EGCG抑制四氧嘧啶致糖尿病小鼠RCCs-RAGE信号轴表达的研究

糖基化终末端产物（AGEs）和4-羟基任烯醛（4-HNE）等活性羰基化合物（Reactive carbonyl compounds,RCCs）激活的RCCs-RAGE（Receptor for AGEs,RAGE）信号轴在糖尿病、神经退行性疾病、癌症等衰退性疾病的发生发展中起了关键性的作用。本研究采用四氧嘧啶腹腔注射的方法建立糖尿病小鼠模型,探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin Gallate,EGCG）阻抑四氧嘧啶致糖尿病小鼠RCCs-RAGE轴表达的活性。糖尿病小鼠按其体质量与血糖值随机均匀分为模型组、EGCG低剂量组（10 mg·kg^-1·d^-1）、EGCG中剂量组（20 mg·kg^-1·d^-1）和EGCG高剂量组（30 mg·kg^-1·d^-1）。小鼠连续灌胃EGCG 12 d后,检测小鼠血清中血糖值、胰岛素和水溶性RAGE（sRAGE）浓度、羰基蛋白含量、AGEs荧光值,QPCR检测肾脏RAGE基因相对表达量,Western blot方法检测肾脏RAGE蛋白和4-HNE含量。结果显示,与糖尿病造模组相比,EGCG通过抑制4-HNE、AGEs等RCCs毒性活性羰基化合物的生成,增加sRAGE血清浓度,抑制AGEs-RAGE信号轴介导的炎症瀑布反应,有效缓解了机体的氧化应激压力,表现出很好的保护糖尿病小鼠的活性。本研究从一个新角度揭示了EGCG抑制RCCs-RAGE信号轴是其防治衰退性相关疾病的潜在作用机制之一。     

TF1与EGCG在Caco-2细胞中的吸收规律研究

为了探究茶黄素单体（TF₁）与表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）在生物体中的吸收规律,本实验建立了体外Caco-2单层细胞模型,模拟小肠对TF₁与EGCG的吸收,并研究了浓度和时间对吸收的影响。结果表明,在10~100βµmol·L^-1范围内,TF₁与EGCG在Caco-2单层细胞模型中的吸收呈现表观渗透系数Papp随浓度增加而上升的规律。但两者的外排率也呈现同样的规律,并且外排率上升的幅度均大于二者吸收率上升的幅度。由于TF₁与EGCG在细胞单层模型中的Papp均小于1×10^-6βcm·s ^-1,说明两者都属于难吸收的药物,但是TF₁在Caco-2细胞模型中的吸收率高于EGCG。因其外排比均大于2,说明两者在细胞模型上的外排是被动转运。从吸收时间看,TF₁的外排规律与EGCG一致。     

高纯度EGCG单体提取与分离纯化小试工艺研究

在筛选出合适的富含EGCG(表没食子儿茶素没食子酸酯)的茶叶原料基础上,开展提取和分离纯化试验,获得配套工艺和参数,得到高纯度EGCG单体。结果显示,浸提温度70℃,料液比1∶20(g/m L)条件下浸提60 min,茶汤中EGCG含量较高;浸提液用聚酰胺树脂纯化分离,纯化的最佳工艺条件为上样流速1 BV/h、料液浓度为20 mg/m L、解吸流速为1 BV/h,分别用1 BV的水、1 BV 20%的乙醇溶液以及1 BV 80%的乙醇溶液进行梯度洗脱,两次柱层析制得的EGCG纯度为95.21%,得率仅为0.276%。该方法绿色无污染,对提高湖北省秋茶的利用率具有重要意义。     

EGCG抑制波罗的海希瓦氏菌生物被膜和腐败活性的研究

以海产品腐败菌波罗的海希瓦氏菌(Shewanella baltica)为对象,评价了儿茶素单体抑制生物被膜的效果,并分析效果最佳的单体对该菌生物被膜和腐败活性的影响。结果表明,5种儿茶素单体均能抑制S.baltica生物被膜形成,其中表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)抑制率最高,其最小抑菌质量浓度为40μg·m L-1,亚抑菌质量浓度10~30μg·m L-1的EGCG对细菌生长无显著影响。在30μg·m L-1 EGCG作用下,群体感应(Quorum sensing,QS)信号分子呋喃酮酰硼酸二酯(Autoinducer-2,AI-2)、二酮哌嗪类化合物(Diketopiperazine,DKPs)cyclo-(L-Pro-L-Leu)和cyclo-(L-Pro-L-Phe)活性显著下降(P0.05),其抑制率分别为63.95%、27.43%和21.94%。亚抑菌浓度EGCG能显著抑制S.baltica生物被膜形成、泳动能力和蛋白酶活性(P0.05),呈现浓度依赖性,在30μg·m L-1时抑制率分别为55.18%,66.71%和46.67%。因此,EGCG在亚抑菌浓度下能够干扰S.baltica的QS系统,有效抑制生物被膜形成,减弱致腐能力,研究为EGCG作为新型的QS抑制剂调控食品腐败菌奠定基础。     

L-抗坏血酸对速溶茶中酯型儿茶素、EGCG含量的影响

以乌龙茶(单枞、铁观音)为原料,探讨在速溶茶加工过程中浸提工序阶段,添加L-抗坏血酸对速溶茶中酯型儿茶素和EGCG含量的影响.结果表明:L-抗坏血酸可显著提高速溶乌龙茶(铁观音)产品中酯型儿茶素、EGCG的含量,但是降低了速溶乌龙茶(单枞)产品中的酯型儿茶素、EGCG含量.     

