猪附红细胞体16S rRNA基因的序列测定和系统进化分析

从确诊为猪附红细胞体感染的猪场，无菌采集血样，抽提猪附红细胞体基因组DNA，采用真细菌的通用引物进行16S rRNA基因扩增，对扩增产物进行克隆和测序。从3个地理位置不同的猪场均成功地扩增出长度为1469bp的核苷酸序列。系统进化分析表明，3个猪场样品所测序列一致性达99．52％以上，具有相同的基因型，但与国外报道的猪附红细胞体Illinois株同源性为95％，属于同一基因群，但基因型不同；所有种类的附红细胞体和血巴尔通氏体组成同一进化分支，这类血营养菌与支原体科，支原体属的病原最靠近(75％)，而与立克次氏体目的病原较远(70％)。上述研究证实，广东所流行的猪附红细胞体是一种新基因型的猪附红细胞体，建议命名为猪附红细胞体广东株型；为反映进化关系，猪附红细胞体和其它血营养菌应划归于支原体科的支原体属。     

近两年我国猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查

猪圆环病毒（PCV）发现于1982年,属于圆环病毒科、圆环病毒属,是已知最小的动物病毒之一。根据猪圆环病毒的致病性、抗原性及核苷酸序列,将其分为PCV1和PCV2两个型,其中PCV1无致病性,而PCV2被认为是新生乳猪先天性颤抖的病原,     

我国部分地区鸡贫血病病毒全基因组核苷酸序列的比较与分析

本研究测定了3个鸡贫血病病毒（Chinken anemia virus,CAV）国内分离株及12个直接来源于临床样品的CAV毒株全基因组序列,结果表明15个CAV毒株的全基因组长度和结构与已报道的其它CAV毒株一致,长度均为2298nt,包含有3个重叠的ORFs。与GenBank发表的13个毒株序列进行序列比较发现,所有毒株核苷酸序列的相似性在95．2％～99．5％之间,CAV全基因组序列有2个高度变异区（HVR）,分别位于1033nt～1470nt和1858nt～2193nt。CAVORF3变异度最高,其5’端2／5处和3’端2／5～1／5处为2个高度变异区。ORF2变异度也较高,主要出现在5’端1／4处,ORFI最为保守。以CAV全基因组核苷酸序列和ORF3核苷酸序列为基础分别构建的CAV毒株分子进化树,均可以将全部CAV毒株划分为2个基因群。我国部分地区分离的大多数毒株,属基因Ⅰ群,与德国Cux-1等主要流行毒株有较为相近的亲缘关系;其它CAV国内毒株,属基因Ⅱ群,与日本G6株和TR20株有着更为相近的关系。     

核苷酸在苏氏芒鲶配合饲料中的应用效果

核苷酸作为一种无毒无害无残留的新型饲料添加剂,在动物营养方面具有很大的发展前途。本次实验在研究了核苷酸对苏氏芒鲶的诱食活性的基础上,将具有良好诱食活性的核苷酸添加到配合饲料中,研究其对芒鲶生长的影响,结果用SPSS软件进行统计分析。通过8周的养殖实验发现,摄食添加尿苷酸(UMP)的饲料的芒鲶特殊生长速率、增重率明显高于添加鸟苷酸(GMP)组和对照组(p<0.05);摄食添加尿苷酸组的芒鲶的饲料系数、蛋白质效率与对照组有显著的差异(p<0.05),而与添加鸟苷酸组差异不显著。从而为苏氏芒鲶的高效全价配合饲料的研制提供了实验依据。     

寡聚脱氧核苷酸对鸡免疫增强作用的研究进展

新型免疫佐剂CpG寡聚脱氧核苷酸(CpGODN)的发现源于人类对癌症治疗的探究。早在19世纪九十年代,人们就观察到注射全菌制剂的癌症病人的肿瘤可以显著消除。最初认为脂多糖是细菌制剂中的活性成份,随后对结核分枝杆菌的研究证     

