猪δ冠状病毒M基因RT-PCR检测方法的建立及应用

猪δ冠状病毒(PDCo V)是2014年在美国最新检测出的一种猪源冠状病毒。为评估PDCo V在我国的感染和流行情况,根据Gen Bank中登陆的PDCo V M基因核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,建立了一种基于M基因的猪δ冠状病毒RT-PCR检测方法。研究结果表明,该方法特异性较好,仅对PDCo V有特异性的扩增,对其它主要猪病病毒核酸扩增均呈阴性;敏感性较高,最低检测限可达6.33×104拷贝/μL。运用该方法对我国华东地区猪场2014~2015年间的492份临床样品进行检测结果显示,PDCo V总阳性率为2.85%(14/492),其中腹泻样品中阳性率为18.60%(8/43),表明本研究建立的RT-PCR方法可以对临床样品进行有效检测。     

不同日粮组成中添加褪黑素对乌鸡垂体分泌促卵泡素和促黄体素的影响

为了研究褪黑素(MLT)对乌鸡垂体分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的影响,试验采用体外细胞培养和放射免疫测定法(RIA),研究了不同日粮组成饲喂乌鸡12 d后,添加100 pg/mL MLT对体外培养乌鸡垂体细胞分泌FSH和LH的影响。选择15只乌鸡,分成3组,即高能组、中能组、低能组。结果表明:低能组与高能组相比,对FSH和LH的影响分别为极显著(P<0.01)和显著(P<0.05),低能组与中能组相比,对FSH和LH的影响分别为极显著(P<0.01)和显著(P<0.05),而中能组与高能组相比,对FSH和LH的影响均不显著(P>0.05)。说明在不同日粮组成中添加MLT对乌鸡垂体分泌FSH和LH有促进作用。     

高职课程教学与职业技能鉴定相衔接的教学模式改革研究——以《电机及控制技术(含PLC)》课程为例

培养高素质的技术、技能型人才是高职院校区别于其他院校的主要特点。实践动手能力的培养是培养高素质的技术、技能型人才的重要途径,职业资格证书也成为了衡量学生动手能力和专业知识的重要凭证。随着社会对人才的需求也发生了变化,越来越多的企业和工位需要员工持证上岗,因此,职业资格证书的考取也成为高职学生学习的重要内容之一。本文以《电气控制与可编程控制器》课程为例探讨了高职院校实训课程教学与职业技能鉴定相衔接的教学模式改革研究思路及方法。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对金华猪生产性能、肉品质、肠道菌群及抗氧化能力的影响

试验旨在研究饲粮中添加表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对金华猪生长性能、肉品质、机体抗氧化能力和肠道微生物组成的影响。选取24头平均体重为59.76 kg的金华猪（阉公猪），随机分为对照组（基础饲粮）和EGCG组（基础饲粮中添加0.3%EGCG），每组12头，3个重复，每个重复4头，试验预试期7d，正试期40d。结果表明：与对照组相比，EGCG组降低了金华猪的日均采食量（P<0.05）及耗料增重比（P<0.05）；饲粮中添加0.3%EGCG可提高眼肌面积（P<0.05），降低平均背膘厚（P<0.05）；饲粮中添加0.3%EGCG降低了血清甘油三酯含量和血清及肝脏的丙二醛含量（P<0.05），提高了血清超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性（P<0.05），提高了肝脏谷胱甘肽过氧化物酶活性（P<0.05）；与对照组相比，EGCG组放线菌门（Actinobacteria）相对丰度降低（P <0.05），粪球菌属3(Coprococcus＿3)、瘤胃梭菌属9(Ruminiclostridium＿9)和多尔氏菌属（Dorea）的相对丰度升高（P<...     

表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的重组乳酸菌的构建及蛋白免疫原性分析

试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌（Lactococcus lactis），为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E2基因克隆后测序，根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化，再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中，并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞，构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000，经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后，对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛，在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清，用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示，PCR扩增到了1 149 bp的目的片段，乳酸菌密码子偏嗜性优化后，GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符，在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带，与预期蛋白大小一致，且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明，表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应，该重组菌具有较好的免疫原性。     

基于DEA的国家技术创新系统创新效率评价研究

首先通过收集来自世界经济论坛(WEF)公布的《全球竞争力报告》、OECD的主要科技指标数据库(MSTI)、世界知识产权组织(WIPO)公布的统计数据以及美国科技信息所(ISI)的基本科学指标数据库(ESI),利用二阶段数据包络分析法(DEA)分析10国的创新效率,接着利用结构方程模型(SEM)进行国家技术创新系统简化模型的实证分析,最后利用回归分析了影响研发目标的因素。     

