桑叶黄酮抗氧化及抑制蛋白糖基化作用

为观察桑叶总黄酮的降糖作用及其对抗氧化酶、蛋白糖基化的影响.用桑叶总黄酮(8 g生药/kg体重)灌胃四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠4周,观察给药前后血糖变化,测定LPO、SOD、GSH-px及果糖胺水平;分别以0.001,0.01,0.1 g/L桑叶总黄酮浓度加入体外蛋白糖基化体系孵育1,4,7,14,21,28d,测定早期糖化蛋白产物的浓度.结果表明:与对照组比较,桑叶总黄酮组有明显降血糖作用.桑叶总黄酮组血糖由(18.33±3.33)mmol/L降至(10.19±4.45)mmol/L,P＜0.05,LPO含量由(10.51±2.31)nmol/L,降至(6.01±2.04)nmol/L,P＜0.05,SOD水平由(471.1±103.0)Nu/mL,升至(678.7±31.5)Nu/mL,P＜0.001,果糖胺水平由(6.22±1.37)mmol/L,降至(1.70±0.32)mmol/L,P＜0.05,体外糖化蛋白产量孵育时间呈正相关,0.1 g/L桑叶总黄酮在各时间点均能使糖化蛋白生成量降低.因此:桑叶总黄酮能显著降低糖尿病大鼠血糖、LPO含量并提高SOD水平,抑制蛋白糖基化.     

马传染性贫血病毒囊膜基因gp90 V4区糖基化回复突变感染性克隆的构建

为了阐明我国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,本研究分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列.结果发现疫苗株在膜基因gp90 V4区潜在的N-连接糖基化位点出现了稳定的碱基替换,使该位点消失.为研究囊膜糖基化的作用,以疫苗株全长感染性克隆pLGFD3-8为亲本,利用反向遗传技术对该突变位点进行了糖基化序列回复突变操作,构建了全基因感染性克隆pLGFDg9.将其转染驴胎皮肤细胞(FDD).通过用逆转录酶活性、间接免疫荧光和RT-PCR方法检测而确定其感染性.结果表明,在FDD细胞中盲传3代后,在细胞培养物中可检测到逆转录酶活性,RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈阳性,电镜下见到典型的EIAV颗粒.     

蛋白质的糖基化作用及其在生物制药中的应用

糖基化是生物体一种最为常见且最主要的蛋白质翻译后修饰方式,对蛋白质性状及其功能的影响具有重要的生物学意义。近年来,随着糖生物学与糖基化工程的发展,已有越来越多的药物应用于临床。文章概括了蛋白质糖基化修饰的种类及糖基化修饰对蛋白质特性的影响;在此基础上,总结了近年来蛋白质糖基化工程在生物制药中的发展与应用。蛋白质糖基化工程作为一种新型的改良蛋白质性质的手段,必然会在蛋白质的改造中发挥越来越重要的作用。     

糖基化大豆抗原蛋白的致敏性及其对肠道健康的影响

大豆营养丰富，但其抗原蛋白的高致敏性易导致严重过敏反应。大豆球蛋白和β-伴球蛋白是大豆的主要过敏原，其抗原表位对致敏性起决定作用。通过适宜的加工手段改变过敏原蛋白表位结构，从而影响致敏性。糖基化是当前最有前景实现工业化的非酶加工新技术，不仅能改变蛋白质的结构、营养特性，同时能降低致敏性。文章介绍了大豆主要抗原蛋白的结构、糖基化反应，重点总结了大豆糖基化抗原蛋白致敏性的变化及其对肠道健康的影响，同时对糖基化蛋白面临的挑战进行展望，旨在为糖基化蛋白低致敏性产品的开发及促进肠道健康提供参考。     

拟南芥O-岩藻糖基转移酶AtPOFUT1的鉴定及生理功能初探

O-岩藻糖基转移酶(protein O-fucosyltransferase,POFUT)是催化蛋白质0-岩藻糖基化的关键酶,被证实与动物的生理病理过程密切相关.但在植物中,POFUT的鉴定和功能研究尚处于起步阶段.首先通过同源序列的BLAST和生物信息学分析,推测在拟南芥基因组中AT3G05320编码的蛋白具有潜在的...     

