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为了减少绵羊精液中其他体细胞污染和裂解不充分等因素而导致精子RNA回收率低、质量差的问题,试验以新鲜的美利奴羊精液为研究对象,采用Percoll+hSOF和Percoll+PBS密度梯度离心法和PBS直接洗涤法纯化绵羊精液,然后再采用TRIzol(65℃)法和TRIzol(65℃)+试剂盒法提取绵羊精子RNA,检测RNA的浓度、纯度和完整性,将RNA反转录为cDNA,PCR扩增PRM1基因(编码鱼精蛋白1)和CDH1基因(编码上皮细胞钙黏蛋白),验证所提取的RNA是否受体细胞RNA和基因组污染。结果表明:用Percoll密度梯度法纯化绵羊精液较PBS直接洗涤法能更好地去除精液中的体细胞,但精子回收率低。Percoll+PBS密度梯度离心法纯化后精子提取的RNA较PBS直接洗涤法纯度较高,但浓度较低;TRIzol(65℃)法提取的精子RNA较TRIzol(65℃)+试剂盒法浓度较高,但纯度较低。两种精液纯化方法(Percoll+PBS密度梯度离心法和PBS直接洗涤法)结合两种精子RNA提取方法[TRIzol(65℃)法和TRIzol(65℃)+试剂盒法]获得的精子RNA均能检测到PRM1... 相似文献
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鱼精蛋白是存在于鱼精巢中的一种碱性蛋白质,是一种高效、安全、值得开发的新型天然食品防腐剂.本文综述了鱼精蛋白的性质、提取、纯化、抑菌机理及其应用. 相似文献
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鱼精蛋白的研究现状及应用 总被引:2,自引:0,他引:2
鱼精蛋白(protam ine)又称精蛋白,是一种主要存在于各类雄性动物成熟精巢组织中的多聚阳离子肽,它与DNA紧密结合在一起,以核精蛋白的形式存在。鱼精蛋白是一种小而简单的球形碱性蛋白,一般由30~50个氨基酸组成,其中以精氨酸为主。目前,已从多种鱼类(如鲑鱼、红鳟鱼、鲱鱼等)和哺乳动物(如老鼠、人、野猪等)的成熟精巢组织中提取到了鱼精蛋白。根据氨基酸的种类和数量,鱼精蛋白可分为3种:①单鱼精蛋白,它的碱性氨基酸仅为精氨酸;②双鱼精蛋白,碱性氨基酸除含有精氨酸外,还含有组氨酸或赖氨酸;③三精蛋白,碱性氨基酸有精氨酸、组氨酸和赖氨… 相似文献
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鱿鱼鱼精蛋白的提取_纯化及其生化特性 总被引:16,自引:0,他引:16
鱼精蛋白(Protamine)是一种常与DNA结合,存在于鱼类成熟精巢中的碱性蛋白。由于其生化组成的特点,鱼精蛋白不仅具有促使细胞发育繁殖的作用,而且一旦将其分离出来,能有效抑制多种食品腐败菌的生长和繁殖[Miler1942]。同时,这种鱼精蛋白还有... 相似文献
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本文以农大褐父母代种鸡为材料,研究硫酸鱼精蛋白和谷氨酰胺对鸡精液冷冻效果的作用表明,A0液+DMA和B0液+甘油,解冻后精子活力分别为0.53,0.49,均显著高于其它组(P<0.05);A0液+硫酸鱼精蛋白、A0液+谷氨酰胺,解冻后分别获得了0.46,0.41的精子活力,均显著高于对照组(P<0.05);B0液各组试验效果差异均不显著(P>0.05)。 相似文献
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