不同近红外光谱仪在茶叶品质检测中的应用研究

分别应用NIRSystems 6500和InfraXact Lab两种不同型号近红外光谱仪对茶叶中茶多酚和咖啡碱含量进行定标建模,确定了在改进偏最小二乘法定标技术下的最优光谱数据预处理方式,分别建立了茶多酚和咖啡碱的优化定标模型.NIRSystems 6500和InfraXact Lab两种型号近红外光谱仪所建立茶多酚的最优定标模型目标函数f值分别为96.07%和95.96%,咖啡碱的最优模型目标函数f值分别为95.32%和91.47%,定标效果良好.利用验证集样本对模型进行了检验,茶多酚和咖啡碱的预测相对分析误差(RPD)均大于3.结果表明,两种仪器所得到的模型定标效果均良好,预测精度高,都可用于实际检测.NIRSystems 6500型近红外光谱仪的定标效果和稳定性优于InfraXact Lab型近红外光谱仪.     

Influence of caffeine on the survival of leaf-cutting ants Atta sexdens rubropilosa and in vitro growth of their mutualistic fungus

BACKGROUND: Leaf‐cutting ants collect plant fresh material for the cultivation of their mutualistic fungus. Atta sexdens rubropilosa Forel (Hymenoptera: Formicidae) cause great economic losses through their foraging activity, mainly in agriculture. The main control method is the application of granulated toxic baits incorporated with an active ingredient (AI). The present goal is to evaluate the effect of caffeine on in vitro growth of the mutualistic fungus and on the survival of the leaf‐cutting ants, aiming to verify the potential toxicity of this secondary metabolite over these organisms. RESULTS: Three distinct patterns of fungal growth correlated with caffeine concentration were observed: (1) no effect (0.01% caffeine); (2) intermediate growth reduction (0.05% caffeine); (3) drastic growth reduction (0.10 and 0.50% caffeine). The highest caffeine concentration causes fungus death in the first week. As for insect survival, caffeine does not seem to exert any effect. The treatments with diet containing caffeine showed similar values of M50, irrespective of caffeine concentration. CONCLUSION: As caffeine was shown to reduce growth of the mutualistic fungus of Atta sexdens rubropilosa, but with no conclusive effect on insect survival, a hypothetical explanation for the selection of different Coffea species by this leaf‐cutting ant species might be associated with caffeine toxicity to the fungus. Copyright © 2011 Society of Chemical Industry     

茶叶有效成分复合分离提取技术研究

以中、低档绿茶为原料,研究了茶多酚、咖啡碱和茶多糖的复合提取技术,探讨了微波对绿茶茶多酚类物质浸出特性的影响,建立了从同一茶叶原料中同时获得茶多酚、茶多糖、咖啡碱3种产品的工艺。研究结果表明:1)以水为介质,微波处理绿茶有利于茶叶有效成分的浸出,平均粒径0.246mm的绿茶用料液比(W/V)1∶20,时间3min,微波浸提2次,再50℃水浴浸提10min,1次,茶多酚浸提率达90.73%,高于乙醇水浸提。2)Al³⁺沉淀茶多酚的最佳pH范围为5.3～5.7;确定茶多酚——铝盐的最佳转溶条件为:茶多酚——铝盐沉淀用pH1.5的酸溶液,以料酸比1∶2(V/V)于60℃水浴中转溶15min,1次,茶多酚的转溶率达79.09%。3)萃取法结合升华法制备咖啡碱,较直接升华法得率高;确定咖啡碱最佳萃取条件为:供试液中NaCl浓度0.2%,二倍量的乙酸乙酯萃取3次,咖啡碱萃取率达95.14%。4)以水为介质,茶末经微波联合水浴浸提,溶剂法和沉淀法分离,能制备得率为11.8%的茶多酚、1.5%的茶多糖和1.2%的咖啡碱,效果明显优于单一溶剂法和沉淀法     