重组促卵泡激素在哺乳动物辅助生殖中的应用研究进展

垂体促卵泡激素（FSH）是卵泡生长发育、颗粒细胞增殖及类固醇合成、精子生成等生殖生理活动必需的糖蛋白激素（GPH），在人类和动物辅助生殖中扮演着非常重要的角色。天然FSH的半衰期很短，单次使用的有效血药浓度远不足以维持哺乳动物的卵泡周期，并且天然FSH的来源越来越受限。因此，重组FSH(rFSH)药物的开发迫在眉睫，rFSH不仅有助于提高繁殖效率，还可减少频繁给药给人类医学临床患者带来的精神压力和给动物造成的应激。本文主要针对近几年国内外rFSH的研究，如FSH的糖基化修饰、新生儿可结晶片段（Fc）受体（FcRn）介导及聚乙二醇（PEG）化，以及其对雌性卵巢调控功能进行综述，旨在为人类与动物的辅助生殖提供参考。     

血凝素的糖基化模式对G57基因型H9N2亚型禽流感病毒的稳定性和受体亲和性影响

G57基因型H9N2亚型禽流感病毒自2007年以来逐渐成为我国禽群中的优势基因型。序列分析显示，G57基因型病毒的血凝素主要存在5种糖基化模式。本研究利用反向遗传技术拯救了5株具有不同HA糖基化模式的病毒，分别命名为reHA7、reHA6、reHA5、reHA4、reHA3。稳定性试验结果显示，reHA6的热稳定性与酸稳定性最好，reHA7、reHA5次之，而reHA4、reHA3最弱。红细胞洗脱试验和红细胞凝集试验结果显示，reHA7的受体亲和性最强，reHA6、reHA5次之，而reHA4、reHA3最弱。固相结合试验结果显示，5株病毒均可与人型和禽型受体结合，并且reHA7与2种类型受体的亲和性最强，reHA6、reHA5次之，而reHA4、reHA3最弱。结果表明，血凝素糖基化模式影响H9N2亚型禽流感病毒的稳定性和受体亲和性，并以210位和305位糖基化位点的效应最为显著。本研究结果为深入理解H9N2亚型禽流感病毒的适应性进化提供了新的理论基础。     

单碱基编辑技术在动物中的应用

近年发展起来的人工核酸酶技术可引起特定位点的DNA双链断裂，断裂后通过同源重组修复机制使精准单碱基编辑成为可能。基于CRISPR/Cas9将Cas9n与胞嘧啶脱氨酶或腺苷脱氨酶融合而开发出的单碱基编辑系统可进一步提高单碱基编辑的效率和精确度，在不造成DNA双链断裂的情况下实现精准单碱基编辑。对动物进行单碱基编辑不仅有望提高其生产性能，而且能为人类疾病研究作出重要贡献。文章回顾了单碱基编辑系统的发展历程，重点介绍了单碱基编辑系统在动物中的应用，并对单碱基编辑系统在动物中的应用前景进行了展望，以期为动物基因编辑技术的研发和应用提供理论依据和应用案例。     

糖基化大豆分离蛋白替代鱼粉对黄河鲤幼鱼生长及糖代谢的影响

为探讨糖基化大豆分离蛋白(GSPI)替代鱼粉对黄河鲤(Cyprinus carpio haematopterus)幼鱼生长和糖代谢的影响,用GSPI替代0%(GSPI 0,对照组)、20%(GSPI 20)、40%(GSPI 40)、60%(GSPI 60)、80%(GSPI 80)和100%(GSPI100)的鱼粉配制6种等氮、等能(粗蛋白35.77%、粗脂肪6.07%)的饲料,分别饲喂6组(每组3个重复,每个重复30尾),体重为(13.44±0.27) g的幼鲤,进行8周养殖试验。结果表明,对比GSPI 0组, GSPI 60、GSPI 80和GSPI 100组幼鲤的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)及血清中生长激素(GH)、类胰岛素生长因子(IGF–I)含量均显著降低,而GSPI 40组幼鲤的饲料系数(FCR)显著增加(P<0.05)。随着GSPI替代鱼粉比例的增加,幼鲤的成活率(SR)、后肠的淀粉酶活性、钠葡萄糖共转运载体1 (SGLT1)和葡萄糖转运蛋白2 (GLUT2)基因表达量、肝的磷酸果糖激酶(PFK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6PD)和磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(P...     

血凝素糖基化模式对G57基因型H9N2亚型禽流感病毒抗原性的影响

G57基因型H9N2亚型流感病毒是当前威胁我国养禽业健康发展的重要病原。该病毒的免疫逃逸机制是值得探究的科学问题。本研究利用反向遗传技术拯救了5株具有不同血凝素(hemagglutinin, HA)糖基化模式的病毒。基于交叉血凝抑制结果绘制的抗原图谱显示，这5株病毒存在明显的抗原差异。这种差异与HA上的第21,210,289,304位糖基化位点直接相关，其对病毒抗原性的影响由大到小依次为304,210,289,21位糖基化位点。结果表明，HA糖链可能影响其周围的抗原表位的暴露程度，进而影响抗体与HA的结合，致使具有不同HA糖基化模式的病毒表现出抗原差异。因此，加强对流感病毒位点特异性糖基化的认识，从而更加准确地辨析HA糖基化与抗原距离的关系，对预测特定毒株的免疫逃逸能力以及疫苗的设计提供了依据。