | 88篇 |
专业分类
林业 | 16篇 |
农学 | 48篇 |
基础科学 | 2篇 |
33篇 | |
综合类 | 457篇 |
农作物 | 50篇 |
水产渔业 | 50篇 |
畜牧兽医 | 724篇 |
园艺 | 25篇 |
植物保护 | 66篇 |
出版年
2024年 | 10篇 |
2023年 | 21篇 |
2022年 | 50篇 |
2021年 | 46篇 |
2020年 | 25篇 |
2019年 | 39篇 |
2018年 | 7篇 |
2017年 | 36篇 |
2016年 | 30篇 |
2015年 | 20篇 |
2014年 | 47篇 |
2013年 | 53篇 |
2012年 | 63篇 |
2011年 | 94篇 |
2010年 | 65篇 |
2009年 | 96篇 |
2008年 | 84篇 |
2007年 | 86篇 |
2006年 | 81篇 |
2005年 | 77篇 |
2004年 | 53篇 |
2003年 | 47篇 |
2002年 | 33篇 |
2001年 | 35篇 |
2000年 | 35篇 |
1999年 | 36篇 |
1998年 | 32篇 |
1997年 | 35篇 |
1996年 | 41篇 |
1995年 | 33篇 |
1994年 | 22篇 |
1993年 | 22篇 |
1992年 | 7篇 |
1991年 | 7篇 |
1990年 | 1篇 |
1989年 | 1篇 |
1955年 | 1篇 |
排序方式: 共有1471条查询结果,搜索用时 0 毫秒
1.
在国内首次用PCR技术检测牛胎儿弯曲杆蓖,试验结果表明,灭菌生理盐水中的胎儿弯曲杆菌胎儿亚种或性病亚种均可检出;而空肠弯曲杆菌,葡萄球菌,链球菌,大肠杆菌等均为阴性。本法特异性和灵敏度很高,甚至可检出样品中的一个菌体。应用前景良好。 相似文献
2.
用聚合酶链反应检测犬传染性肝炎的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
应用聚合酶链反应(PCR)对人工感染犬传染性肝炎病毒(ICHV)的犬进行定期尿检,并以血凝和血抑制试验及病毒分离进行比较。结果表明,用PCR方法可以快速检出排毒的犬,其灵敏度是血凝效价的上百倍。 相似文献
3.
4.
5.
目的:探讨lgr5甲基化与人类卵巢癌临床病理之间的联系,以及其作为判定总的生存率的价值。方法:采用甲基化特异性聚合酶链式反应(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)方法分析卵巢癌患者石蜡组织中lgr5启动子DNA甲基化情况。结果:lgr5在正常卵巢组织中几乎无甲基化改变,而在良性卵巢肿瘤中频率升高,上皮性卵巢癌组织中甲基化频率明显升高(P0.01);lgr5甲基化与低分化上皮性卵巢癌(P0.01)、肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ(P0.05)以及淋巴结转移(P0.01)相关,但与组织类型关系不明显(P0.05)。在70例上皮性卵巢癌患者组织中,lgr5甲基化频率为62.9%(44/70),并且5年总的生存率明显低于未甲基化的患者(P0.05)。结论:lgr5甲基化与上皮性卵巢癌分化程度、肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ以及淋巴结转移密切相关,同时也可以作为上皮性卵巢癌患者总的生存率的判定指标之一。 相似文献
6.
柿属植物ISSR分析技术的建立 总被引:15,自引:0,他引:15
以部分柿属(Diospyros)植物为材料,对ISSR-PCR反应体系腗g2+、dNTPs、引物、模板DNA和Taq DNA聚合酶浓度,退火温度及扩增循环次数进行了探讨,确立了适合柿属植物ISSR分析技术体系在25 μL反应体系中,含1× Buffer,Mg2+2.0或2.5 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.6 μmol/L,Taq DNA聚合酶1U,甲酰胺2%,模板DNA 2.4 ng/μL;PCR扩增程序94℃变性3 min;94℃ 30 s,(Tm+2)℃(根据引物不同设定)45 s,72℃1.5 min,35个循环;72℃延伸7 min;2%琼脂糖电泳分离PCR产物.结果为柿属植物遗传多样性和分子系统学研究提供技术支持. 相似文献
7.
8.
9.
为建立同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PRV)的多重RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的PEDV S基因、TGEV S基因和PRV VP6基因序列设计合成引物,利用这3对引物对同一样品中的PEDV、TGEV、PRV进行多重RT-PCR扩增,结果显示,该方法可以同时扩增PEDV(682 bp)、TGEV(480 bp)和PRV(297 bp)的特异性DNA片段,而对猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的PCR扩增结果均为阴性;敏感性试验结果表明,该多重RT-PCR方法对PEDV、TGEV和PRV的最低检出量分别为3.3×103拷贝/μL、3.2×103拷贝/μL和2.8×103拷贝/μL。利用建立的多重RT-PCR检测方法和单项RT-PCR对20份临床病料进行检测,结果显示,两者的总符合率为100%。结果表明建立的多重RT-PCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可以用于这3种病毒的同时检测和疾病的鉴别诊断。 相似文献
10.
犬新孢子虫NcSRS2基因原核表达质粒的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
根据已发表的犬新孢子虫NcSRS2基因序列,设计1对含有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点的引物。以提取犬新孢子虫虫体基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得NcSRS2 ORF基因片段,将此基因片段克隆到pMD18-T Simple载体上,用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切该片段,回收得到含有两个酶切位点黏端的Nc-SRS2 ORF基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的PGEM-4T-2原核表达载体中,获得重组质粒pGEX-NcSRS2,经PCR鉴定,限制性内切酶分析和克隆片段序列测定比较,证实了重组质粒的正确性。 相似文献