全文获取类型
收费全文 | 401篇 |
免费 | 9篇 |
国内免费 | 37篇 |
专业分类
林业 | 2篇 |
农学 | 9篇 |
14篇 | |
综合类 | 154篇 |
农作物 | 14篇 |
水产渔业 | 20篇 |
畜牧兽医 | 156篇 |
园艺 | 19篇 |
植物保护 | 59篇 |
出版年
2024年 | 2篇 |
2023年 | 3篇 |
2022年 | 7篇 |
2021年 | 6篇 |
2020年 | 6篇 |
2019年 | 5篇 |
2018年 | 5篇 |
2017年 | 9篇 |
2016年 | 7篇 |
2015年 | 18篇 |
2014年 | 24篇 |
2013年 | 17篇 |
2012年 | 28篇 |
2011年 | 30篇 |
2010年 | 31篇 |
2009年 | 24篇 |
2008年 | 30篇 |
2007年 | 16篇 |
2006年 | 19篇 |
2005年 | 15篇 |
2004年 | 13篇 |
2003年 | 11篇 |
2002年 | 10篇 |
2001年 | 8篇 |
2000年 | 6篇 |
1999年 | 11篇 |
1998年 | 16篇 |
1997年 | 11篇 |
1996年 | 13篇 |
1995年 | 2篇 |
1994年 | 7篇 |
1993年 | 3篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 5篇 |
1990年 | 12篇 |
1989年 | 8篇 |
1988年 | 3篇 |
1986年 | 3篇 |
1983年 | 1篇 |
排序方式: 共有447条查询结果,搜索用时 0 毫秒
11.
根据GenBank中已发表的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)HuN4株全基因组序列,设计合成一对引物,对PRRSV HuN4株非结构蛋白Nsp4(Nonstructural protein 4基因进行RT-PCR扩增,克隆到原核表达载体pET30a(+)中,构建重组表达载体pET30a-Nsp4,经酶切测序鉴定。将pET30a-Nsp4转化表达菌株BL21(DE3),诱导可表达分子量约为27kDa重组蛋白。Westernblot显示其具有较好的反应原性,经镍离子亲和层析(Ni-NTA)纯化获得了高纯度的可溶性重组蛋白。将纯化的Nsp4蛋白免疫BALB/c小鼠,抗血清ELISA效价达1:16000,Western blot和IFA表明,所制备的抗血清能够特异性识别PRRSV自身表达的Nsp4蛋白。本研究获得了可溶性的PRRSV Nsp4蛋白,制备了Nsp4特异性多抗血清,为进一步研究Nsp4蛋白的亚细胞定位及功能奠定了基础。 相似文献
12.
目的:观察大鼠脊髓P物质对细胞免疫水平的影响,方法:两组新生大鼠分别皮下注射辣椒素(CAP)和P物质抗血清,成年大鼠则于脊髓蛛网膜下腔注射,用丝裂原激活的大鼠脾细胞方法测定了淋巴细胞的白细胞介素-2(IL-2)水平。结果:大鼠皮下及脊髓蛛网膜下腔各分别注射CAP,P物质抗血清后,IL-2的水平较对照组显著升高(P〈0.01)。结论:新生大鼠(皮下)与成年大鼠(蛛网膜下腔)注射CAP或P物质抗血清垃 相似文献
13.
14.
H-Y抗血清的制备及检测研究 总被引:1,自引:0,他引:1
选用8 ~12 周龄纯系的 B A L B/ C 母鼠, 用同日龄的 B A L B/ C 公鼠采取皮肤移植和脾细胞注射2 种方式免疫, 制备 H Y 抗血清, 经精子微量细胞毒性试验, 筛选抗血清。皮肤移植5 只小鼠中只有1 只产生较好的抗血清, 脾细胞注射的4 只小鼠都能产生较好的抗血清, 产生抗血清的小鼠占55 % 。抗血清与昆明鼠正常8cell 早期桑椹胚培养5 ~6 、18 和24 h 后, 退化率达433 % , 经 X2 检验差异不显著( P > 005) , 符合自然性比例。 相似文献
15.
用网状内皮组织增生症病毒(REV)HA9901株免疫SPF鸡,无菌采血制备鸡抗REV血清。通过ELISA、IFA、AGP、HI等方法对制备的血清进行检测,未检出禽类常见的其他17种(或亚型)病毒的抗体,该血清具有良好的特异性。通过测定,该血清用于间接免疫荧光试验(IFA)的效价为1:2000,用于IFA检测REV的染色效果与REV单抗(11818和11854的混合物)相当。试验结果表明,该批血清1000倍稀释可作为一抗,用于REV的间接免疫荧光检测。 相似文献
16.
