富含肌苷酸的核苷酸添加剂可改善保育仔猪的生长发育和健康

为研究富含肌苷酸(5’IMP)的核苷酸添加剂对断奶仔猪生长发育和健康的影响,本试验分为两个阶段性试验。阶段1:选取120头[(7.3±0.1)kg]断奶仔猪,分别饲喂核苷酸浓度为0.0 g/kg、0.2 g/kg、0.5 g/kg和1.0 g/kg的阶段1日粮。7 d后,饲喂阶段2日粮21 d,且核苷酸水平与阶段1保持一致。测定生长性能,分析血样中免疫学指标和氧化指标,并对腹泻进行评分。阶段1和阶段2:ADFI均随日粮中核苷酸添加量的增加表现为线性增长(P<0.05);且在整个28 d的试验期内,ADG和ADFI随日粮中核苷酸添加量的提高也呈线性增长(P<0.05)。阶段1中仔猪的免疫学指标没有变化;阶段2中,Ig A对核苷酸添加水平的响应呈显著的二次曲线变化(P<0.05),且当核苷酸添加量在0.2 g/kg和0.5 g/kg时,Ig A的浓度最低;而Ig M随核苷酸添加量的增多呈显著的三次曲线变化(P<0.05),其中核苷酸添加量为0.5 g/kg时Ig M的浓度最低。当核苷酸添加量增加时,细胞内肿瘤坏死因子α(TNFα)呈线性递减趋势(P=0.093),而DNA氧化损伤的标志8-羟基-脱氧鸟苷(8-OHd G)随核苷酸添加量的增多表现为二次曲线变化趋势(P=0.064),且核苷酸添加量为0.5 g/kg时8-OHd G含量最低,即DNA损伤程度最小。仔猪从阶段1过渡到阶段2后的第1天(即试验第8天),0.5 g/kg核苷酸组仔猪腹泻指数最低(P=0.072)。总体来说,1.0 g/kg核苷酸添加量对于保育仔猪的生长性能是最有利的;而0.5 g/kg的核苷酸添加量降低了免疫反应和氧化应激。总之,富含5’IMP的核苷酸添加剂可能有助于提高仔猪的生长性能和降低断奶后应激。     

同时测定鸡汁中谷氨酸钠和呈味核苷酸研究

建立了同时测定鸡汁中谷氨酸钠和呈味核苷酸的紫外光谱法。根据吸光度的加和性原理,通过联立方程求解,测定鸡汁中的谷氨酸钠和呈味核苷酸(I+G)含量。测定的鸡汁中谷氨酸钠平均含量分别为11.99%、13.69%和14.38%,相对标准偏差(RSD)分别为2.50%、4.57%和3.79%,加标回收率在94.15%~105.27%之间,平均值为99.59%,回收率RSD为3.79%。呈味核苷酸(I+G)平均含量分别为0.94%、1.19%和1.33%,RSD分别为1.02%、0.98%、1.27%,加标回收率在94.12%~104.16%之间,平均值为100.71%;回收率RSD为3.21%。UV方法方便快捷,准确可靠,能够测定鸡汁中的谷氨酸钠和I+G的含量。     

鹅细小病毒VP1与VP3非重叠序列的克隆与原核表达

根据鹅细小病毒GPVH1株基因组核苷酸序列设计了一对引物，对其结构蛋白VP1与VP3非重叠核苷酸序列进行PCR扩增，并克隆到表达性载体pGEX-6p-1，经酶切鉴定筛选出阳性克隆，并转化到大肠杆菌BL21(ED3)plysS进行原核表达，并用SDS—PAGE鉴定，结果表明融合蛋白在表达性细菌BL21中重获得了高效表达。     

