非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

为了研究检测非洲猪瘟病毒的方法,试验采用GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)P72基因序列设计了1对特异性引物和探针,并使用含有选定检测序列的重组质粒标准品绘制标准曲线,建立了非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法.结果表明:该方法的敏感性可达100个拷贝值,具有良好的敏感性和重复性.     

茶树小分子量热激蛋白基因CsHSP17.2的克隆与表达分析

[目的]进一步了解茶树小分子量热激蛋白基因CsHSP17.2在逆境胁迫条件下的分子生物学功能.[方法]利用RT-PCR技术从茶树‘迎霜’中克隆得到CsHSP1 7.2基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码蛋白,通过Real-timePCR分析其表达模式.[结果]该基因开放阅读框长度为453 bp,编码150个氨基酸,蛋白质相对分子质量为17.2×10a,理论等电点5.56;无信号肽位点,属于非分泌型蛋白;被定位于细胞质中.系统发育树分析表明,茶树CsHSP1 7.2与水稻(GenBank登录号:P27777)和花生(ABC41131)的进化关系较近,属于小分子量热激蛋白基因家族第Ⅰ亚族.qRT-PCR分析发现,茶树CsHSP17.2属于组成型基因;高温(38℃)处理1h能显著提高CsHSP17.2 mRNA的相对表达量(P＜0.05);干旱(100 g·L-1 PEG 6000)、高盐(200 mmol· L-1 NaCl)和外源脱落酸(200 mg· L-1 ABA)处理条件下,该基因的转录水平均出现不同程度的上调.[结论]克隆得到茶树‘迎霜’小分子量热激蛋白基因CsHSP17.2,其在花中表达量最高,且响应高温、干旱、高盐和外源脱落酸胁迫.     

血管内皮细胞生长因子在鸡马立克病肝脏肿瘤中的表达

为研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)在鸡马立克病肝脏肿瘤中的表达,探索其在马立克病(MD)肿瘤形成中的作用与机制。采用实时荧光定量PCR技术、Western blot技术,检测MD病毒组鸡肝脏肿瘤及正常组鸡肝脏中VEGF mRNA和蛋白质的表达。结果表明,MD病毒组鸡肝脏VEGF的mRNA和蛋白表达水平极显著高于正常组(P<0.01)。表明VEGF参与了MD肿瘤的形成。     

MicroRNA-193a-3p在前列腺癌患者癌组织和血液中的表达

目的 观察微小RNA(microRNA)-193a-3p在前列腺癌患者癌组织及血清中表达.方法 采用实时荧光定量PCR检测32例前列腺癌患者血清、癌组织、癌旁组织及20例健康人血清中microRNA-193a-3p表达.结果 前列腺癌患者血清中microRNA-193a-3p表达明显低于正常对照[(0.58±0.11) vs (1.06±0.14),P＜0.05],且癌组织中microRNA-193a-3p表达明显低于癌旁组织[(0.35±0.07) vs (1.03±0.13),P＜0.01].结论 microRNA-193a-3p可能是前列腺癌的潜在抑制因子.     

miR-378在牛不同组织中的表达规律及功能分析

为探索miR-378在牛不同组织中表达量差异及其靶基因的调控功能,通过实时荧光定量PCR验证其在牛不同组织中的表达规律,同时将实时PCR中获得的数据用Realplex软件进行基因相对表达差异分析。在牛不同组织中,miR-378表达量在大脑和小肠中的表达量约为肝脏的3倍和4.5倍,而在脾脏中的表达量约为肝脏的8倍。从miR-378的表达规律可以推测其对牛大脑、小肠、脾脏功能及代谢有一定调节作用。应用生物信息学分析miR-378候选靶基因及其功能,并应用双荧光素酶报告验证SLC26A9为miR-378靶基因,证明miR-378可能通过靶向调控其靶基因而发挥作用。     

基于机器视觉传感器技术的玉米深松机械控制系统研究

GPS导航技术在农业机械生产中应用较为广泛，但是GPS抗干扰性能差，智能化水平低。该文旨在开发一种融合先进算法与视觉定位传感器的玉米深松机械控制系统，提出一种机器视觉和GPS数据融合算法，并搭建玉米深松机控制平台。田间试验结果表明，该系统能够有效地提高玉米生产效率和质量，具有较高的实用价值和应用前景。     

大丽花DpXTH1和DpXTH2基因的组织特异性表达分析（英文）

[目的]探讨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶在大丽花生长发育过程中的功能及作用机制。[方法]以β-actin为内参基因,应用Real-time RT-PCR技术,分析了Dp XTH1和Dp XTH2基因在大丽花根、茎、叶、花中的相对转录水平。[结果]Dp XTH1和Dp XTH2在根中均不表达,在茎和叶片中表达丰度较低,在花瓣中高丰度表达。[结论]大丽花Dp XTH1和Dp XTH2为花瓣组织特异性基因,与花瓣细胞的生长发育密切相关。     

柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法的建立及应用

以柑橘溃疡病菌特异性高的假定蛋白基因（登录号：AE008923.1）为靶标，设计并筛选4条引物来特异性识别靶标序列中的6个独立区域，建立柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法。该方法利用实时浊度仪检测反应过程中产生的焦磷酸镁白色沉淀，实现对LAMP整个反应过程的实时监控。从镁离子浓度、甜菜碱浓度、dNTPs浓度、引物浓度和反应温度5个变量参数对 LAMP检测体系进行优化，并对方法的特异性、灵敏度、稳定性及实际样品检测效果进行评价。结果显示，该体系经优化后稳定性良好，可在66 ℃ 恒温条件下，60 min内完成检测；DNA检测下限可达0.02 ng/μL，灵敏度与荧光定量PCR方法相同，比常规PCR方法高1个数量级；能快速、准确地对田间疑似样品进行检测，与荧光定量PCR方法的检出情况一致，没有漏检。结果说明柑橘溃疡病菌实时浊度LAMP检测方法操作简便、所需时间短，特异性与灵敏度高，为柑橘溃疡病菌的快速筛查提供较好的途径。     

基于NDIS的气象视频会商导播软件的设计

目前的视频导播系统一般由视频处理装置和专用硬件切换矩阵构成,这种导播系统可靠性很差。为了解决此问题,提出了一种基于NDIS的视频软导播系统的设计。该软件系统由内核层网络驱动、应用层的指挥控制界面以及内核层与应用层之间的通信3个主要部分构成。与硬件导播系统相比,软导播系统实现了硬件通用化,布线网络化,该方法已成功应用于车载指挥控制系统中。