基于线粒体COI基因序列探讨广西钦州湾牡蛎的遗传分化

【目的】初步了解我国广西钦州湾牡蛎的遗传多样性及其分类和系统进化情况。【方法】以采自广西钦州湾的37个白肉牡蛎和29个红肉牡蛎个体为材料,对其线粒体细胞色素氧化酶亚基I(COI)的部分序列进行PCR扩增和序列比对,检测牡蛎的遗传多样性;计算牡蛎不同单倍型及GenBank中已登载的4种牡蛎间的遗传距离,采用聚类分析方法,构建其NJ和UPGMA系统进化树。【结果】66个白肉牡蛎和红肉牡蛎线粒体COI基因片段的PCR产物大小约为600 bp,扩增产物纯化并去除引物序列后获得约535 bp的核苷酸序列;碱基组成平均为:T 37.5%,C18.2%,A 23.8%,G 20.5%,A+T 60.5%,C+G 39.5%,A+T含量高于G+C含量。运用DNAStar软件对66个钦州湾牡蛎序列进行比对,白肉牡蛎中共检测到4个多态位点,包括3个转换位点和1个颠换位点,有4种单倍型;红肉牡蛎中共检测到26个多态位点,转换位点和颠换位点各13个,有3种单倍型。GenBank中香港牡蛎COI序列与白肉牡蛎的遗传距离为0.000,有明巨牡蛎COI序列与红肉牡蛎的遗传距离为0.011,白肉牡蛎与红肉牡蛎的遗传距离为0.146;NJ和UPGMA系统进化树表明,白肉牡蛎与红肉牡蛎亲缘关系较远,白肉牡蛎与香港牡蛎聚为一支,红肉牡蛎与有明巨牡蛎聚为一支。【结论】序列特征、遗传距离和系统进化树分析结果表明,COI基因可用于牡蛎的种类鉴定和系统发育分析。     

不同营养源对人工湿地基质生物膜培养液pH值的影响

采用恒温摇床培养方法,研究了不同营养源(处理1:尿素+乙酸钠;处理2:亚硝酸钠+乙酸钠;处理3:硝酸钾+乙酸钠;处理4:碳酸氢铵;处理5:硫酸铵+碳酸氢钠;处理6:磷酸二氢钾+碳酸氢钠)对复合垂直流人工湿地基质生物膜培养液pH值的影响,探讨了pH值变化过程中生物膜脱氢酶活性和多糖含量的变化规律.结果表明,处理1、4以及5中培养液pH值先下降然后再上升,但下降和上升的幅度不同.处理2、3以及6中培养液pH值添加碳源前在7.30～7.40之间缓慢变化,添加碳源后均上升至9.00左右.在培养液pH值变化的过程中,生物膜脱氢酶活性和多糖含量也发生改变.处理1、2、3中生物膜脱氢酶活性均在pH值上升的过程中达到最高值,而处理4、5、6中脱氢酶活性随pH值的变化呈下降趋势.对于所设6个处理,除处理4中多糖含量在整个试验过程中基本不变外,其余5个处理中多糖含量均在pH值上升过程中一直增加.     

响应面试验优化超声辅助法提取黄秋葵多糖工艺及对多糖脱色工艺的研究

采用超声辅助水提醇沉法提取黄秋葵多糖,并用响应面试验优化其最佳的工艺参数。确定当水提温度为68.08℃,超声时间为41.05 min,液料比为50∶1 (mL/g)时为提取最佳工艺,此时秋葵多糖得率最佳为6.71%。由于提取的秋葵多糖颜色较深,需要用脱色剂对多糖进行脱色,同时又要有良好的多糖保留率,选用新型大孔吸附树脂D101对其进行脱色处理,通过单因素和正交试验确定最佳的脱色工艺为当D101树脂用量为3%,脱色时间为2 h,脱色温度为40℃时,脱色率达到最佳为38.05%,多糖保留率为90.76%。     

不同种植模式对齿瓣石斛生物碱与多糖含量的影响

[目的]探讨一种高产高效的齿瓣石斛种植模式,从而达到大规模生产的目的。[方法]测定药用植物齿瓣石斛在4种栽培模式下的生物碱和石斛多糖含量。[结果]①仿野生栽培种植模式下总生物碱含量和石斛多糖含量显著高于集约化种植;②同一种植模式下2年生植株总生物碱含量和石斛多糖含量高于1年生。[结论]自然林仿野生栽培法下的齿瓣石斛植株有着较高的生物碱与多糖舍量,具有质量高、生态效益好的优点,适合大面积推广种植。     

超声波辅助提取海膜多糖的工艺优化

针对海膜藻中可溶性粗多糖的提取工艺进行了初步研究。采用单因素试验和L9(33)正交试验研究了提取时间、提取温度、超声功率、超声时间和料液质量浓度对多糖提取的影响。研究结果表明:最佳水浴提取时间为4 h、提取温度为90℃;料液质量浓度对多糖提取有显著影响,即料液质量浓度是影响多糖提取率的主要因素,其次是超声时间,再次是超声功率;最佳工艺为料液质量浓度0.020 g/mL、超声时间60min、超声功率400 W;多糖提取率为36.91%,总糖含量为63.85%。     

