柑橘衰退病毒柚类分离物CP基因的克隆及原核表达分析

以来自湖北省的HB柚柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)分离物(CTV-HB1)为材料,利用RT-PCR技术对其CP基因进行克隆,序列分析结果表明:CTV-HB1与典型茎陷点分离物SY568和NUagA的核苷酸和推定氨基酸的序列相似性均在97%以上,而与CTV速衰分离物T36和弱毒分离物T385和T30的核苷酸和氨基酸序列相似性较低,均在95%以下。将CP基因片段连接到表达载体,转化大肠杆菌后诱导重组蛋白的表达。SDS-PAGE和Westen-blot分析结果表明,经IPTG诱导后产生了预期大小的重组蛋白,该蛋白可与CTV-L5提纯病毒制备的多克隆抗体发生特异性免疫反应。     

Mx抗病毒蛋白在水禽业抗病育种中的研究展望

随着我国水禽业的飞速发展，其集约化程度的提高、饲养条件的恶化或改变、抗生素的药物残留问题、病毒抗原漂移、超强毒株或新型传染病的出现及母源抗体的干扰等系列问题，在生产上引起大量的死亡或造成亚健康状态，进而造成巨大经济损失。这迫使我们要探索新的防疫途径和重新重视抗病育种的研究。Mx蛋白是干扰素（IFN）在体内主要诱导合成的一种特异的抗病毒蛋白，如小鼠Mx1蛋白证明能抑制流感病毒、多里病毒、索戈托病毒的复制；小鼠Mx2蛋白能抑制棒状疱疹性口炎病毒的复制；人MxA蛋白能抑制麻疹副粘病毒、棒状疱疹性口炎病毒、布尼亚病毒、白蛉病毒、汉坦病毒、3型腺病毒的复制”。本文介绍了国内外Mx蛋白的发现历程、结构、抗病毒活性并探讨了Mx蛋白在水禽抗病育种和抗病毒诊断治疗方面研究的必要性，旨在为培育整体免疫力高的水禽品系奠定理论基础。     

不同苜蓿种质材料遗传多样性研究

通过对30个来自不同地区的苜蓿种质材料（品种）进行种子贮藏蛋白水平的遗传多样性研究。结果表明，来自国外的苜蓿种质材料具有较多的多态位点，较高的Shannon多样性指数和Nei’s多样性指数，说明相对于中国的苜蓿种质材料具有较广的遗传背景；通过聚类分析发现，来自国外的苜蓿种质材料的平均遗传距离要比来自中国的苜蓿种质材料要低，说明来自不同国家的苜蓿种质材料与中国本地的苜蓿种质材料遗传背景的差异性。同时研究发现，经过多年的种植不同苜蓿种质材料之间发生一定的基因交流，导致苜蓿种质材料的基因漂变。     

珠海生晒鱼虾有了统一标准

近日，由广东珠海万山海洋开发试验区委托珠海市标准化协会制定的《万山海洋捕捞生晒鱼虾》、《万山海洋捕捞生晒鱼虾生晒技术规范》通过了专家评审，即将由珠海市质量技术监督局发布实施，这是珠海市海洋海岛生晒鱼虾第一个农业地方标准。     

我国首例绿色荧光转基因克隆猪成功产下“荧光猪崽”

从东北农业大学获悉，我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪于2008年1月7日成功产下2头具有绿色荧光遗传特征的小猪。有关专家称，这次试验的成功标志着我国通过体细胞核移植技术生产转基因猪已经发展成熟。     

应用酵母双杂交系统初步筛选IBDV VP2结合蛋白

用RT-PCR扩增VP2 cDNA并克隆入诱饵载体pSos,与鸡法氏囊cDNA文库中分离的质粒DNA共转化cdc25H,筛选阳性酵母克隆;用酵母质粒DNA转化大肠杆菌,提取质粒再分别与诱饵载体pSosVP2共转化酵母细胞,利用酵母双杂交系统对阳性克隆进行验证.对阳性克隆的插入片段进行序列分析,根据生物信息学分析结果初步确定IBDV VP2结合蛋白编码基因.结果显示,经酵母双杂交共筛选出48个候选阳性克隆,分别转化酵母菌,经酵母双杂交验证后,获得阳性克隆19个.进一步的序列分析显示,在19个插入序列中,共编码8种不同的多肽,分别是Ras超家族中的RRAS2、Rit1和N-Ras,肿瘤相关蛋白TCTP和PARP14,抗病毒Mx蛋白,LAMB3蛋白以及蛋白激酶PRKX.VP2候选结合蛋白的获得为IBDV受体、诱导细胞凋亡或逃逸宿主抗病毒机制等研究奠定了基础.     

猪瘟病毒蛋白的结构与功能

猪瘟是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种急性、热性和高度接触性的病毒性传染病。猪瘟因其流行广泛、发病率和死亡率高,给许多国家的养猪业造成巨大的经济损失,在世界动物卫生组织制定的《国际动物卫生法典》中,它被列为A类16种法定传染病之一;在我国制定的《家畜家禽防疫条例实施细则》中也被列为一类传染病。当前猪瘟防治主要还是依赖于疫苗,虽然猪瘟疫苗的使用降低了猪瘟的发病率和死亡率,但是CSFV持续性感染导致的免疫失败,使人们开始把研究重点转向对病毒与宿主相互作用的研究。反向遗传学技术的出现,为我…     

Study on Proliferation and Apoptosis of EBL Cells Induced by P48 Protein of Mycoplasma bovis

The aim of this study was to investigate the effect of P48 protein on proliferation and apoptosis of embryonic bovine lung (EBL) cells.In this study,samples which co-incubated with P48 protein and EBL cells in different concentrations at different time points were collected,the proliferation rate of the cells was detected by MTT method,and the changes in the nuclear morphology of EBL cells were observed by DAPI staining method.Meanwhile,flow cytometry was used to detect the apoptosis rate of EBL cells induced by P48 protein.Real-time quantitative PCR was used to detect the changes in mRNA level of apoptotic marker genes,and Western blotting tested the Bax and Beclin-1 protein expressions.The results showed that under the condition of 72 h and 10 μg/mL of protein concentration treatment,P48 extremely significantly inhibited EBL cells proliferation (P<0.01),while 0.1 and 0.5 μg/mL protein concentration had no inhibitory effect (P>0.05).The nuclear morphology showed no significant change after protein induction for 12 h,but wrinkled and condensed at 24 h.The nucleus was fragmented,and a sprouted apoptotic body was appeared at 48 and 72 h.Apoptosis related genes expression showed no obvious increase at 2 and 12 h at mRNA level,but gradually increased at 24,48 and 72 h,and it showed a time-dependent manner.Accordingly,the expression of apoptosis marker proteins Bax and Beclin-1 significantly increased.Flow cytometry analysis showed that the apoptosis rate of EBL cells induced by P48 protein was 48.44%.In conclusion,P48 recombinant protein of Mycoplasmas bovis inhibited the proliferation of EBL cells and promoted their apoptosis,which provided reference for revealing the pathogenic mechanism of Mycoplasmas bovis.     

印尼看好中国石斑鱼消费市场

印度尼西亚海洋与渔业部预测,今年该国石斑鱼的产量将比中国和越南更高.这主要是因为中国和越南受到台风的袭击,养殖石斑鱼的浮网被破坏而造成的.