45S rDNA在蒿属5种植物染色体中的分布

 以小麦45S rDNA为探针,通过荧光原位杂交（FISH）技术,研究了45S rDNA在蒿属（Artemisia）5个物种染色体中的分布情况。结果发现,在根尖体细胞有丝分裂中期,中亚苦蒿（A. absinthum Linn.）有1对染色体出现杂交信号;大籽蒿（A. sieversiana Ehrhart ex Willd.）和黄花蒿（A. annua Linn.）各有两对染色体上出现信号;欧亚艾蒿（A. abrotanum Linn.）和牡蒿（A. japonica Thumb.）各有4对染色体出现杂交信号。信号位点除了分布在随体上,主要分布在非随体染色体的端部,而在欧亚艾蒿中发现1对信号位点分布在近端部,而且信号间的强弱也不尽相同。基于FISH技术的核型分析,不仅能够提供稳定、可靠的细胞学标记,而且进一步丰富了染色体分析的基础资料。     

Cyto-nuclear discordance in the genetic relationships among Tunisian fig cultivars (Ficus carica L.): Evidence from non coding trnL–trnF and ITS regions of chloroplast and ribosomal DNAs

Genetic diversity studies were conducted to evaluate intra-specific relationships in Tunisian fig (Ficus: Moraceae) using sequences of the ITS regions of nuclear ribosomal DNA and the chloroplast non-coding region trnL–trnF (trnL intron, and trnL [UAA]–exon–trnF [GAA] intergenic spacer). All data sets suggest that the sequences obtained showed variations either on their lengths or on their nucleotide compositions. The mean size of these nuclear and cytoplasmic non-coding regions is 697.5 and 1035 base pairs for ITS and trnL–trnF chloroplast DNA, respectively. Our results suggest that the substitution rate estimated for the ITS sequences of nuclear DNA is greater than the one unregistered for the non-coding regions of chloroplast DNA. Therefore, chloroplast DNA shows more homoplasy than the nuclear ribosomal DNA. In fact, the consistency (CI) and retention (RI) indexes calculated for nuclear and cytoplasmic DNAs show values of 0.420 and 0.490 for chloroplast DNA and 0.573 and 0.387 for ribosomal DNA, respectively. The nuclear DNA has more resolution of genetic relationships between cultivars. In addition, the result suggests that the cultivars studied are clustered independently from their geographical origin and the male trees did not thoroughly diverge from the common figs. The discordance between chloroplast and the nuclear topology is revealed. The lack of congruence between the two data sets may be a result of hybridization or introgression. Our result showed that the nuclear and cytoplasmic sequences are useful for germplasm discrimination as well as for investigation of patterns of variation in fig.     

益母草基于45S rDNA染色体定位的核型分析及减数分裂观察

 以番茄的45S rDNA为探针,采用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）技术与核型分析相结合的方法,对益母草（Leonurus japonicus Houtt）的核型和45S rDNA在染色体上的定位进行了研究,同时采用压片法观察了其花粉母细胞减数分裂中染色体的行为。结果表明,益母草绝大多数花粉母细胞减数分裂中染色体的行为正常,终变期形成10个二价体,佐证了益母草的染色体数目为2n = 20,且为二倍体,其减数分裂为同时型,花粉粒育性为97.10%。益母草体细胞有丝分裂中期染色体上具有2对45S rDNA杂交信号,分别位于第2号染色体短臂的末端和第3号染色体短臂近着丝粒处,益母草的核型公式为2n = 2x = 20 = 2m + 16sm（2SAT）+ 2st,染色体相对长度组成为2n = 2L + 8M2 + 10M1,最长染色体与最短染色体的比值为1.58,核型不对称系数为69.39,染色体相对长度变异范围为8.05% ~ 12.73%,其核型为“3A”型。基于上述结果绘制了益母草的核型模式图。     

应用核DNA ITS序列探讨广义花楸属（Sorbus L.）属下系统关系

 花楸属属内杂交和多倍化现象比较普遍,分类处理一直存在争议。选取核基因的ITS序列对花楸属（Sorbus L.）的46个种进行测序,并选取栒子属（Cotoneaster multiforus,Cotoneaster horizontalis）、白鹃梅属（Exochorda racemosa）、蔷薇属（Rosa hugonis）和樱属（Cerasus glandulosa）作为外类群,基于最大简约分析（Maximum parsimony analysis,MP）,最大似然分析（Maximum likelihood analysis,ML）和贝叶斯推断（Bayesian inference,BI）对花楸属进行分子系统发育重建。结果表明：花楸属为自然的单系类群,并且得到很高的支持率;Aria、Micromeles和Sorbus,3个亚属各自不能形成单系,甚至单叶类群和复叶类群的分类学界限都不是很清楚,这说明目前的分子系统发育证据与花楸属属内的分类划分并不十分吻合。     