咖啡因对辐射效应的影响

用咖啡因或咖啡因与γ射线复合处理大麦种子,研究咖啡因对大麦辐射效应的影响及其作用机制,从而找出辐射育种中正确应用咖啡因的技术方法。研究结果表明,咖啡因作辐照前处理或辐照后处理均可增加辐射损伤;前处理的辐射损伤此后处理更严重,均随咖啡因溶液浓度的增加而增加;在γ射线和咖啡因的复合处理中,咖啡因溶液浓度在1.164mg/ml以下,作用机制是抑制辐射损伤的修复,当浓度达到1.164mg/ml时,咖啡因效应包括抑制辐射损伤修复和本身引起的诱变作用。在辐射育种工作中,咖啡因浓度以1mg/ml为宜。     

茶树咖啡碱合酶cDNA在大肠杆菌中的表达

通过RT-PCR法扩增出茶树咖啡碱合酶(TCS)cDNA编码区全序列，并将其克隆到表达载体pET32a( )中，得到重组质粒pET-TCS，在表达宿主菌B121trxB(DE3)中高效表达，产生相对分子质量约为62000的融合蛋白。该融合蛋白包括112个氨基酸残基的硫氧还原蛋白及370个氨基酸残基的茶树TCS蛋白。实验结果表明，随着诱导时间的延长，表达的融合蛋白产量逐渐增加，表达蛋白总量最高可达到菌体总蛋白的39．14％；在15、25和37℃ 3个不同的诱导温度下，均能诱导产生融合蛋白，而且产生的总量及其可溶性部分所占比例均随诱导温度升高而增加；在菌体的各个部位中，融合蛋白主要在细胞质中以可溶的形式进行表达，有少量在外周质中表达或以包涵体形式在细胞质中表达。另外，体外酶促反应表明，表达的融合蛋白能催化可可碱甲基化生成咖啡碱，具有正常的生物学活性。     

咖啡因和维生素E对鸡精液冷冻效果影响的研究

本试验用一种冷冻效果较好的稀释液配方作为基础液,采用常规冷冻和解冻技术,研究不同浓度咖啡因和维生素E对鸡精液冷冻的影响。咖啡因在稀释液中的浓度分别为0、2、5、8、10 mmol/L,维生素E在稀释液中的浓度分别为0、1、8、15、20 mg/mL。试验结果表明,当咖啡因浓度为5 mmol/L、维生素E浓度为15 mg/mL时,精子的冻后活力和复苏率显著地高于其他各组。     

从茶叶中绿色提取咖啡因的方法探讨

从茶叶中提取咖啡因的方法很多,但是主要存在产率低、耗时长等不足。笔者探讨改进从茶叶中提取咖啡因的一些途径和方法,采用了5种方法：水提法、醇提法,有机溶剂提取法、索氏抽提法和微波法。对这几种方法进行了比较,并对实验结果进行了探讨,认为微波法提取咖啡因产率较高、耗时较短,具有实用性。     

制备型逆流色谱分离绿茶提取物中儿茶素单体

为了进一步研究儿茶素的作用机理，对自制的制备型逆流色谱分离纯化绿茶提取物中多种儿茶素单体的技术进行了研究，采用两组溶剂系统，一组是石油醚-乙酸乙酯-水(0．2：1：2)；另一组是正丁醇-乙酸乙酯-水(0．2；1：2)系统，每次实验进样量为4g绿茶提取物，用前一组溶剂系统，表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)和表儿茶素没食子酸酯(ECG)得到了很好的分离，每一种单体的纯度达到了98％，其中ECGC达到99％；用后一组溶剂系统，表没食子儿茶素(EGC)、儿茶素(士C)得到了分离，纯度达到92％。     

HPLC法对凤冈锌硒茶中九种品质成分的同时测定

建立了基于高效液相色谱(HPLC)同时测定凤冈锌硒绿茶中7种儿茶素类物质:儿茶素(+C)、没食子儿茶素(GC)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、没食子酸(GA)和咖啡因(CAF)的方法.色谱条件为Kromasil 100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈、乙酸及EDTA溶液为流动相,梯度洗脱;柱温为35℃;检测波长为278 nm.结果表明,茶叶中各目标峰均达基线分离,线性关系良好,该方法简捷、准确、重现性好.     

低咖啡因茶加工关键技术及设备的研究

以热水杀青方式脱除茶叶中的咖啡因,结合脱水、揉捻、干燥工序,所制成茶的咖啡因脱除率达到67％,其它主要内含物保留率达到82％以上,具有传统绿茶的风格。茶叶捞青机具有结构简单、操作方便、咖啡因脱除效率高、节水节能的特点。