尼罗罗非鱼Foxp1a/b的cDNA克隆及表达模式研究

为探讨低等脊椎动物Foxp1与免疫细胞活化及机体雌激素水平的相关性,本研究首次分离克隆了尼罗罗非鱼 (Oreochromis niloticus) Foxp1的开放阅读框序列,并通过real-time PCR对其mRNA表达水平进行检测。结果显示,尼罗罗非鱼具有两种不同基因编码的Foxp1分子,分别命名为OnFoxp1a与OnFoxp1b;OnFoxp1a为1710 bp,由15个外显子编码569个氨基酸,OnFoxp1b为2040 bp,由16个外显子编码679个氨基酸;OnFoxp1a/b均含有Foxp亚家族的特征性结构,即锌指结构、亮氨酸拉链样结构和叉状螺旋结构;与OnFoxp1a相比,OnFoxp1b与高等脊椎动物Foxp1具有更近的亲缘关系。Real-time PCR检测结果显示,OnFoxp1a/b几乎在所有组织中均有表达,OnFoxp1a在精巢中有高水平表达, OnFoxp1b在心脏中有高水平表达,同时OnFoxp1b在免疫相关组织如鳃、脾脏、肾脏、肠等均有中等水平表达;淋巴细胞多克隆刺激剂PHA、PMA、LPS刺激尼罗罗非鱼外周血单个核细胞（PBMC）,结果显示,50 μg/mL PHA和50 ng/mL PMA分别刺激6、12、24 h均显著增强OnFoxp1b的表达 (p＜0.05),20 μg/mL LPS刺激后,OnFoxp1b的表达出现先降低后升高的趋势 (p＜0.05);而OnFoxp1a的表达除50 μg/mL PHA 刺激24 h后有所升高,其余均无显著变化;雌激素处理6月龄雄性尼罗罗非鱼48 h,OnFoxp1a/b在肠、肾脏中的表达显著上调 (p＜0.05),而脾脏中无显著变化 (p>0.05)。综上所述,低等脊椎动物硬骨鱼类两种不同基因编码的Foxp1a/b均为哺乳动物Foxp1的同源分子,但其序列、结构特征、表达模式迥异,提示其功能发生歧化;同时两者的表达与淋巴细胞活化及机体雌激素水平密切相关。     

尼罗罗非鱼鱼皮胶原蛋白及其美拉德反应产物成分分析

利用氨基酸自动分析仪及气-质联用仪对尼罗罗非鱼鱼皮胶原蛋白进行了分析。结果表明,甘氨酸占氨基酸总量的30．48％,脯氨酸和羟脯氨酸（Hyp）的含量也较高,为胶原蛋白特有氨基酸。此外还鉴定出15种风味成分,主要化学成分为5－甲基呋喃醛、5－甲基－2－呋喃甲、1－甲基－4－（1－甲乙基）－1,4－环己二烯等。     

尼罗罗非鱼(♀)×萨罗罗非鱼(♂)杂交F_2与F_3群体遗传特征的微卫星分析

利用罗非鱼第二代遗传连锁图谱中微卫星标记对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)(♀)×萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron)(♂)杂交后代F_2、F_3群体遗传特征进行了初步比较分析。结果显示,28对引物中有22对引物能有效扩增,未观察到杂交后代F_2、F_3中有多倍体个体现象。筛选出7个在尼萨罗非鱼杂交后代F_2、F_3群体中存在差异的位点。杂交F_2群体平均等位基因(Na)为2.71,平均多态信息含量(PIC)为0.466,平均观测杂合度(Ho)为0.632;杂交F_3群体平均Na为2.14,平均PIC为0.370,平均Ho为0.432,杂交F_3遗传杂合性较杂交F_2降低。F_2自繁F_3过程中,F_3群体4个位点的等位基因与F_2完全相同,3个位点的等位基因少于F_2,且F_3群体在2个位点出现完全纯合,杂交F_3群体位点等位基因呈现纯合趋势。研究结果为尼萨罗非鱼杂交世代遗传变异与杂交利用积累基础资料。     

耕水机在罗非鱼精养池塘的应用效果分析

选择两组罗非鱼(Tilapia)精养池塘作为研究对象,通过设置实验塘和对照塘的方法,研究耕水机的使用对精养池塘水质变化情况和养殖效果的影响.结果表明:与对照池塘相比,实验池塘的水质稳定,池水化学耗氧量的平均值降低了1.56 mg/L,总悬浮物的平均含量下降了24.3028 mg/L,总氨氮的平均浓度下降了0.2418 ...     

不同方法灭活的痢疾志贺氏杆菌菌苗对罗非鱼免疫原性的影响

用福尔马林、苯酚以及热灭活的痢疾志贺氏杆菌作为免疫原,分别接种尼罗罗非鱼后,通过测定受免鱼的血清凝集抗体效价、溶菌酶活性、补体C3、C4以及血液白细胞的吞噬活性,用痢疾志贺氏杆菌活菌攻毒的方法,探讨3种不同方法制备的免疫原对罗非鱼免疫原性的试验结果,结果表明,3种不同方法的免疫原对罗非鱼均具有较强的免疫原性,受免鱼的血液凝集抗体效价;与对照鱼相比,白细胞的吞噬活性明显上升,受免鱼对痢疾志贺氏杆菌活菌攻毒均产生了较强的免疫保护力.     