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株S1基因的克隆与序列测定

根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列设计了一对引物，通过：RT-PCR特异性扩增出IBV H120疫苗株的S1基因，产物大小为1．62kb，与设计相符。同源性比较结果显示，H120株与H52、M41和BEAU株的S1基因核苷酸序列的同源性分别为97．1％、96．9％和96．8％，表明IBV H120疫苗株与标准毒株的S1基因具有高度的同源性。     

鹅和番鸭细小病毒全基因克隆与序列分析

本研究采用PCR技术扩增了鹅和番鸭全长细小病毒基因;其中鹅和番鸭细小病毒非结构蛋白基因（NS）全长为1884bp,编码627个氨基酸;结构基因（VP）全长为2199bp,编码732个氨基酸;序列分析表明：鹅和番鸭细小病毒NS之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为80．9％～82．9％和89．5％～91．2％,而相应的鹅细小病毒之间的同源性为93．7％～99.8％和96．8％～99．7％,番鸭细小病毒之间的同源性为98．8％～99.8％和98.6％～99．5％;在核苷酸和氨基酸水平上,鹅和番鸭细小病毒VPI之间的同源性分别为79．7％～88．7％和85．5％～93．3％,而相应的鹅细小病毒之间的同源性为88．8％～99．6％和91．5％～99.2％,番鸭细小病毒之间的同源性为98．1％～99．6％和97．1％～98．8％;番鸭和鹅细小病毒NS和vp1基因的系统进化树分析表明：番鸭和鹅呼细小病毒来自共同的祖先,但随着宿主的不同而演化为不同的分支。     

山羊痘病毒ITR基因片段的克隆与序列分析

应用PCR方法扩增山羊痘病毒QL、LD、Y和B株ITR基因片段,插入pMD18-T载体,转化DH5α感受态细胞,提取重组载体经PCR和酶切鉴定后测序,并与GenBank上8株羊痘病毒相应序列进行同源性分析。结果经PCR扩增,4株病毒均可得到一条均一的DNA片段,该片段可被内切酶AluⅠ特异酶切,而且该PCR的DNA模板最小检出量为24.40pg。经测序,该基因片段长度为289bp;序列比较发现,4株病毒ITR片段与GenBank上2株山羊痘病毒的核苷酸与氨基酸序列同源性均为100%,与3株绵羊痘病毒分别为98.2%和96.5%,与3株牛疙瘩皮肤病病毒为98.2%～99.3%和96.5%～97.7%。这表明ITR基因片段在羊痘病毒属中较为保守,可以针对ITR基因建立羊痘病毒的PCR检测方法。     

牛分枝杆菌遗传学研究进展

一、牛分枝杆菌基因组 牛分枝杆菌AF2212/97分离自肺部和支气管纵隔淋巴结发生干酪样病变的母牛,具有完全的毒力.该菌株基因组全长为4345492bp,分布于一单环染色体中,平均G C含量为65.63%.基因组包含3952个编码蛋白基因--包括一个前噬菌体和42个插入单位(IS).在核苷酸水平上,牛分枝杆菌与结核分枝杆菌基因组相比,其同源性大干99.95%,表现出共线性,没有广泛的置换、复制或倒置现象.     

专利文摘

一种用于减轻农药对植物药害的制剂；N-取代羧甲基壳聚糖及其制备方法；编码果蝇乙酰胆碱酯酶的核苷酸基因序列。[编者按]     

基因芯片用于病原微生物的检测和分型

1用于病原微生物检测和分型的基因芯片种类 1．1寡聚核苷酸检测芯片寡聚核苷芯片是报道最多的一种检测芯片。它是先从GenBank等核酸数据库中获得用于制作芯片的相关病原基因，然后用生物软件在病原科、属、种和型的保守基因区内设计出寡核苷酸探针，用于病原微生物科、属、种和型的鉴定；在各种微生物特有基因区内设计出鉴别探针，用于不同微生物的鉴别；在不同型的病原变异区内设计型和亚型鉴别探针，用于病原型和亚型的鉴定。将设计的探针在核酸数据库进行同源性比较，