瓠瓜KNOX基因家族全基因组鉴定及组织表达分析

【目的】 探明瓠瓜KNOX基因家族特征,在瓠瓜全基因组水平上对KNOX基因家族成员进行鉴定和分析,研究其组织表达模式。【方法】利用生物信息学方法,对瓠瓜KNOX家族基因成员进行鉴定、编码蛋白理化性质分析及家族成员结构域和保守基序分析,利用MEGA 5.05软件构建系统进化树,采用实时荧光定量PCR技术,分析KNOX基因在瓠瓜不同组织（根、茎、叶、花、果实）中的表达情况。【结果】鉴定到12个瓠瓜KNOX家族基因,这些基因分布在6条染色体上,且均定位于细胞核。大多数瓠瓜KNOX家族蛋白含有同源异型盒蛋白特有的4种结构域KNOX1、KNOX2、ELK 和Homeobox_KN。系统进化分析将瓠瓜KNOX基因分为KNOX Class Ⅰ和KNOX Class Ⅱ 2大类群,2个类群又可进一步分为5个分支,其中Class Ⅰ-C为瓠瓜特有的进化分支。KNOX基因启动子区有多个激素响应元件和植物生长相关元件。组织表达分析发现,瓠瓜KNOX基因具有不同的表达模式,KNOX Class Ⅰ类基因表达具有组织特异性,在根、茎和果实中表达量较高,在其余组织中表达量较低或不表达,其中Lsi04G014450在根和茎中表达量最高,Lsi11G006380在果实中表达量最高;KNOX Class Ⅱ类基因在所有组织中均有较高表达。【结论】瓠瓜KNOX基因家族有12个成员,分布于6条染色体上,在进化关系上可分为5组,具有瓠瓜特有的进化分支,在不同组织中的表达具有特异性。     

扭果花旗杆组织培养与再生体系的建立

【目的】以扭果花旗杆(Dontostemon elegans)根和下胚轴为外植体,建立扭果花旗杆组织培养体系,为后续遗传转化体系的建立提供技术基础。【方法】以MS培养基为基础培养基,利用萘乙酸(NAA)探究根和下胚轴直接诱导不定芽情况,利用2,4 二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、NAA、苯基噻二唑基脲(TDZ)、吲哚丁酸(IBA)进行愈伤组织诱导及分化和不定芽生根试验,统计愈伤组织诱导及分化和不定芽生根情况,确定扭果花旗杆组培体系最佳培养基类型。【结果】（1）由根和下胚轴直接诱导不定芽的最适培养基分别为MS+0.3 mg/L NAA和MS+0.6 mg/L NAA,直接诱导不定芽的最佳外植体为根。（2）扭果花旗杆根和下胚轴都能诱导愈伤组织,其中根系诱导愈伤组织速度最快且状态最佳,其次为下胚轴。根系愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率可达100.00%;下胚轴愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.3 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA,诱导率可达100.00%。（3）根系和下胚轴的最佳愈伤组织分化培养基均为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,分化率分别为100.00%和86.66%。（4）最佳生根培养基为MS+0.5 mg/L IBA,生根率可达50%以上。（5）将组培苗移至土壤后,在光照培养室培养15 d,其存活率可达83.33%。【结论】建立的扭果花旗杆组培体系可获得与实生苗形态一致的组培苗,为扭果花旗杆遗传转化体系的建立奠定了技术基础。     

我国农民合作经济组织的制度供给分析

本文运用制度变迁理论对我国农民合作经济组织的制度供给特点进行了深入研究,结果表明,我国农民合作经济组织的制度供给具有"先试点,后推广"的特点,并且在此过程中,政府将作为正式制度供给者的身份发挥作用,而农户、企业、一般个人和社会团体将以非正式制度供给者的身份发挥作用。     

蒙古甘草与新疆红杆甘草再生植株体系的构建

为了建立蒙古甘草和新疆红杆甘草植株再生体系,本研究采用胚轴、叶片、子叶和茎段做外植体,探究了不同激素配比对二者愈伤组织诱导及再生植株生长情况的影响,筛选出愈伤组织诱导和植株再生的最适外植体及最佳培养基。实验结果显示：MS+2.0 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA为愈伤组织诱导与植株再生诱导的最佳培养基,其中,胚轴与子叶是最佳诱导外植体,愈伤组织诱导率均高于90%。本研究建立的快繁体系可为甘草优良品种繁育及甘草生产提供理论参考与实践指导。     

