全文获取类型
收费全文 | 51876篇 |
免费 | 2503篇 |
国内免费 | 5884篇 |
专业分类
林业 | 2947篇 |
农学 | 5181篇 |
基础科学 | 723篇 |
5452篇 | |
综合类 | 22283篇 |
农作物 | 3929篇 |
水产渔业 | 4290篇 |
畜牧兽医 | 9795篇 |
园艺 | 2746篇 |
植物保护 | 2917篇 |
出版年
2024年 | 202篇 |
2023年 | 657篇 |
2022年 | 1355篇 |
2021年 | 1591篇 |
2020年 | 1717篇 |
2019年 | 2038篇 |
2018年 | 1458篇 |
2017年 | 2235篇 |
2016年 | 2745篇 |
2015年 | 2290篇 |
2014年 | 2012篇 |
2013年 | 2913篇 |
2012年 | 3973篇 |
2011年 | 3866篇 |
2010年 | 3116篇 |
2009年 | 2854篇 |
2008年 | 3093篇 |
2007年 | 3627篇 |
2006年 | 3178篇 |
2005年 | 2418篇 |
2004年 | 1987篇 |
2003年 | 1441篇 |
2002年 | 1176篇 |
2001年 | 1092篇 |
2000年 | 985篇 |
1999年 | 828篇 |
1998年 | 634篇 |
1997年 | 573篇 |
1996年 | 545篇 |
1995年 | 554篇 |
1994年 | 443篇 |
1993年 | 464篇 |
1992年 | 440篇 |
1991年 | 382篇 |
1990年 | 356篇 |
1989年 | 266篇 |
1988年 | 198篇 |
1987年 | 142篇 |
1986年 | 136篇 |
1985年 | 71篇 |
1984年 | 41篇 |
1983年 | 25篇 |
1982年 | 18篇 |
1981年 | 21篇 |
1980年 | 19篇 |
1979年 | 18篇 |
1978年 | 13篇 |
1976年 | 8篇 |
1956年 | 16篇 |
1955年 | 9篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 0 毫秒
91.
对91份不同产地扁穗冰草(Agropyron cristatum(L.)Gaertn)样品的遗传多样性和遗传结构进行研究。采用叶绿体cpDNAtrnT-trnL直接测序的方法和邻接法(NJ)对91份扁穗冰草样品进行遗传多样性和遗传结构分析。结果显示:物种水平上单倍型多样性(Hd)指数为0.608,核苷酸多样性(Pi)指数为0.00295;种群水平上Hd介于0~0.9722,Pi指数介于0~0.00749。分子方差分析表明,扁穗冰草大部分遗传变异(91.63%)发生在居群内,居群间的基因流(Nm=5.474)较高,群体内变异是扁穗冰草的主要变异来源;NJ树表明,受试的6个野生种群可分为4大类群。扁穗冰草的遗传多样性居群内遗传分化较大。 相似文献
92.
用设计合成的1对跨越禽呼肠孤病毒(ARV)P17非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARVS1133株进行了RT-PCR扩增。扩增产物与pGEX-4T-1原核表达载体连接后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。经0.2mmol/LIPTG诱导,表达的融合蛋白分子质量为42.4ku,占茵体总蛋白的34%。表达产物P17蛋白经不同浓度尿素纯化后,纯度达到85%。Western-blotting显示,纯化的P17蛋白能与感染ARV的阳性血清反应,说明其具有抗原性。以此重组蛋白为包被抗原初步建立了用于鉴别检测ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的SPF鸡血清的ELISA。 相似文献
93.
摘要:对青藏高原地区6个垂穗披碱草(Elymus nutans)居群8个不同生育期的可溶性糖(WSC)和粗蛋白质(CP)含量进行了测定。结果表明,居群间不同生育期WSC和CP含量存在显著差异(P<0.05),种源地来自青海共和县居群和甘肃临潭县居群WSC含量在整个生育期显著高于其他4个居群;CP含量甘肃玛曲县居群显著高于其他居群。整个生育期,WSC含量呈单峰曲线,初花至盛花期最高(P<0.05),初花期WSC含量最高为6.91%,最低为1.58%,CP含量整体表现为下降趋势,完熟期最低。不同居群间WSC和CP含量均表现出一定变异度,其变异系数变幅分别为36.47%~51.29%和4.76%~20.29%。相关性分析表明,WSC与CP含量呈显著负相关。 相似文献
94.
95.
