捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析

参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物，以H．contortuss ZJ株的总RNA为模板，进行RT—PCR扩增，成功扩增出H11基因。将PCR产物与pUCm—T载体连接后，转化DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆并测序。序列分析表明，其核苷酸序列与国外报道的H11基因的同源性为99．5％。编码氨基酸序列具有氨基肽酶的保守序列，推测可使虫体不能获得所必需的氨基酸而导致死亡。     

用PCR方法对虎DNA进行特异性检测

为了能在野外调查中和野生动物执法检查、打击虎产品走私工作中对发现的可疑虎残余物或虎产品等样品进行快速，准确的鉴定，东北林业大学野生动物资源学院近日建立了可以对虎线粒体ＤＮＡ进行特异性扩增的ＰＣＲ方法。 虎线粒体ＤＮＡ细胞色素Ｂ（Ｃｔｙｂ）段由１１４０个碱基组成，通过用Ｗｄｎａｓｉｓ软件比较１０只苏门达腊虎、１５只东北虎、７只孟加拉虎、３只印支虎及５只华南虎Ｃｔｙｂ的碱荃序列，寻找到它在Ｃｔｙｂ段的保守区域，再与猞猁、雪豹、狮、豹猫、金钱豹、云豹、猎豹及家猫等多种猫科动物和梅花鹿，黑麂、赤鹿、獐、…     

棉花基因组DNA的提取及RAPD反应组成优化探讨

针对棉花富含棉酚、多糖、单宁、蛋白质等干扰物质的特点 ,主要通过快速研磨、加入 PVP、挑DNA、不加 RNA酶等方法 ,摸索出一条方便、快捷、产率高、适合棉花基因组 DNA提取的方法。另外 ,本文还探讨了模板浓度、Mg2 、d NTPs、Taq酶等因素对 PCR的影响 ,得到棉花 RAPD分析最佳PCR反应组成为 :60 ng模板 DNA、1 .2 mmo1·L-1Mg2 、0 .2 mmo1· L-1d NTPs、1单位 Taq酶 ,反应体积为 2 0μl。     

应用竞争PCR定量检测猪IFN—γ mRNA

运用RT—PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ—干扰素(IFN—γ)的部分片段，经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段，将余下的2个较大片段连接，并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物，从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMDl8—T载体，重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定，验证无误后作为竞争性模板内对照，一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR，产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD)，经校正后取上述两者比值的对数值作为Y轴，取已知竞争模板相应浓度的对数值作为X轴，绘制成竞争曲线。应用建立的竞争PCR对不同样品重复试验表明，本方法操作简单，结果可靠，稳定性高，适用于猪IFN—γ mRNA的定量检测。     

迪卡配套系猪RYR1的PCR分析及其利用的研究

试验从鸡东县永安猪场随机抽取迪卡配套系猪B系和E系42头，通过PCR扩增技术和酶切鉴定．采用克隆技术进行测序，来检测是否含有氟烷基因序列。经过以上技术检测这42头猪均没有氟烷基因。     

禽胰多肽对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量影响的研究

本试验旨在研究禽胰多肽(APP)对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量的影响.试验以APP粗提液及层析APP制品为材料,选取90只1周龄艾维菌肉鸡随机分为5组,每组3个重复,每个重复6只鸡.Ⅰ设为对照组,Ⅱ、Ⅲ设为饲饮组,Ⅳ、Ⅴ设为注射组.在第7周末,屠宰取其肝脏、小肠组织,运用SYBR Geen Ⅰ实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对肝脏和小肠中APPR mRNA的表达进行相对定量分析.结果发现:注射组与饲饮组肝脏及小肠中APPR mRNA的表达水平与对照组相比均呈下降趋势,且注射组降低程度大于饲饮组降低程度;其中,注射组与饲饮组中均是层析APP制品比APP粗提液的下降较明显.提示在外加APP情况下可对APPR mRNA的表达呈现抑制作用.本研究结果为进一步探讨APP与其受体之间的关系,从而为阐明其生理功能和作用机制提供一定的理论依据.     

猪无名高热病的防治

前一阶段胶南市发生以体温升高为特征的猪高热病,给该市的生猪生产造成了一定的损失,严重影响了全市养猪业的健康发展.通过对20例临床病例的病料进行PCR检测,蓝耳病阳性率100%(20/20),圆环病毒病阳性率40%(8/20),伪狂犬阳性率40%(8/20),非典型性猪瘟阳性率10%(2/20),附红细胞体阳性率90%(18/20),猪流感及猪传染性胸膜肺炎均为阴性,分离到猪大肠杆菌、葡萄球菌两例.均为混合感染,最少3种,多者5种.现将本市发生猪无名高热病及防治措施综述如下:     

农业部成功研制出猪感染甲型H1N1病毒检测试剂盒

为切实做好生猪疫情防控工作，中国农业部及时组织专家开展联合攻关，5月2日已成功研制出猪感染甲型H1N1病毒RT—PCR检测试剂盒，可在5小时内完成猪感染甲型H1N1病毒快速检测。     

森林保持水土作用的定量观测（Ⅳ）

3 森林的保土作用 森林的保土作用,首先研究以下几个单项保土作用。 3.1 增强土壤抗剪切力的作用 土壤的抗剪切力可以通过对含有树木根系的土层,进行剪切力试验求得。远藤等1969年对含有幼树根系的小土柱进行剪切力试验。其结果是,随着土壤含根量的增加土壤抗剪切力增大。这种抗剪切力增大,是由于树根抗剪切力和树根抵抗从土层中