黄菊花组织培养研究进展及不同植物生长调节剂配方对愈伤组织诱导情况的研究

市场需求使得组织培养技术在黄菊花量产方面起着至关重要的作用。总结菊花组织培养进展情况,并采用黄菊花茎段作为外植体建立无菌体系,研究不同植物生长调节剂配方对愈伤组织的诱导情况。试验结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L的诱导培养基对黄菊花的培养最佳。     

广西壮族自治区农业产业化联合体的发展思考

农业产业化联合体是适应时代发展的一种农业经营组织。当前,广西壮族自治区农业产业化联合体发展仍面临诸多挑战,包括产业经营发展不平衡、龙头企业规模差距明显,利益联结机制不紧密、农民获益增收不明显,龙头企业牵引力不高、产品商品化经营程度低,联合体融资困难、发展资金短缺等。为此,在今后发展中,广西壮族自治区要加强政策支持、集中资源做好示范试点,完善内部组织制度、创新利益联结机制,创新农业经营业态、提升农产品附加值,创新金融扶持、鼓励社会农业金融创新。     

草地贪夜蛾核型多角体病毒对草地贪夜蛾的毒力及其侵染特征

为明确草地贪夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera frugiperda multiple nucleopolyhedrovirus,SfMNPV）对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda 的毒力及其体内外侵染特性,于室内测定SfMNPV对草地贪夜蛾的毒力,采用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色分析SfMNPV侵染后草地贪夜蛾的组织病理学特征,通过实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR）技术分析SfMNPV在草地贪夜蛾体内和Sf9细胞系中的复制特征。结果表明,SfMNPV对草地贪夜蛾2龄幼虫的LC₅₀和LT₅₀分别为7.39×10⁵ OBs/mL和3.82 d;SfMNPV可侵染草地贪夜蛾幼虫的真皮、气管、脂肪体和中肠等组织,未侵染肌肉组织;SfMNPV侵染96 h后草地贪夜蛾体内SfMNPV基因组拷贝数最大,为3.91×10⁶ 拷贝数/ng,SfMNPV侵染96 h后Sf9细胞培养上清液中SfMNPV基因组拷贝数最大,为2.08×10⁷ 拷贝数/mL。     

浙紫薯1号及其突变体新栗再生体系的初步建立

[目的]为研究浙紫薯 1 号及其突变体新栗的遗传转化及 IbMYB1 基因控制紫甘薯花色苷的合成机理奠定材料基础。[方法]以浙紫薯 1 号及其突变体新栗为研究材料,选择不同部位外植体及不同培养基进行甘薯离体再生体系及胚状体诱导试验。[结果]利用茎尖、带芽茎段的外植体在 MS(+0.000 3 g/ml VB 溶液)培养基中培养可快速获得无菌试管苗;在愈伤组织的诱导试验中,新栗的叶柄在 LS 培养基中的出愈率较高,同一品种的甘薯其茎尖、茎段的出愈率均高于叶片、叶柄的出愈率,不同外植体的生长状况最好的是茎尖,其次是茎段,叶片和叶柄的生长状况都分别出现不同程度的愈伤组织黄化、褐化、皱缩、变枯性状。诱导胚状体发生的培养基为 LS+4 mg/L 脱落酸(ABA)+1 mg/L赤霉素(GA₃)+ 蔗糖 30 g/L+ 琼脂 6 g/L(pH 5.8)。[结论]初步建立了甘薯离体再生体系,并从叶片、叶柄、茎尖、茎段不同外植体都获得了胚性愈伤组织,利用茎尖、茎段的胚性愈伤组织成功诱导出胚状体。     

CLCOK基因在母牦牛不同组织中的表达

CLOCK(Circadian locomotor output cycles kaput)是生物钟家族重要的核心基因之一,本实验提取了母牦牛的下丘脑、心、肝、脾、肺、肾、卵巢和肌肉8种组织,应用实时定量荧光PCR技术对青海高原母牦牛的八种组织中提取的RNA进行了CLOCK基因表达分析。结果显示:CLOCK基因的在八种不同的组织中均有表达,但存在差异,其中肝脏的表达量显著高于牦牛下丘脑、心脏、脾脏、肺脏、肾脏、卵巢和肌肉。