表达猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白重组鸡痘病毒的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
从含有猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N)的质粒扩增出N基因,构建禽痘病毒转移载体。该载体含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2控制之下的PRRSVN基因、P11启动下的报告基因lacZ以及用于同源重组的禽痘病毒基因组的片段。在转移载体转染亲本病毒S—FPV-017感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)之后,采用蓝色表型筛选的方法,筛选到表达N基因的重组病毒,并对其进行了6轮蚀斑纯化。PCR方法鉴定证明重组病毒的基因组中含有完整PRRSVN基因,间接免疫荧光试验证明了PRRSVN蛋白在重组病毒感染的CEF细胞中获得表达,本研究为猪繁殖与呼吸综合征非复制型疫苗的研制打下了基础。 相似文献
96.
为探讨饲粮粗蛋白质水平对鲁西斗鸡肠道发育的影响,并建立肠道发育的生长模型,试验选用1日龄鲁西斗鸡雏鸡600只(公母各半),随机分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复20只。试验分为0~6、7~12、13~18、19~24周4个阶段,采用单因子试验设计,各处理组分别饲喂不同蛋白质水平的饲粮。在6、12、18、24周末,每重复屠宰1只进行肠道指标的测定。结果表明:(1)饲粮粗蛋白质水平对6、12、18、24周末十二指肠、空肠及回肠长度和重量均无显著影响(P>0.05);(2)鲁西斗鸡十二指肠、空肠及回肠重量随周龄变化符合Logistic模型。 相似文献
97.
根据传染性造血器官坏死病毒(IHNV)基因序列,设计了IHNV最为保守的指纹序列,以及测序引物,建立了IHNV焦磷酸测序检测方法。对所构建的IHNV焦磷酸检测方法进行特异性试验和灵敏度检测。结果表明,所建立的方法特异性好,在8种鱼类病毒中能够特异性检测出目的病毒,检测方法灵敏度高,最低检出核酸量为10pg/μL。对建立的焦磷酸测序检测方法进行了实际应用研究,选取国内采集与进口的鱼类样本共计80批次进行IHNV检测。结果显示,焦磷酸测序检测方法可以有效的检出常规RTPCR不能检出的假阴性样本和弱阳性样本,该方法的灵敏度和特异性可以满足水生动物疫病检测的需要。 相似文献
98.
根据GenBank中已发表的猪链球菌2型38000蛋白基因核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,采用PCR方法,以四川分离株猪链球菌2型基因组DNA为模板扩增38000蛋白主要功能区基因。将PCR产物纯化后与pMD18-T连接转化宿主菌DH5α,提取阳性质粒,进行PCR和酶切鉴定。将目的片段定向克隆到表达载体pET32a中,经测序正确后,重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),于37℃、0.8mmol/LIPTG条件下进行诱导表达,结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量约为35000的重组蛋白,表达产物经纯化后,免疫印迹法(Western blotting)证实该重组蛋白可以与猪链球菌2型阳性血清发生特异性反应。 相似文献
99.
揭示黑龙江地区集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)直肠棉拭子分离到的123株大肠埃希菌所属种系分类群、O血清型及其与毒力基因的特征.采用常规凝集试验进行测定,种系分类群标记的ch uA、yjaA基因和TSPE4.C2DNA片段及肠毒素基因STa、STb、LT、SL T-2e采用PCR方法检测.在123株分离菌株中,除21株未定型、10株自凝外,测定出92株分离的血清型,覆盖18个血清型,其中以O8、O 9、O 149 3种血清型为主,共57株,占定型菌株的61.96%.环境共生的种系进化A群113株占91.87%,肠外强致病D种系进化群2株占1.63%.肠毒素检出菌株74,占分离株的60.16%,其中以STa、STb为主,共占肠毒素检出株的94.59%.结果显示黑龙江省PWD病原性大肠埃希菌优势血清型为O 8、O9、O149,大肠埃希菌肠毒素主要毒力因子为STa、STb,种系进化群为A. 相似文献
100.
为筛选牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)gP48蛋白的单链抗体,本研究利用噬菌体展示技术构建了gP48蛋白单链抗体克隆文库,通过微孔筛选法对抗体库进行3轮富集淘筛,利用ELISA技术测定单链抗体的亲和力,对亲和力较高的克隆进行基因测序分析和结合活性测定,旨在获得gP48蛋白的单链抗体。结果表明:1)成功构建了库容量为4.3×107的噬菌体单链抗体库,其重组率为83.3%,经三轮筛选对噬菌体抗体库进行富集,富集倍数为1.43×104;2)优化了间接ELISA方法,筛选到3株与BVDV gP48蛋白具有高亲和力的单链抗体以及其基因序列,通过IgBLAST分析显示,3株单链抗体均为鼠源IgG。综上,从gP48蛋白的单链抗体库中筛选获得3个具有高亲和力的单链抗体,可用于后续BVDV检测方法的建立。 相似文献