规模化猪场猪伪狂犬病攻毒及免疫效果监测

伪狂犬病(PR)是由疱疹病毒引起的多种动物共患的急性传染病。在养猪生产中主要引起种猪不育、妊娠母猪流产、产死胎和木乃伊胎，新生仔猪和断奶仔猪大量死亡，肥猪增重减慢、饲料报酬降低等，给养猪业造成巨大的经济损失。目前该病主要通过疫苗接种进行预防，应用的免疫程序为：妊娠母猪产前30天应用猪伪狂犬病灭活苗免疫；疫区仔猪应用猪伪狂犬病基因缺失弱毒疫苗进行超前免疫或20～25日龄免疫。为验证现行的免疫程序特进行免疫效果监测和攻毒保护实验。     

规模化猪场仔猪伪狂犬病和附红细胞体病并发的控制

<正> 2002年9月我区某规模化猪场爆发新生仔猪大量死亡的情况,周边猪场先后也有相同情况发生。经过流行病学调查、临床症状、剖检变化及实验室检查,诊断为猪伪狂犬病并发附红细胞体病。通过采取疫苗紧急预防接种和综合防制措施,取得了较好的效果,现报告如下。     

CpG序列对猪伪狂犬疫苗免疫效果的影响

将CpG DNA同猪伪狂犬疫苗联合免疫接种初生仔猪,检测仔猪的体液及细胞免疫反应,试验结果表明,CpG DNA与猪伪狂犬疫苗共同免疫的仔猪,其特异性抗体滴度、淋巴细胞白介素-2诱生活性以及淋巴细胞增殖反应均显著高于伪狂犬疫苗免疫组和对照组,证明CpG DNA能显著增强仔猪对常规疫苗的细胞和体液免疫反应.     

伪狂犬病根除计划

伪狂犬病是当今危害全球养猪业最严重的猪病，给养猪业造成了巨大的经济损失。西方发达国家大多在90年代相继制定和启动了该病的根除计划，并取得了很好的成效。该病在我国广泛存在并严重发病，损失巨大。“九五”期间我们承担了国家科技部中国生物工程开发中心生物技术攻关项目     

警惕猪的伪狂犬病

近几年，猪伪狂犬病时有发生，有些地方暴发伪狂犬病时，2周龄仔猪的死亡率达到90％以上．母猪产活仔率下降10％以上。伪狂犬病主要危害仔猪，对断奶仔猪的呼吸系统造成伤害，引起猪的呼吸道综合征，严重影响仔猪的生长发育。大猪在感染后大多表现轻微或不表现症状，临床上常造成误诊、误治。     

表达H3N2亚型猪流感病毒HA基因重组伪狂犬病病毒的构建

将SV40启动子控制下的LacZ基因表达盒和CMV启动子控制下的H3N2亚型猪流感病毒（SIV H3N2）的HA基因插入到伪狂犬病病毒（PRV）通用转移载体pBdTK-Uni中，获得转移载体pLTK-HA。将该载体与PRV Bartha-K61株基因组DNA通过脂质体法共转染Vero细胞，经过10代蓝斑筛选、纯化和PCR鉴定获得了一株插入SIV HA基因的重组伪狂犬病病毒，命名为rPRV-HA。Western blotting和间接免疫荧光试验证实HA基因在重组病毒感染的细胞中获得了表达。用不同的细胞（PK-15、IBRS-2、Vero和鸡胚成纤维细胞）对该重组病毒与亲本病毒的增殖滴度和致细胞病变进行比较，未见显著差异，对第30代重组病毒的HA基因进行序列分析，表明该重组病毒遗传性状稳定。     

猪伪狂犬病基因缺失疫苗的制备、安全性、免疫原性、保存期测定及区域试验

为了提供有效的伪狂犬病疫苗，用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株（TK^-/gG^-/LacZ^＋），研制了伪狂犬病基因缺失疫苗，并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定，同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存期进行了检测；同时将4批疫苗用于免疫23个猪场的母猪、新生仔猪和育肥猪进行区域试验。测定结果表明，疫苗经上述两种途径接种对不同阶段猪的最小免疫剂量均为10^5.0 TCID50；10倍免疫剂量的疫苗对初生仔猪、15日龄仔猪和妊娠母猪是安全的，免疫猪能抵抗强毒的攻击；疫苗在4℃和-20℃下分别可保存6个月和12个月。对伪狂犬病毒抗体阴性的70日龄商品猪和种猪的免疫期为6个月。田间试验表明，4批猪伪狂犬病基因缺失疫苗安全有效，并可用于仔猪发病时的紧急接种。为猪伪狂犬病基因工程疫苗的制备与应用提供了有力的依据。     

2016年江苏省猪伪狂犬病血清流行病学调查

为了解江苏省猪伪狂犬病病毒（PRV）感染和免疫情况,采用ELISA方法,对2016年采集的2 715份猪血清样品进行PRV gE和gB抗体检测。结果显示：PRV gE样品阳性率为18.49%,场点阳性率为25.07%;PRV gB样品阳性率为55.35%,场点阳性率为70.21%。结果表明：江苏省PRV野毒感染情况较严重,且免疫效果并不理想;各地市的防控效果差异较大;规模场是净化该病的关键。     

2017年北京市猪伪狂犬病血清学调查

为了解北京市猪伪狂犬病野毒感染情况,2017年从北京市7个区157个养猪场（户）,采集5 469份猪血清样品,采用猪伪狂犬病病毒（PRV）gE抗体酶联免疫检测试剂盒进行血清学调查。结果显示：北京市7个区均有不同程度的PRV野毒感染,平均样品阳性率为53.36%。其中：经产母猪阳性率最高（58.28%）,其次是育成猪（57.55%）、育肥猪（54.49%）,后备母猪阳性率最低（37.46%）;散养户的样品阳性率较高,为66.42%,规模猪场的阳性率较低,为47.71%。调查结果表明,北京市PRV野毒感染较为严重,对猪场采取伪狂犬病净化和综合防控措施势在必行。     

表达PCV2 CAP蛋白和猪IL-18重组PRV PGO18株的生物学特性

为了探讨表达猪圆环病毒2型(PCV2)CAP蛋白和猪IL-18的重组猪伪狂犬病病毒PGO18作为疫苗候选株的潜在价值,对其在ST细胞上的培养特性,ST、VERO、IBRS-2、PK-15和IPEC细胞上增殖情况,生长特性,遗传稳定性,对小鼠安全性及其理化特性等生物学特性进行了研究。结果表明,重组病毒PGO18株与亲本株猪伪狂犬病病毒HB98具有相似的培养特性和生长特性,在ST、VERO和IBRS-2细胞上的增殖滴度TCID50与亲本株(107.75/0.1mL)相当,遗传稳定性良好,安全性试验表明对小鼠是安全的;理化特性试验说明该病毒具有猪伪狂犬病病毒的通性。