利用已经制备的大豆疫霉菌的抗血清,对大豆疫霉菌的纯培养和大豆病组织进行检测。结果表明,间接法(I-ELISA)和夹心法(DAS-ELSIA)能较好地检测纯培养的大豆疫霉菌,但在检测病组织时,夹心EISA的特异性较强,能够可靠地检测到大豆病组织内的病原菌。 相似文献
17.
从木本植物分离的苹果褪绿叶斑病毒(applechloroticleafspotvirus,Trichovirus组)的PBM1毒株能引起李品种“Hauszwetshe”的假痘病,将其繁殖在昆诺藜(Chenopodiumquinoa)上。感染PBM1毒株的昆诺藜叶组织用两次蔗糖梯度离心提纯。每100g叶组织的病毒产量平均为1.68mg。在电镜下可观察到弯曲状病毒颗粒上的螺纹结构。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,病毒外壳蛋白的分子量为21.5kDa。用提纯的病毒免疫家兔制备的抗血清和ELISA法,对感染PBM1的昆诺藜叶片和桃花进行了灵敏的检测。 相似文献
18.
为明确近年来在浙江省葫芦科作物上发生的黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)基因组特征及其发生分布情况,从浙江省及上海地区的甜瓜、西瓜和瓠瓜上采集疑似样品进行RT-PCR鉴定,通过分段扩增测序的方法拼接获得基因组全序列并进行系统进化分析,利用特异性引物扩增获得CGMMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列,制备CGMMV CP抗血清进行Western-blot和Dot-ELISA检测。结果显示,来自甜瓜、西瓜和瓠瓜的3个CGMMV分离物基因组全序列均具有烟草花叶病毒属典型基因组结构特征,全部由6 423 nt构成;3个全序列间的核苷酸同源性高达99.11%~99.67%,编码的CP氨基酸同源性为100%。系统进化分析发现,CGMMV不同分离物形成2个进化相关群体,3个浙江的CGMMV分离物均位于第I组内,与已报道的中国CGMMV分离物和韩国CGMMV分离物亲缘性较高。Western-blot检测表明CGMMV CP抗血清可以与感病植株中的病毒发生特异性反应,可用于CGMMV鉴定;Dot-ELISA检测发现CGMMV在浙江省和上海市的葫芦科作物上普遍存在。 相似文献
19.
将36头5周龄的断奶上海大白猪随机分成6组.对照组C1和C2、皮下免疫试验组S1和S2、腹腔免疫试验组A1和A2,每组6头猪.试验周期为11周和17周.试验组A1和A2腹腔注射5.0 ml/kg BW山羊抗猪脂肪细胞膜抗血清,试验组S1和S2皮下注射5.0 ml/kg BW山羊抗猪脂肪细胞膜抗血清,对照组C1和C2以相同剂量注射正常山羊血清.11周末和17周末屠宰结果显示:①各试验组猪板油重和背膘厚都显著低于对照组(P<0.05);11周末,与对照组相比,试验组S1和A1中猪眼肌面积均显著升高;17周末,腹腔免疫组猪眼肌面积显著高于对照组(P<0.05).②11周末,腹腔免疫组猪半腱肌和里脊、皮下免疫组猪背最长肌和里脊中脂肪含量均明显低于对照组(P<0.05);17周末,与对照组相比,腹腔免疫组猪半腱肌中脂肪含量显著下降(P<0.05).③11周末,腹腔免疫组猪背最长肌和里脊中蛋白质含量显著高于对照组(P<0.05);17周末,各试验组背最长肌和里脊中蛋白质含量与腹腔免疫组半腱肌中蛋白质含量均显著高于对照组(P<0.05).表明,山羊抗猪脂肪细胞膜被动免疫具有较好改善猪胴体品质和肉品质的作用. 相似文献
20.
[目的]克隆小鼠激活素受体相互作用蛋白2(ARIP2)cDNA序列,利用大肠杆菌表达ARIP2,制备兔抗小鼠ARIP2的多克隆抗血清。[方法]采用RT-PER方法,将小鼠ARIP2基因克隆到pET-32a(+)质粒,构建ARIP2原核表达载体并转化到大肠杆菌,IgrG诱导融合蛋白的表达,经亲和层析纯化获得可溶性重组蛋白,免疫家兔后制备ARIP2抗血清,分别采用ELISA,Western blot检测抗体效价和特异性。[结果]测序结果表明重组质粒pET32a(+)-ARIP2构建成功;SDS-PAGE分析表明获得的重组蛋白为可溶蛋白;经过亲和层析后得到有效分离;Elisa法测定的抗血清效价为1:50000;Westernblot鉴定结果表明抗血清能与目的蛋白特异性结合。[结论]成功将ARIP2进行了原核表达并制备了高效价、高特异性的兔抗小鼠ARIP2抗血清,为进一步研究ARIP2功能提供了有力工具。 相似文献