马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒和驴强毒全基因核苷酸序列测定

本项研究以马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒感染细胞总ＤＮＡ和驴强毒感染驴外周血病毒ＲＮＡ为起始材料,应用ＰＣＲ和ＲＴＰＣＲ的方法,分段扩增出马传贫弱毒疫苗毒前病毒和驴强毒各基因,并将各基因克隆后进行测序。根据与国外发表的马传贫病毒核苷酸序列比较,推导出马传贫疫苗毒和马传贫驴强毒全基因组核苷酸序列。     

猪链球菌2型分泌性核酸酶A(SsnA)活性检测及其基因序列的克隆与测序分析

对8株猪链球菌2型重庆分离株的核酸酶A全基因进行克隆测序,结果表明该基因长度为3 126 bp,与Gen-Bank发表的唯一的该基因的序列相比,核苷酸同源性高于98%,推导的氨基酸同源性高于94%。根据核酸酶A基因的测序结果建立扩增片段长度为301 bp的PCR检测方法,并用甲苯胺蓝DNA酶琼脂对猪链球菌分泌性核酸酶A的活性进行检测。检测了从病猪内脏分离的猪链球菌致病株35株,33株核酸酶A基因PCR检测阳性(阳性比例为94.3%),其中有24株分泌活性检测为阳性(阳性比例68.6%);正常猪扁桃体分离株14株,PCR检测为阳性的10株(阳性比例71.4%),其中有核酸酶A分泌活性为8株(阳性比例57.1%),检测菌株中有2型猪链球菌44株,38株扩增出核酸酶A基因的片段PCR检测阳性并且分泌活性为阳性的有32株,猪链球菌1型、7型、9型、13型、1/2型各1株,均能扩增出核酸酶A基因的片段,但只有13型猪链球菌有核酸酶A分泌活性。对猪链球菌在不同生长时期核酸酶活性的检测显示,猪链球菌在培养4、8、16、32、48 h均有核酸酶A的分泌,并且C a2 和M g2 为分泌性核酸酶A的活性必需因子。     

苹果锈果类病毒辽宁分离物的克隆与序列分析

 类病毒是迄今为止发现的最小病原物,是一类单链共价闭合环状的裸露RNA分子,由246~401个核苷酸组成,具有自我复制能力,是感染某些高等植物的低分子致病性因子。目前已确定的果树类病毒有18种,分属于马铃薯纺锤块茎类病毒科(Pospiviroidae)和鳄梨日斑类病毒科(Avsunviroidae)。     

喷施核苷酸有机营养剂改进Peng柑果实品质的效果

柑在湖南发展速度较快 ,面积不断扩大 ,产量不断提高 ,但品质下降 ,与广东、广西及福建同时期相比 ,湖南柑风味较差。其原因是 10月中旬以后气温下降快 ,有效积温值低 ,不利于糖分的积累和减酸。本试验采用有机营养剂核苷酸系列产品 ,对柑分次喷施 ,以期改善柑果实的外观和内质。1　材料与方法1 1　试验材料　试验采用的核苷酸系列有机营养剂有花果核能、核苷酸钾、光合素和特丁基核苷酸 4种 ,均由岭南荔枝、龙眼保健中心与长沙树泰科技发展公司合作生产。 1999年在湖南农业大学果树示范场和湖南环境生物学院果园两个试区进行 ,株行…     

次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)基因在猪链球菌不同血清型中的分布

参照GenBank上已发表的次黄嘌呤核甘酸脱氢酶（IMPDH）基因序列,设计引物,对34个猪链球菌不同血清型（缺12型）国际标准株进行了IMPDH基因的PCR检测及序列分析。结果表明：除17型、24型、32型、33型和34型外,其他29个血清型都为阳性,其核苷酸序列的同源性为88．3％～100．0％,所推导的蛋白质序列的同源性为94．7％～100．0％。为进一步研究IMPDH的生物学特性和功能奠定了基础。