饲料蛋白质、脂肪、碳水化合物水平对草鱼生长和组织营养成分组成的影响

采用蛋白质、脂肪、碳水化合物含量不同的７种颗粒饲料，饲养初始体重约１６ｇ的草鱼，经６０天后取样分析，发现草鱼相对生长率随饲料蛋白质添加量的升高而显著上升；高蛋白质饲料一定程度上升高全鱼和肌肉的粗蛋白含量，并显著增加肝胰脏脂质，主要是中性脂质的积累。全鱼、肌肉和肠－肠系膜脂肪含量随饲料脂肪添加量增加而显著升高。这表明，饲料蛋白质添加量是影响草鱼肝脏脂质积累的主要因素     

FSH受体在雌山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

为探讨雌山羊腹腔肠系膜前神经节是否具备FSH调控胃肠功能活动的条件,取成年雌山羊的腹腔肠系膜前神经节各5对,经免疫组织化学SP法染色后,观察FSH受体在腹腔肠系膜前神经节的分布特点。结果显示,在腹腔肠系膜前神经节内,FSH受体免疫阳性产物主要存在于神经元的细胞质,为强阳性或中等阳性染色,而细胞核呈空泡状,不着色。另外,在神经节内过路纤维、施万细胞中FSH受体呈弱阳性染色。图像分析表明,该神经节内神经元胞体的FSH受体相对表达量极显著高于其他非神经元胞体结构(P0.01)。说明雌山羊腹腔肠系膜前神经节神经元是FSH作用的主要靶细胞,提示FSH可能通过影响腹腔肠系膜前神经节的神经元活动,从而影响其发出的交感节后神经,对胃肠器官功能活动进行调控。     

不同育性长牡蛎性腺发育过程中糖原和脂质的组织化学研究

为探讨不同育性长牡蛎(Crassostrea gigas)性腺发育过程中主要供能物质的利用和变化差异,利用过碘酸雪夫氏染色(PAS染色)和油红O染色法对不同育性三倍体长牡蛎及二倍体长牡蛎性腺组织进行观察分析。结果显示,增殖期,二倍体和三倍体长牡蛎性腺结缔组织中均含有大量糖原和脂质。随着性腺发育,二倍体和可育型三倍体(3nα型)长牡蛎性腺结缔组织中糖原含量明显下降,到成熟期几乎检测不到糖原,说明性腺结缔组织中的糖原为配子发生提供能量。脂质主要存在于性腺结缔组织和卵母细胞的细胞质中,说明脂质是卵细胞发育的重要组成物质。雌性二倍体和3nα型长牡蛎性腺结缔组织中的脂类含量随着性腺发育并未发生明显下降,推测糖原可能转化为脂质以满足性腺发育的物质需求。脂质在二倍体雄性长牡蛎的性腺发育过程中出现明显的减少,说明脂类在雄性性腺发育中的主要功能可能是供能而不是结构组成。糖原和脂类作为长牡蛎性腺发育过程中重要的供能和组成物质,在不育型三倍体(3nβ型)长牡蛎性腺发育过程中含量没有发生明显的变化,这与3nβ型配子发生受阻密切相关。推测3nβ型长牡蛎由于配子发育受阻,性腺发育初期积累的糖原和脂质并未分配至生殖细胞,而留在结缔组织中,从而使其在繁殖季节仍然能够保持快速生长。研究结果为牡蛎生殖发育调控机制及育性控制育种提供重要信息。     

宁夏某羊场绵羊肺炎支原体的分离鉴定及病理组织学观察

为了确定宁夏某羊场发生一起以体温升高、咳嗽、呼吸困难为临床特征且具有传染性的疾病的病原，采集濒死病羊的病理组织，应用细菌分离培养、分子生物学鉴定、病理组织学观察及免疫组织化学分析等方法对采集的病料进行病原检测和诊断。结果显示，细菌分离培养获得3株支原体分离株，分子进化分析发现其均属于绵羊肺炎支原体，与国际标准株Y-98的序列一致性为100%。病理组织学观察显示，肺泡上皮细胞坏死、增生，支气管管腔内和肺泡腔内大量炎性细胞浸润，支气管和气管黏膜上皮细胞坏死、脱落、固有层水肿、炎性细胞浸润。对不同脏器的免疫组织化学分析显示，绵羊肺炎支原体主要集中于肺脏和气管内，且肺脏的阳性组织百分比最高，其次是支气管和气管。结合疫病的流行病学调查，该羊场所发疾病为运输应激后感染绵羊肺炎支原体导致，该病原侵染并定植于肺脏、气管及支气管上皮细胞，引起羊严重的呼吸道病症。     