森林工程教学课堂融入高等数学知识的研究

针对学生缺少足够的高等数学知识解决工程实践中实际问题的现状,为了在森林工程课堂教学中将高等数学知识与工程实践更好地结合,基于实际的研究工作,对用于解决常微分方程的显式欧拉法、隐式欧拉法、改进欧拉法、龙格库塔法和ODE45方法进行了介绍和对比研究。结果表明,这些方法在解决常微分方程的数值解上是一致的,而且相互之间的误差很小。介绍了解决偏微分方程的PDE方法。在建模的过程中用到了有限元方法,在方程的列写过程中用到了矩阵方法,通过理论分析可以看出,矩阵表示的是实际问题与空间、时间的关系,因而可以从直观的角度去理解抽象的矩阵知识。这些方法可以很好地帮助森林工程领域的学生在今后的工作中建立数学模型并加以分析,从而加强解决实际工程问题的能力,也为森林工程课题今后的教学提供一定的参考。     

贺州市晒黄烟区植烟土壤养分空间分布特征

植烟土壤主要养分含量是烟叶产量和品质形成的关键影响因素，通过分析植烟土壤养分空间分布特征，进而建立植烟土壤养分丰缺指标体系，有利于烟叶质量和品质的预测。本文采用土壤养分状况系统研究法（ASI）测定了贺州市晒黄烟区不同植烟土壤的养分含量，分析了不同植烟土壤的养分含量差异及其空间分布特征。研究结果表明：土壤pH值呈北部高、东部低的空间分布格局，其中，凤凰乡、黄姚镇中部及公会镇西北部土壤pH值较高；公会镇和黄姚镇土壤有机质含量较高；土壤铵态氮含量呈北部及西南部高而西部及南部低的空间分布格局，而土壤硝态氮含量呈西部高、北部低的空间分布格局；樟木林乡土壤有效磷含量较高，而凤凰乡土壤速效钾含量相对较低。空间分布格局表明，研究区东北部凤凰乡东部与公会镇西北部交界处为烟田集中分布区，土壤铵态氮、硝态氮和有效磷含量相对较低；研究区土壤交换性钙和交换性镁含量呈北部高、东部低的空间分布格局。     

禽腺病毒血清4型贵州株全基因序列分析

为了解禽腺病毒血清4型(FAdV-4)地方流行毒株的分子进化情况,基于实验室分离的2株FAdV-4贵州株GZ-BJ株和GZ-QL株,分别对2株FAdV-4毒株进行PCR分段扩增,扩增产物克隆至载体,提取质粒进行PCR和双酶切鉴定后筛选出重组质粒进行测序,将测序结果依次拼接得到病毒的全基因组,获得FAdV-4贵州株的全基因序列,并对其进行序列和遗传进化分析。结果显示,通过PCR分段扩增成功获得了2株FAdV-4贵州株(GZ-BJ株和GZ-QL株)的全基因序列,长度分别为43352、43723 bp,FAdV-4 GZ-BJ株全基因序列长度比FAdV-4 GZ-QL株短371 bp,少6个ORF(22K、putative 9.1 ku、u-exon、ORF17、ORF28、ORF42),二者的氨基酸同源性为57.1%。2株FAdV-4贵州株同国内外不同地区FAdV-4毒株核苷酸同源性在88.7%~100%,与FAdV-4经典毒株ON1比对,2株FAdV-4贵州株和国内FAdV-4分离株均缺失ORF19、ORF27、ORF30。系统进化树分析显示,2株FAdV-4贵州株GZ-BJ株和GZ-QL株仍属于Ⅰ群C种FAdV。研究结果表明,2株贵州株FAdV-4 GZ-BJ株和FAdV-4 GZ-QL株较国内外FAdV-4毒株均存在进化与突变,且FAdV-4 GZ-BJ株变化较大,但尚未改变其血清型,这为探索FAdV-4致病机理的分子机制研究提供依据。     

外源酶对不同加热程度菜籽饼体外养分消化率的影响

试验旨在利用单胃动物仿生消化系统（SDS-Ⅲ）建立肉鸡体外模拟消化模型，测定不同加热程度菜籽饼体外养分消化率的差异以及额外补加外源酶（蛋白酶Proact和淀粉酶A酶）对不同加热程度菜籽饼体外养分消化率的影响。试验采用2×2双因素完全随机设计，以不添加外源酶的正常菜籽饼和过热菜籽饼为对照试验，以分别在两组对照试验基础上额外补加外源酶蛋白酶Proact 15 prot/g、淀粉酶A酶0.4 KNU/g作为试验组。利用SDS-Ⅲ模拟肉鸡全消化道消化过程，测定4组试验原料的体外干物质消化率（IVDMD）、体外表观粗蛋白质消化率（IVACPD）、体外标准化粗蛋白质消化率（IVSCPD）、体外脱脂干物质消化率（IVDDMD）、酶水解物能值（EHGE）、体外能量消化率（IVGED），每个样品均设5个重复，每个重复1根消化管。结果表明，正常菜籽饼的IVDMD、IVACPD、IVSCPD、IVDDMD、EHGE和IVGED均极显著高于过热菜籽饼（P<0.01），为更加优质的菜籽饼来源。添加外源酶过热菜籽饼的IVDMD、IVDDMD、EHGE、IVGED显著高于对照组（P<0.05）,IVAC...