EGCG对羟自由基损伤小鼠胚胎海马神经元的保护作用

为了探讨表没食子儿茶素没食子酸酚(tea polyphenol(-)-epigallocatechin gal-late,EGCG)对羟自由基损伤小鼠海马神经元的保护作用,采用原代细胞培养技术,分离培养18 d小鼠胚胎海马神经元,培养4 d后,加入FeSO4和H2O2进行处理,随后加入不同浓度的EGCG培养24 h,通过观察细胞的形态学变化,四甲基偶氮唑盐(methylthiazolydi-phenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法分析细胞活性,检测神经元中丙二醛(malondi-aldehyde,MDA)以及培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量的变化,以探讨EGCG对羟自由基损伤神经元的保护作用。结果显示,EGCG能够抑制神经元MDA的产生,降低神经元细胞外液中LDH的含量,增加细胞的活性,从而进一步证明EGCG能够清除羟自由基产生,减轻羟自由基对神经元损伤,对神经元的存活有一定的保护作用,为其用于治疗中枢神经系统病理性损伤的打下实验基础。     

EGCG对DNA辐射损伤的保护作用

利用荧光探针溴化乙啶（ＥＢ）研究了茶儿茶素ＥＧＣＧ与小牛胸腺ＤＮＡ的相互作用，结果表明，ＥＧＣＧ─ＤＮＡ的荧光光谱基本不随时间而变化，但随ＥＧＣＧ浓度增强，λ２峰（５８８．８ｎｍ）强度下降，偏振度增加，这可能与ＥＧＣＧ插入ＤＮＡ碱基对平面，双链有序度增加有关。γ辐照使小牛胸腺ＤＮＡ发生断裂等损伤，剂量越大，损伤越严重，但加入ＥＧＣＧ后，对ＤＮＡ损伤有一定保护作用，这可能与ＥＧＣＧ清除γ辐照间接效应产生的自由基有关。     

壳聚糖复合β-乳球蛋白负载EGCG纳米粒的制备及其对糖尿病小鼠血糖的影响

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）作为茶叶中主要生物活性成分,具有良好的生理功能,但低稳定性使其容易被氧化降解,生物利用率低。利用羧甲基壳聚糖（CMC）、壳聚糖盐酸盐（CHC）、β-乳球蛋白（β-LG）作为壁材,制备壳聚糖复合β-乳球蛋白负载EGCG纳米粒,通过透射电镜、结构表征（粒径、Zeta电位测定）对颗粒微观形态进行观察,利用高效液相色谱仪对颗粒包埋率、模拟胃肠液释放率进行测定,最后建立糖尿病小鼠模型,探究包埋后颗粒的降血糖活性。结果表明,CS-β-LG-EGCG纳米粒结构完整、粒径10~100 nm、粒子分散;包埋率大于50%,且在肠液和胃液中具有缓释作用;CS-β-LG-EGCG纳米粒与胰岛素无拮抗作用,与未包埋的EGCG相比,包埋后颗粒具备的缓释作用可减缓血糖的回升。     

EGCG和GCG清除单线态氧效果的ESR鉴别

利用ESR技术研究了EGCG及其对应体GCG对单线态氧的作用效果。结果表明 ,高浓度下 ,两者对单线态氧均有较强的清除作用 ,无显著差异 ;小于 0 1mmol L浓度时 ,GCG的清除能力强于EGCG ;浓度越低 ,差异越明显。造成这种差异的主要原因是两种儿茶素的空间构象不同 ,GCG比EGCG更稳定。     

Effects of Methylated Soybean Oil Adjuvant on Fomesafen Efficacy to Weeds

Tank-mix adjuvant has the potential to improve the weed control efficacy of post-emergence herbicides. In order to study the synergistic effect of adjuvant, the effects of different rates of fomesafen alone or applied methylated soybean oil adjuvant（MSO） were sprayed on redroot pigweed, abutilon and black nightshade under greenhouse condition. The results showed that fomesafen had different performance on the three weeds, and MSO adjuvant could effectively increase the control. The nightshade control was lower than other two weeds with all the fomesafen doses from 131.25 to 506.25 ga.i. · hm-2 with or without adjuvant. The control of abutilon was between the black nightshade and the redroot pigweed, and had better control at 375 ga.i. · hm-2 with adjuvant or 506.25 ga.i. · hm-2 alone or with adjuvant respectively. The results indicated that mixing adjuvant with fomesafen improved the control on weeds, especially at the low rate. Black nightshade was more difficult to control. The redroot pigweed had the most susceptibility to fomesafen alone or with adjuvant.