紫山药营养器官中花色苷组织化学定位初探

采用植物解剖学、组织化学定位和植物化学等3种方法,研究了紫山药营养器官花色苷分布积累状态和含量情况。结果显示,幼叶中花色苷主要分布在叶片上表皮附近栅栏组织和下表皮附近海绵组织;幼茎主要分布于表皮和棱角处的厚角组织;而块茎横切面由多个紫色"斑点"区域组成;比较各器官花色苷含量,块茎>幼叶>茎,块茎中花色苷含量最高,其次为幼叶,茎和成熟叶片中花色苷含量极低。结果为紫山药花青素合理利用提供了依据。     

塞内卡病毒多克隆抗体的制备及其在免疫组织化学中的初步应用

为了制备纯度高、特异性强的塞内卡病毒(SVA)多克隆抗体并研究其在免疫组织化学(IHC)中的应用，本试验用甲醛溶液灭活SVA,将其与矿物油佐剂充分混合乳化后，接种兔制备多克隆抗体并测定中和抗体效价，经Protein A亲和层析介质纯化，用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定抗体纯度，用斑点杂交法(Dot blot)鉴定抗体特异性；以该抗体作为一抗，应用IHC技术检测SVA感染猪的蹄部组织切片中抗原的表达情况。结果显示，制备的SVA多克隆抗体中和抗体效价为1∶1 024,纯化后的抗体经SDS-PAGE鉴定仅有分子量约55 kDa和25 kDa两条目的蛋白条带；Dot blot结果显示，该抗体特异性强，最低检测浓度为0.15μg/mL;IHC结果显示，该抗体在1∶500稀释时能够检测到组织切片中抗原的表达。结果表明，本试验制备的SVA多克隆抗体符合IHC技术要求，可为下一步SVA致病机理研究提供重要的试验材料。     

不同毛色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织中黑色素分布及ASIP蛋白的表达定位

为了研究ASIP基因在中国美利奴细毛羊被毛颜色形成过程中的作用机制，试验分别选取体况良好的3只野生型纯白色中国美利奴细毛羊，20只纯白色、8只棕色和10只黑色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊背部的皮肤组织，通过H.E.染色对比样本皮肤组织结构及黑色素分布差异；采用免疫组织化学染色检测ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊白色、棕色、黑色3种皮肤组织中ASIP蛋白的表达定位情况。结果表明：野生型与ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊的皮肤均由表皮、真皮、皮下结缔组织3部分组成，且表皮层最薄，各毛色皮肤结构组成无差异；黑色素颗粒主要分布于黑色、棕色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织的毛囊、毛干中，且黑色较棕色皮肤组织中分布的黑色素颗粒更为密集，而在白色被毛的野生型和ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织中均未发现黑色素颗粒；ASIP蛋白在白色被毛的ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊的表皮、毛囊外根鞘、毛乳头周围的毛基质中大量存在，在棕色、黑色皮肤组织中几乎不存在。说明ASIP蛋白在特定部位的表达情况与ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊的白色被毛毛色的发生相关。     

白血病抑制因子在胚泡植入期大鼠卵巢中的表达

采用免疫组织化学超敏SP法,对大鼠胚泡植入期卵巢组织内白血病抑制因子(Leukemia inhibito-ry factor,LIF)的表达进行了检测。结果表明,LIF在不同发育阶段卵泡的颗粒细胞中均有表达,在原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡的卵母细胞中高表达,成熟卵泡的卵母细胞中等表达;在初级卵泡和次级卵泡的内膜细胞中LIF高表达,在成熟卵泡的内膜细胞低表达;在卵巢组织基质细胞、血管内皮细胞、粒性黄体细胞、生殖上皮中高表达,在卵泡液中中等表达。说明LIF在大鼠胚泡植入期卵巢中的多种细胞内均呈高水平表达。     

榛子全基因组ChSEP基因鉴定、多克隆抗体制备及其在胚珠中的表达研究

【目的】正常的胚珠充实是榛子种仁形成的前提与基础，胚珠充实不足可频繁导致瘪仁、空壳果实的形成，SEP基因被认为是可以影响胚珠发育的E类MADS-box基因。为研究SEP在榛子种仁充实过程中的重要调节作用，拟鉴定参与榛子胚珠发育的重要作用基因ChSEP，并制备ChSEP的多克隆抗体，开展正常发育与败育胚珠中ChSEP的免疫组织化学分析，以期为深入解析SEP基因调控榛子胚珠发育机制提供科学依据。【方法】用榛子基因组与转录组数据鉴定基因组中所有的SEP基因家族成员，并进行重要SEP基因的原核表达载体构建、基因表达及多克隆抗体制备，最后对参与胚珠发育调控的重要SEP蛋白进行免疫组织化学检测。【结果】（1）榛子基因组中鉴定到3条ChSEP蛋白序列（Cor0054610.1、Cor0008190.1、Cor0119400.1），所有ChSEP蛋白均包含SRF-TF与K-box结构域。制备了Cor0054610.1的多克隆抗血清E18305和E18306，它们的抗体抗原条带分子量在45 kDa左右，1∶1 000稀释后可检测到1～2 ng抗原。（2）免疫组织化学分析结果表明：ChSEP在发育胚珠与败...