环孢素A对咖啡因刺激下的L6细胞钙蛋白酶活性的影响

探究钙调神经磷酸酶抑制剂环孢素A是否调节骨骼肌细胞钙蛋白酶活性.将分化8 d后的L6肌管细胞随机分为4组,即对照组、环孢素组、咖啡因组、环孢素+咖啡因组.急性刺激5 h后收集细胞,提取并定量细胞总蛋白和肌原纤维蛋白,用荧光定量法测定钙蛋白酶的活性.结果显示,咖啡因刺激后肌原纤维蛋白含量下降,同时钙蛋白酶活性明显增加;加...     

Fish hepatocyte glycogen phosphorylase – a sensitive indicator for hormonal modulation

The absence of a reproducible method for the assay of glycogen phosphorylase (GPase) in isolated fish hepatocytes has made the interpretation of hormone-induced glycogenolysis data difficult. This study presents such an assay and demonstrates its sensitivity to hormonal activation. The enzyme is assayed in the reverse direction using glucose 1-phosphate (G1-P) and glycogen as substrates and uses standard methods for the quantification of the liberated inorganic phosphate. The assay is highly reproducible, sensitive, and provides an excellent means to follow small and rapid changes in enzyme phosphorylation status following the addition of hormones. We show for hepatocytes isolated from rockfish (Sebastes caurinus) and brown bullhead (Ameiurus (Ictalurus) nebulosus) that small concentrations of three model hormones, namely epinephrine (catfish), norepinephrine, and prostaglandin E₂ (rockfish), lead to the rapid, concentration and time-dependent conversion of existing GPase into the active GPase a form. Some of the enzyme seems to be impervious to hormonal activation, as the highest %GPase a never reaches 100%. We provide evidence that changes in enzyme phosphorylation status provide a better short-term insight into hormone-dependent activation than estimates of glucose or some other end products, that usually must accumulate for long periods before detection is possible. Our data also show that GPase in freshly isolated hepatocytes is already in an activated state and cells should be given a period of rest for several hours before hormonal studies involving glycogen breakdown or the cAMP cascade are initiated.     

HPLC-DAD分析红茶儿茶素类物质和咖啡因的方法研究

建立一种梯度洗脱的儿茶素类和咖啡因HPLC-DAD灵敏、快速的定量方法。确定最佳波长为205 nm,5种儿茶素(EGCG,EGC,ECG,EC,+C)和咖啡因的检测限(LOD)达到0.01~0.04 g.mL-1。采用反向C18(150×4.6 mm,ID;5μm)柱分离,以乙腈和0.03%三氟乙酸溶液为流动相梯度洗脱,在1 mL.min-1的流速下,整个色谱运行过程仅需15 min。目标物质的回收率在92%~110%范围,相对标准偏差小于2.7%。该方法稳定性好、专一性强,适合红茶儿茶素类和咖啡因的准确定量分析。     

云南红茶贮存中主要化学成分变化及茶红素、茶褐素功效的探究

以具有代表性的云南优质红茶为试样,通过高效液相色谱法（HPLC）、光谱法检测,分析红茶中的茶色素、咖啡因、茶多酚等主要生化成分在贮存过程中（第0、1、3、5年）的变化趋势,结果表明：云南红茶中的咖啡因、没食子酸（GA）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）和表儿茶素没食子酸酯（ECG）含量随着红茶储存年份的增加而减少;红茶中的茶黄素含量下降,而茶红素和茶褐素含量增加。该研究结果揭示贮存时间对红茶主要化学成分的影响,为今后红茶科学存放提供参考依据。同时探究茶红素、茶褐素对小鼠皮肤组织中表皮生长因子（EGFR）的影响,探究红茶中的茶色素健康功效。     

不同茶树品种化学成分与红碎茶品质关系的研究

用高效液相色谱法分析了６个茶树品种鲜叶样品的儿茶素类、咖啡碱、没食子酸含量和红碎茶茶黄素类（ＴＦｓ）的组成及其与红碎茶品质之间的关系。结果表明，茶黄素（ＴＬ，Ｘ＿１）、茶黄素－３－没食子酸酯（ＴＦ３Ｇ，Ｘ＿２）和茶黄素－３．３′双没食子酸酯（ＴＦ３．３’ＤＧ，Ｘ＿３）的ＨＰＬＣ峰面积（１×１０￣５ｍｍ￣２）与红碎茶感官审评品质总分（Ｙ＿（ｔｏｔａｌ），分）和滋味得分（Ｙ＿（ｔｓｔｅ））分）之间存在显著的（Ｐ＜０．０５）三元线性回归关系。主成分分析结果表明，茶树品种鲜叶的咖啡碱与（一）ＥＧＣ，（一）ＥＧＣ与（＋）ＥＣ和（＋）ｃ含量分别具有较高相关性，因此，咖啡碱、（一）ＥＣＧ，（一）ＥＧＣＧ含量分别作为第一、二、三主成分或综合因子，可以较好地反映茶树品种鲜叶形成ＴＦｓ以及红碎茶品质的潜力．     