吉富罗非鱼生长过程中氮收支变化的研究

为充实有关鱼类研究数据,提供实际生产理论依据,研究了吉富品系尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）从鱼种（18 g）生长至成鱼（180 g）过程中氮收支变化。试验为期73 d,每日饱食投喂并收集鱼粪,溶解氧质量浓度为8.0-6.0 mg·L-1,pH为 7.5-6.5,水温为24-30 ℃。在鱼均质量达到50 g、100 g和180 g时测定并计算当前生长阶段氮收支。结果表明,生长氮比例在养殖初期最高（64%）,养殖中期最低（47%）;粪氮比例在养殖中期最高（9%）,养殖初期和末期分别为5%和4%;排泄氮比例随鱼的生长而逐渐增加。此外,试验期间水中总氮增加速度在养殖中期减慢,养殖末期再次加快。     

四种罗非鱼挥发性成份的GC-MS分析

为了研究四种罗非鱼挥发性成份的化学成分,采用水蒸气蒸馏法提取罗非鱼挥发性成份,用气相色谱-质谱联用仪对其进行分离测定,结合计算机检索对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果共鉴定出45种物质:奥利亚和奥尼各26种,尼罗24种,吉富18种。其中,有7种化合物为4种罗非鱼的挥发性成份所共有。2,4-二叔丁基苯酚在挥发性组份中的含量最高(奥利亚38.44%;尼罗37.34%;吉富35.21%;奥尼除外,占14.10%)。在挥发性成份中酯类、醇类、烯烃和有机酸类居多,分别有10种、6种、5种和4种,其中大部分为有特殊香味的挥发性物质,且该类物质在奥利亚、尼罗和奥尼三种罗非鱼中含量较多,在吉富中含量较少。奥尼罗非鱼中还检测出大量的特殊的挥发性物质L-抗坏血酸棕榈酸酯,其含量高达33.64%。     

罗非鱼活性肽分离及抗氧化能力研究

利用正交试验L9(34),以清除超氧自由基能力为指标,分别对木瓜蛋白酶、中性蛋白酶水解罗非鱼肉的水解条件进行优化,并对最佳清除率下的两种酶解物进行Sephadex G-50凝胶柱分离,检测了各组分对超氧自由基清除率及活性肽分子量分布情况.结果表明:中性蛋白酶在45 ℃、酶的质量分数2.0%、水解105 min及肉水比1∶3的水解条件下对超氧自由基有较好清除作用;木瓜蛋白酶在60 ℃、酶的质量分数2.0%、时间150 min及肉水比1∶2的水解条件下对超氧自由基有较好清除效果.木瓜蛋白酶酶解物在分子量为660 Da的多肽洗脱峰具有最大超氧自由基清除率,中性蛋白酶酶产物在分子量为1320 Da多肽洗脱峰具有最大超氧自由基清除率.     

ZY异配型超雄罗非鱼的人工产生

罗非鱼 (Ｏｒｅｏｃｈｒｏｍｉｓｓｐｐ )的雄鱼比雌鱼长得快、长得大 (叶冀雄 ,1983) [1] 。有两种方法可生产全雄或超雄罗非鱼用作商品鱼 :其一是激素法(马仲波 ,1984 ;胡逸农等 ,1979) [2 ,3] ,在鱼苗开始吃食时人工哺拌有甲基睾丸酮的饲料以促使雌鱼雄性化 ,但是对人体和生态环境的影响受到质疑 ;另一种是通过杂交法产生 (江山 ,1984 ) [4 ] ,如奥利亚雄鱼 (性染色体组成是ＺＺ)与尼罗罗非鱼雌鱼 (性染色体组成是ＸＸ)杂交 ,由于染色体Ｚ的雄性性别决定基因强于Ｘ染色体上的雌性基因 ,所以其子代鱼应该全是ＺＸ型雄鱼 ,但如果其它染色体…     

饲料中添加醋酸镁、硫酸镁饲养罗非鱼试验

镁是鱼类所必需的一种矿物元素 ,在体内参与骨、齿、鳞的构成 ,是细胞膜的重要组成成分 ;镁作为多种酶的辅基和激活剂 ,如磷酸化酶、磷酸转移酶、脱羧酶等的辅酶 ,在机体代谢过程中发挥着重要作用。常用饲料原料均含有丰富的镁 ,但多以植酸盐 (植物性原料 )或磷酸盐、碳酸盐 (动物性原料 )形式存在 ,对于鱼类而言 ,均难以利用。可考虑另外添加镁盐。本次试验通过在饲料中添加醋酸镁、硫酸镁 ,考查不同镁盐对罗非鱼生长的影响 ,为罗非鱼矿物质添加剂的研究开发提供试验依据。1　材料与方法1 1　试验设计与试验饲料在基础饲料 (对照组 )中分别…