徐淮山羊PPAR基因克隆及其表达产物亚细胞定位的研究

研究旨在克隆徐淮山羊过氧化物酶体激活增殖受体(PPAR)基因的cDNA,并通过EGFP融合蛋白对该基因产物亚细胞水平定位。采用RT-PCR方法克隆徐淮山羊脂肪组织PPAR基因cDNA,并构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的融合表达载体pEGFP-C1-PPAR,聚乙烯亚胺(PEI)介导基因转染NIH-3T3细胞,48h后荧光倒置显微镜下观察基因表达产物的分布,RT-PCR检测mRNA在体外水平的表达。结果表明:首次成功克隆出徐淮山羊PPAR基因的全序列cDNA,大小为1428bp,GenBank登录号为GU082382;构建了融合表达载体pEGFP-C1-PPAR;RT-PCR检测mRNA表达明显;EGFP-PPAR融合蛋白定位在NIT-3T3细胞质中。体外克隆的徐淮山羊PPAR基因cDNA,在单细胞水平上可表达于细胞质中,结果为进一步研究PPAR的生物学功能奠定基础。     

精细化饲养管理提高地中海水牛冻精质量与数量

过去,在我国南方地区水牛是重要的役用家畜,随着农业机械化的推广应用,现在的水牛已经变成了乳、肉、役兼用型家畜.而奶水牛是广西特色农业产业之一,一直以来,广西的水牛奶产量都位居全国前列,据不完全统计,2017年广西的奶水牛存栏数量稳居全国之首,达到5. 35万头,产奶量2. 65万吨.2018年广西为贯彻落实国家奶业发展...     

新疆驴细管冻精的制作

试验旨在研究新疆驴细管冻精制作过程中精液冷冻液、降温平衡时间及液氮熏蒸时间对精子冻后活力的影响。研究共设计3个试验。试验1对比了INRA-Freeze、Optidyl、房氏驴精液冷冻保存液、自配马精液冷冻冷冻液等4种精液冷冻液在精子冷冻过程对精子冻后活力的影响,筛选出适合制作新疆驴细管冻精的冷冻液;试验2探索在细管冻精制作过程中平衡90、120、150 min对精子冻后活力的影响;试验3比较在细管冻精制作过程中使用液氮熏蒸5、6、7、8、9、10 min时对精子冻后活力的影响,探索液氮熏蒸的最佳时间。结果显示,使用INRA-Freeze冷冻液或房氏冷冻液在冷冻过程中对精子的损伤最小;冷冻过程中,降温平衡90、120、150 min对精子冻后活力的影响差异不显著（P>0.05）;在冷冻过程中液氮熏蒸7 min时精子冻后活力最高,显著高于熏蒸5、9、10 min的精子冻后活力（P<0.05）,与熏蒸6、8 min时精子冻后活力差异不显著（P>0.05）。研究表明,为降低成本可使用INRA-Freeze冷冻液稀释精液,于冰箱中平衡90～150 min后装入0.5 mL的细管...     

两种检测精子活率方法的比较

精子活率是评价精液品质的一项重要指标,其在光学显微镜下的测定,操作简便、直观,仍为临床常规检查所应用。本试验就精子用伊红-苯胺黑染色法和中性红染色法两种精子活率的测定方法进行比较,以便选择一种快速又准确的方法。1材料与方法1.1材料1.1.1试剂:伊红Y、中性红染液均购自上海试剂三厂。伊红Y染液:用蒸馏水配制,浓度为0.15%;中性红染液:pH7.4PBS缓冲液配制,浓度为0.01%。1.1.2精液的采集和处理:精液采自宁夏隆德县某奶牛场。精液采集后放入37℃的恒温水浴箱内。借助光学显微镜将精液高倍稀释(以在光学显微镜下可以清楚看到精子轮廓…     

腺苷一磷酸激活蛋白激酶与采食量调节

<正>腺苷一磷酸激活蛋白激酶(AMPK)的概念首次出现在1988年。近几年的研究表明,AMPK在调节细胞能量代谢上起着重要作用,被称作细胞内的“燃料开关”,在动物抵御和适应环境应激的过程中也起着重要作用。最新研究显示,AMPK通过一些激素和养分等途径参与采食量的调节。本文总结了AMPK在采食量调节中的作用和可能机制,揭示研究其与动物营养代谢的重要性关系。     

黄鳍棘鲷精子冷冻保存方法探究

黄鳍棘鲷(Acanthopagrus latus)是中国具有重要商业价值的海水鱼类之一,对其精子开展冷冻保存可为黄鳍棘鲷育种提供一定的技术支持,可有效预防其种质资源衰退,保持其养殖业的可持续发展.该研究以黄鳍棘鲷精子为实验材料,对其精子冷冻保存的稀释液、葡萄糖浓度、抗冻剂种类及浓度、精子与保护液稀释比例和降温程序等进行...     

"雅士勇"口服液对猪的射精量和精子畸形率的影响

以大白猪和长白猪为研究材料,对照组不饲喂"雅士勇"口服液,两试验组分别饲喂25 mL和30 mL"雅士勇"口服液,研究"雅士勇"口服液对猪的射精量和精子畸形率的影响。结果表明,"雅士勇"口服液对射精量无明显影响(P>0.05),但对种公猪的精子畸形率有显著影响,对照组的精子畸形率均极显著地高于两个试验组(P<0.01),而两试验组之间精子畸形率差异不显著(P>0.05)。     

丁基羟基甲苯对山羊冷冻精子运动能力和细胞结构的影响分析

精液冷冻保存对畜禽遗传资源保护和人工授精技术推广具有十分重大的意义。但是,冷冻解冻过程严重损害精子结构功能的完整性。为了降低冷冻解冻过程对山羊精子的冷冻损伤,以新培育的云上黑山羊为实验对象,观察在冷冻稀释液中添加不同浓度[0 mM(对照组)、0.5 m M、1.0 m M、2.0 mM]的丁基羟基甲苯(BHT)对山羊精液的冷冻保存效果,评估BHT对冷冻精子运动能力、质膜和顶体完整性、ROS生成等参数的影响。采用假阴道法采集6只公羊精液,将每次采集的精液混合均匀以降低个体差异对实验结果的影响,按照BHT浓度分别加入稀释液进行精液稀释,稀释后的密度为2.0×10⁸个/mL。将稀释后的精液于5℃平衡3 h后,在液氮蒸汽中预冻7 min,最后投入液氮中保存。解冻时,将冷冻细管投入37℃水浴锅中30 s。结果表明,与对照组相比,向冷冻稀释液中添加0.5 mM BHT可显著改善山羊冻精的总活力(TM)、前项运动活力(PM)和快速前项运动活力(FPM),而且,0.5 m M BHT对冻精质膜和顶体完整性的冷冻保护效果极显著高于其他处理组(P<0.01)。另外,BHT也显著...     

盐度对西施舌精子活力及受精孵化的影响

在水温23.5℃下,采用显微观察的方法研究了不同盐度梯度下西施舌精子活力的差异,并探讨了盐度对西施舌受精率及受精卵孵化率的影响。研究表明,西施舌精子在盐度28中呈现最好的活力,快速活动的精子占92.95%;在盐度28～35中,受精率都高达98%以上,而分别在盐度10和45中未发现受精卵;盐度25～30的孵化率都达80%以上,盐度分别为15和40下的受精卵未继续发育而死亡。因此,适宜西施舌受精的最佳盐度范围为25～30。