肝素浓度和作用时间对绵羊精子体外获能和体外受精的影响

摘 要：通过研究添加不同的肝素浓度(0、5、10、20、50μg/ml)及不同作用时间（0、30、45、60、90、120min）对绵羊精子体外获能、存活时间和相应体外受精的影响,为改善绵羊精子体外获能效果及研究获能的机理提供一定的参考。在获能液中添加10μg/ml肝素作用45min时,其获能率最高,顶体反应率最低（40.92％和16.59％）（P<0.05）,存活时间18h,能够提高受精卵的囊胚发育;单独使用咖啡因或与10μg/ml肝素联合使用,其获能效果均不如单独使用10μg/ml肝素。说明绵羊精子获能时肝素的适宜浓度是10μg/ml,作用时间是45min,咖啡因无协同肝素促进获能的作用。     

高咖啡碱茶树品种生物学性状及生化品质特征研究

研究结果表明,优选1号、6号、11号、13号等4个杂交选育的高咖啡碱品种属小乔木,大叶种,树姿半开张,生长势强、萌芽早,芽叶粗壮,色泽黄绿,多茸毛,产量特高,比云南大叶种高62%以上,移植成活率达97%以上,栽培适应性强;一芽二叶生化成分含量丰富,咖啡碱、茶多酚、儿茶素、氨基酸及水浸出物均高于云南大叶种,其中咖啡碱含量尤为特出,春茶达5.11%～6.15%,比对照种高25.86%～51.47%,生化变化规律,咖啡碱、氨基酸含量春茶夏茶秋茶,茶多酚、儿茶素、水浸出物含量夏茶秋茶春茶,适制高档红茶。滋味浓强鲜爽,汤色红艳,香气高爽,部分品种花香明显,其品质表现与生化物质含量相吻合。高咖啡碱茶树品种的育成为开发天然植物咖啡碱,茶树资源多用途开发提供了新的途径。     

普洱茶中咖啡碱在小鼠体内的吸收情况研究

对比研究了普洱茶、绿茶和咖啡碱以3种剂量（5、25和50 mg·kg^-1·d^-1）对小鼠灌胃给药之后,咖啡碱在小鼠体内的吸收情况。研究结果显示,以咖啡碱剂量为25和50 mg·kg^-1·d^-1,分别灌胃小鼠普洱茶、绿茶和咖啡碱纯品,普洱茶灌胃后小鼠血浆中咖啡碱的水平明显低于灌胃绿茶和咖啡碱组。同时,用AUC（30-150 min）梯形计算公式计算咖啡碱吸收总量,灌胃咖啡碱剂量为25和50 mg·kg^-1·d^-1的普洱茶血液中咖啡碱总量也明显小于灌胃绿茶和咖啡碱（P<0.05）。研究结果表明,相同咖啡碱剂量下,普洱茶中的其它成分能够显著抑制咖啡碱的体内吸收。     

贵州绿茶中咖啡碱和儿茶素含量分析

对贵州省243份绿茶样品中咖啡碱和儿茶素类物质采用高效液相色谱方法进行检测。结果表明：贵州省绿茶中儿茶素含量范围为9.14%~27.28%,平均含量15.71%;咖啡碱含量为1.08%~3.33%,平均含量2.24%。各地区茶叶儿茶素品质指数多数为1000~2000,其中黔南地区的最高为1975.51;各地区的儿茶素苦涩味指数主要在8.00~17.04之间,黔西南地区的苦涩味指数最低为8.00。据此分析可得,贵州绿茶具有很高的利用价值,春茶适合开发高品质的名优茶,秋茶适合用于茶叶深加工或有效成分的提取。     

正交投影法解析色谱重叠峰的研究──咖啡、茶叶中咖啡碱、茶碱与可可碱的定性定量分析

咖啡、茶叶中茶碱和可可碱的色谱峰为全包含峰，如果用常规方法对其进行定性、定量，则误差很大．本文以正交投影法对咖啡、茶叶的三维色谱进行处理，从中解析出了各组分的色谱流出曲线，并进行了定量分析．结果表明，正交投影法解决了常规方法中以保留时间定性的不可靠性，以及重叠色谱峰的定量难题．因而，它是对植物体中生物碱进行定性定量的有效方法之一．