酸枣果肉多糖保健功能的初步研究

【目的】研究酸枣果肉多糖在抗衰老、增强免疫及心血管功能方面的保健作用。【方法】制备酸枣果肉多糖备用,以小鼠为试验动物,采用皮下注射D-半乳糖的方法构建衰老模型小鼠,给衰老模型小鼠连续灌胃低剂量(250mg/kg)和高剂量(500mg/kg)酸枣果肉多糖30d,测定血清中SOD、CAT活性和MDA含量,试验同时设空白对照组(给健康小鼠灌胃蒸馏水)、模型对照组(给衰老模型小鼠灌胃蒸馏水)和阳性对照组(给衰老模型小鼠灌胃维生素E 30mg/kg)。给健康小鼠连续灌胃60d低、高剂量酸枣果肉多糖,末次灌胃24h后,一部分取样测脾脏指数、胸腺指数和碳粒廓清指数;一部分小鼠尾静脉注射垂体后叶素诱发心肌缺血,测定注射前后小鼠的心率。【结果】酸枣果肉多糖可抑制衰老模型小鼠血中SOD和CAT活性下降和MDA浓度升高,其中酸枣果肉多糖高剂量组小鼠血清中的SOD、CAT活性和MDA浓度分别为空白对照组的97.3%,99.5%和101.5%。与空白对照组相比,酸枣果肉多糖能增加小鼠免疫器官质量和碳粒廓清指数,其中酸枣多糖高剂量组的碳粒廓清指数是空白对照组的3.363倍;酸枣果肉多糖对垂体后叶素所致心肌缺血小鼠的心率增高有一定拮抗作用。【结论】酸枣果肉多糖对所试动物具有抗衰老、增强免疫功能及改善心血管的保健作用。     

维药刺山柑果实营养成分的测定

分别采用氨基酸自动分析仪、火焰分光光度法、原子吸收分光光度计、苯酚-硫酸比色法、凯氏定氮法测定了刺山柑果实中氨基酸、矿质元素、多糖和总蛋白含量。结果表明，刺山柑果实中含有18种常见氨基酸，总含量为16.91%，其中包括人体必需的7种氨基酸，含量为5.63%；果实多糖平均含量为23.73%；蛋白质平均含量为16.94%。刺山柑果实中营养成分含量丰富，具有较高的营养价值。     

银杏叶水溶性多糖的分离、纯化、初步鉴定及活性研究

目的:从银杏叶中提取水溶性多糖并进一步纯化,得到均一的多糖PGBL3并研究其组成、性质及其活性。方法:粗多糖经反复冻融沉淀、Sevage法脱蛋白、超滤、柱色谱等方法分离纯化得到级分PGBL3。以比旋光度测定、醋酸纤维薄膜电泳、HPLC等方法检验其均一性,以hela细胞鉴定其抗肿瘤活性。结果:PGBL3为均一组分,GC分析其单糖组成为Gal、Man、Glc、Ara、Rha、GalA,摩尔比为:6.0︰2.4︰1.9︰2.1︰1.9︰1.0。结论:PGBL3为酸性杂多糖,相对分子量为1×105。具有一定抗肿瘤功能。     

复合酶法提取南瓜多糖及其抗氧化性的研究

[目的]优化复合酶法提取南瓜多糖的工艺条件,研究南瓜多糖的抗氧化性。[方法]采用单因素试验设计研究了不同提取时间、温度、料液比、pH值对南瓜多糖提取率的影响,并通过正交试验确定了提取南瓜多糖的最佳复合酶配比和最佳提取条件。采用水杨酸法检测南瓜多糖对羟基自由基（.OH）和改进的邻苯酚自氧化法检测其对超氧阴离子自由基（O-2）的清除效果。[结果]当纤维素酶的浓度为1.0%、果胶酶为1.5%、木瓜蛋白酶为1.0%时,以及温度为40℃、pH=4.6、料液比为1∶30、提取时间为30 m in的条件下南瓜多糖的提取率最高;南瓜多糖对.OH具有较好的清除效果,对O-2有部分清除作用。[结论]该研究为南瓜多糖的研究及应用提供了基础资料。     

2种栽培环境对铁皮石斛内生细菌多样性的影响

  目的  揭示不同栽培环境对铁皮石斛Dendrobium catenatum内生细菌群落结构的影响,解析与石斛多糖含量存在潜在关联的功能菌种。  方法  针对温室人工基质培养和仿野生立木附生培养2种栽培体系下的铁皮石斛C9品系根、茎、叶等各部组织内生细菌,采用Illumina测序平台的Miseq进行高通量测序分析其菌落结构和多样性,同时利用逐步回归法分析内生细菌分布与组织多糖质量分数的关联性。  结果  铁皮石斛在2种栽培环境不同组织中的菌群结构差异显著（P < 0.05）,附生立木仿野生环境比温室环境下物种丰富度更高。同时,根部所含分类操作单元（OTUs）数量最多（112~630个）,叶部则最少（28~73个）。其中,厚壁菌门Firmicutes（16.7%~34.9%）、拟杆菌门Bacteroidetes（8.7%~35.6%）和变形菌门Proteobacteria（15.9%~42.0%）的OTUs占优势。从菌种生理功能上看,固氮相关的菌种如弗兰克菌科Frankiaceae在树培环境下相对丰度更高,推测可能受树培寡氮环境的影响使固氮菌富集。逐步回归分析结果显示:不动杆菌Acinetobacter在根、茎、叶不同组织中的相对丰度与多糖质量分数变化关联度最大,其次为假单胞菌Pseudomonas。  结论  铁皮石斛内生细菌资源相当丰富,而栽培方式影响菌群分布,且与石斛多糖质量分数具有关联性。