大肠杆菌(O157)酶联免疫检测及注意事项

1材料与方法 1.1材料 抗原为Eae-Stx1/2B纯化蛋白;EHEC O157标准菌株(EDL933).抗体为单抗2H9纯化腹水,蛋白浓度为4.16毫克/毫升. 1.2方法 EHEC O157检测方法的建立.抗原包被浓度和抗体工作浓度的初步选择,用PBS调整Eae-Stx1/2B纯化蛋白浓度为8、4、3、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06微克/毫升,纵向包被1小时,封闭,洗涤,单抗从1:1000开始进行倍比稀释,横向加入各孔内,37℃反应1小时,加酶标二抗,洗涤,加底物液显色后终止,测定OD值.以OD值接近1.0,且前后稀释度出现较大变化时,该孔的包被浓度初步确定为最佳包被浓度,该孔抗体的稀释倍数为单抗的初步工作浓度.抗原的最佳包被温度和包被时间的确定.取5块酶标板,用初步确定的Eae-Stx 1/2B纯化蛋白的最佳包被浓度包被酶标板,分别于37℃0.5小时、37℃1小时、37℃2小时、37℃3小时、37℃4小时温育和4℃过夜;以初步确定的单抗工作浓度进行间接ELISA检测,测定其OD值.OD值最大最稳定的为最佳包被温度和时间.     

蓝舌病病毒实时荧光定量PCR检测技术的建立及初步应用

<正>蓝舌病最早于1905年发现于南非,主要存在于南纬40°至北纬53°之间的地区,包括美洲、非洲、澳洲以及亚洲。我国自1979年在云南分离到蓝舌病病毒以来,湖北(1983)、安徽(1985)、四川(1988)、山西(1993)、广西(1985)等省份分别报道发现了蓝舌病,此后蓝舌病普查中有29个省(市、地区)发现该病〔1〕。2006~2008年蓝舌病相继出现在荷兰、卢森堡、丹麦、瑞士、捷克以及英国,同年受到感染的     

塞北兔生长发育及生长曲线的拟合

采用Logistic非线性动物生长模型拟合塞北兔初生到6月龄的平均体重,进行生长曲线分析．结果表明：①根据Logistic生长曲线方程原理,确定了塞北兔生长曲线方程参数a=24．2593,b=0．9297,并对方程进行了拟合,建立了塞北兔生长曲线方程y^^=6596．5589／（1＋24．259 3e^-0.9297x）（P〈0．05）;②Logistic方程能很好的拟合塞北兔的生长过程,拟合度均在0．95以上,生长的拐点时间为3．43月龄,拐点体重为3298．28g,极限体重参数6596．5589g。     

那拉提草原草地群落结构及种间关联性研究

针对新疆新源县那拉提山地高草草甸退化草地恢复与合理利用问题,选取生长季节围栏+打草草地和当地自由放牧草地为研究对象,采用Dahl多样性指数、Shannon-Weaver多样性指数、Sorensen相似性指数、Pielou均匀度指数,2×2列联表Fisher精确检验、Pearson相关系数和Spearman秩相关系数来进行草地群落及种间关联性的研究。结果表明:围栏+打草草地物种多样性和均匀度指数均小于自由放牧区;2样地内物种总体关联性均表现出显著正相关;Spearman秩相关分析结果较2×2列联表Fisher精确检验和Pearson相关系数结果更为精确,Spearman秩相关分析结果显示,围栏+打草草地内显著相关种占总种数的7.69%,自由放牧样地显著相关种占总种数的8.02%;生长季节的围栏+打草和自由放牧2种不同利用方式下,形成完全不相同的生境,导致共有种关联不显著。因此,对那拉提山地草甸退化草地必须进行适度放牧利用的同时增加人为防治毒害草措施。     