基于5.8S rDNA和ITS序列探讨亚洲瓠瓜的地理分化

基于5.8S rDNA及ITS序列对23份来自中国、泰国和日本的亚洲瓠瓜品种进行了地理分化研究。结果发现,23份瓠瓜材料的ITS1+5.8S rDNA+ITS2序列的长度在611～627 bp之间,G+C含量在54.17 %～63.26 %之间,信息位点数65个,占总碱基数的11.09 %;源自日本的2份瓠瓜品种的序列长度短于其他21份瓠瓜品种,G+C含量也明显低于其他瓠瓜品种。从5.8S rDNA及ITS序列构建的系统树可以看出,源自日本的瓠瓜品种与源自中国和泰国的瓠瓜品种存在地理分化现象,分属于不同的分支,支持率达到99 %。序列间的同质性检验结果显示,2份源自日本的瓠瓜品种与源自中国和泰国的瓠瓜品种差异显著。     

肾形肾状线虫（Rotylenchulus reniformis）浙江杭州 群体形态学和分子特性及寄主范围

 肾形肾状线虫（Rotylenchulus reniformis）是一种重要的蔬菜线虫,寄主范围和分布很广。本文根据形态学特征和形态测量将来自浙江省杭州市蔬菜上的肾状线虫群体鉴定为肾形肾状线虫,为浙江省首次报道。该群体的形态学特征及形态测量值与模式标本基本吻合,个别形态测量值(比值)有变异。通过对该肾形肾状线虫群体的rDNA中ITS区和编码28S RNA基因中的D2D3区的PCR扩增和序列测定,明确二序列长度分别为808 bp和786 bp;序列分析发现该群体ITS序列与肾形肾状线虫种内一些两性生殖群体的亲缘关系较近,同源性高达99.5%～100%,而与一孤雌生殖群体同源性为92.4%;编码28S RNA基因中的D2D3区与已报道群体的同源性达到99.4%,相似度较高;本研究还发现杭州肾形肾状线虫群体的寄主涉及11个科16个属的果蔬。     

桃树根际铁载体产生菌MX-26的分离鉴定及诱变选育

从桃树根际土壤中分离到81株细菌,通过铬天青（chrome azural S,CAS）检测法筛选出一株产铁载体能力较强的细菌菌株MX-26,经形态、生理生化特征鉴定及16S rDNA序列分析,确定MX-26为克雷伯氏菌属产酸克雷伯氏菌Klebsiella oxytoca。以MX-26为出发菌株,对其进行紫外诱变、紫外和氯化锂复合诱变及硫酸二乙酯（DES）诱变,得到菌株的最佳诱变组合：紫外线照射时间为180 s,氯化锂终浓度为1.2%,硫酸二乙酯诱变时间为40 min。诱变获得菌株MX26-18,其产铁载体能力较出发菌株提高了32.9%,且遗传性能较稳定。     

番石榴焦腐病菌的ITS分析及PCR检测

番石榴焦腐病是台湾入境大陆水果的重要植物病害,由葡萄座腔菌Botryosphaeria rhodina引起.为建立该病原菌快速、灵敏的检测技术,比较分析了葡萄座腔菌和葡萄座腔菌属其它种的ITS序列,在此基础上设计了1对检测番石榴焦腐病菌的特异性引物BF1/BR1,利用此引物从葡萄座腔菌中特异性扩增出287bp条带,而其余参试的菌株未能获得扩增条带.将真菌通用引物ITS1/ITS4和BF1/BR1进行巢式PCR扩增后,检测灵敏度提高1 000倍,可检测到葡萄座腔菌1pg的基因组DNA.结合快速碱裂解法提取发病组织的DNA,采用该PCR检测技术可从自然感染焦腐病果实中检测到葡萄座腔菌.     

美国大豆中镰刀菌的分离鉴定

为加强对美国输华大豆真菌病害的监测力度,降低外来生物入侵风险,本文通过对美国进境大豆病菌分离,共得到32个菌株,并对其中3株镰刀菌进行了形态学和分子生物学鉴定,确认了它们分别是尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、木贼镰刀菌(F.equiseti)和拟枝孢镰刀菌(F.sporotrichioides)。本研究从32个分离菌株中得到的3株镰刀菌分属于不同种,不仅证实了美国大豆中镰刀菌的多样性,也可为港口的植物检疫工作提供借鉴。     

ATMS平台的设计与实现

针对目前我国智能交通系统中ATMS(Advanced Traffic Management System)平台的发展现状，介绍了ATMS平台的一种设计和实现方法，给出了系统的拓扑结构图。该平台采用3层C／S结构，使得各部分的开发工作能够独立进行；采用COM／DCOM技术实现了各个子系统的分布式应用，并保证了各子系统之间的相互通讯。应用实例表明，该系统大大提高了交通管理部门的工作效率。