生物个体"纯"与"杂"的相对论

物种是生物分类中的基本单位.在同一物种内,某一个体是"纯种"还是"杂种",都是相对的.一个生物是纯种或是杂种,需要有一个参照生物体.生物个体B是否是纯种,必须有一个同物种(或品种)的纯种个体A作为参照生物体.当B的DNA中单核苷酸序列与A的DNA中单核苷酸序列完全相同时,可以说,它与A是同一物种(或品种)的纯种.从"核苷酸序列"的角度说,地球上的每个人和动物都是杂合体,或可称为"杂种".同一物种内两个生物体之间的交配可视为"杂交",称之为"杂合体之间的杂交".同一物种内的生物体为了自己的繁衍与世代延续,总是在不断的杂交.这种亲代间的杂交会引起子代核苷酸序列的轻微变异,这种轻微的改变,多数情况下,不会改变生物的主要性状.当这种变异积累到一定程度,又引起更多、更大的变异,特别在某些核苷酸序列的关键位点发生改变,有时甚至只要有一个核苷酸被置换,就有可能改变生物的某些性状.本文对同一物种内生物个体种质的"纯"与"杂"的相对性及一个新物种的形成过程进行了阐述.     

卡死克对草地天敌昆虫通缘步甲的影响

试验研究了卡死克对通缘步甲成虫的急性致死毒性及田间撒施卡死克毒饵后对其种群数量消长的影响。室内口腔灌喂250ppm浓度的卡死克药液2μl／头后的第1～15天，灌药组与灌清水组的存活率均在70～90％，统计结果无显著差异，说明药剂对该步甲元急性致死毒性。在毒饵撒施后的7～17天，采用陷阱诱捕法调查对通缘步甲田间种群数量的影响，结果表明：处理区与对照区的日均诱捕数量为28．3和28．5头，两区间的差异并不显著。卡死克既不杀伤草地上游猎捕食的通缘步甲又能有效控制蝗虫种群数量的增长，使其能够发挥控制害虫的作用。通缘步甲发生数量大，与蝗虫种群消长有跟随现象，是一种值得研究保护利用的优势天敌种类。     

嗜水气单胞菌 β-hemA 重组菌的优化培养及其生长曲线的测定

用正交试验探讨温度、培养基、时间三个因素对嗜水气单胞菌β-hemA重组菌E.coliDH5α(PCB)基因产物表达量的影响,通过优化培养,选择最佳培养条件,显著提高了β的溶血素基因(β-hemolysisgene,β-hemA)产物的产量。实验结果表明:该重组菌株在100mlTSB(添加0.05%酵母浸提物,1.8μg/mlZnCl2),37℃培养30h收获,其毒素蛋白含量为3258μg,毒素溶血价为17.44hu/μg,而在LB(100ml)和营养肉汤(100ml)中最高蛋白量和溶血活性分别为1260μg,14hu/μg和1199μg,8.22hu/μg。所选择的三个因子中对毒素蛋白质含量影响最大的是培养基,其次是温度;而对溶血素影响最大的则是温度,其次为时间。最佳生长曲线测定结果表明,在培养基预热至37℃的情况下,PCB6h能进入对数期。     

基于VG-PENG收缩特征曲线与收缩各向异性的裂隙率估算模型

为量化农田裂隙发育程度,考虑脱湿过程中土壤孔隙在基质域、沉降域和裂隙域间转化,该研究提出基于土壤收缩特征和收缩各向异性的裂隙体积比率(裂隙率)关于含水率的预测模型.该模型包括3个子模型:改进VG型式的基质域收缩特征VG-PENG模型,描述收缩各向异性的几何因子Logistic模型,基于上述VG-PENG收缩特征模型和几...     

西双版纳绿孔雀种群现状调查

在西双版纳全州范围选择了167个点(村寨)进行访问调查,并布设16条调查监测样线开展野外调查,同时在16条样线上安装80台次的红外相机全天候监测.结果显示,除访问调查在2011—2016年间有4次发现绿孔雀身影,样线调查及红外相机监测均未发现其痕迹.据此推断,近年来最有可能分布绿孔雀的区域是勐宋村曼播散洞中缅边境一线,...     

紫柏山壳斗科植物群落物种多样性和稳定性研究

[目的]研究紫柏山壳斗科植物群落的物种多样性和稳定性,为该区域的物种多样性保护和培育抚育提供理论依据.[方法]于2019年7月,以紫柏山森林面积较大的4种壳斗科植物群落:锐齿槲栎林、槲栎林、栓皮栎林和米心水青冈林为研究对象,通过样地调查获取群落数据,采用多样性指数Shannon-Wiener(H′)、Simpson(D...