猫源C11orf96基因表达及其在细胞中的定位分析

本研究旨在通过克隆猫源C11orf96(Felis catus C11orf96,fC11orf96)基因,并制备其多克隆抗体分析该基因在细胞中的定位。以猫肾细胞cDNA为模板克隆fC11orf96基因,并利用无缝重组连接成功构建重组质粒pET-32a (+)-fC11orf96-Fe。随后将重组质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后成功表达fC11orf96-Fe重组蛋白,并利用该重组蛋白制备多克隆抗体。最后利用Western blot及间接免疫荧光试验分析多克隆抗体的有效性及其细胞定位。结果表明,成功获得猫C11orf96基因CDS序列,全长372 bp,可编码124个氨基酸,表达的fC11orf96-Fe蛋白主要以包涵体形式存在,蛋白大小约49 ku。由该重组蛋白制备的多克隆抗体能够识别细胞内源性fC11orf96蛋白和外源真核表达蛋白,并且发现fC11orf96蛋白定位于细胞质。本研究成功克隆得到猫C11orf96基因,并且fC11orf96蛋白定位于细胞质,为后续研究C11orf96的生物学功能奠定了基础。     

2株H11N3亚型禽流感病毒厦门分离株的基因特征及遗传进化分析

从厦门地区健康鸭群和环境中分离到2株H11N3亚型禽流感病毒(简称SD61和XA33),对其进行全基因组序列测定、遗传演化分析和特殊位点的氨基酸分析。结果显示:2株分离株的HA裂解位点均符合低致病性禽流感病毒特征,NA颈部均无缺失碱基;内部基因中M1基因N30D、T215A突变,PB1基因发生S622G突变,NS1均存在PL基序,为ESEV,SD61株中NS1发生P42S突变,提示当前分离株已出现致病性增强的变化。8个基因片段均属于欧亚谱系,除了HA基因外,与A/duck/Fujian/SD063/2017(H3N3)毒株其他7个基因片段有高度的同源性,同时与浙江、江西、江苏等不同亚型禽流感病毒同源性很高,说明这2株H11N3毒株发生基因重组现象。本研究结果将为本地区禽流感病毒生物学特性研究和防控提供科学依据。     

一株H11N2亚型禽流感病毒的分离鉴定及遗传进化分析

为了解禽流感病毒在华东地区家禽体内的进化情况,作者对华东地区某活禽市场的家禽进行了禽流感病毒的流行病学监测,并分离鉴定出1株H11N2亚型禽流感病毒A/duck/Jiangxi/k0701/2009。对该株病毒全基因组的遗传进化分析表明A/duck/Jiangxi/k0701/2009的8个基因片段来源广泛,与亚洲及欧洲某些地区的毒株存在广泛的重组现象。其PB2基因和NS基因可能由A/mallard/Korea/GH170/2007(H7N7)提供,NA基因与高致病性禽流感病毒A/duck/Hebei/0710/2009(H5N2)的NA基因亲缘关系较近,而PB1、PA和NP基因则可能与A/Muscovy duck/Thailand/CU-LM1984/2009(H4N9)有共同来源。本研究结果提示该株病毒可能为1株多元重组病毒,且可能在高致病性禽流感病毒的进化中起了重要作用。     

用绿色荧光蛋白基因（gfp）标记产酸克雷伯氏菌SG—11研究其在水稻苗期根部的定殖

本研究以自水稻根面分离的产酸克雷伯氏菌SG－11为出发菌株，分别用携带gfp和nifH-gfp的质粒转化SG－11进行基因标记，得到了转化子SG－11A和SG－11B。对两转化子的生长曲线和质粒稳定性进行了测定，在LB培养基中，SG－11的倍增时间为0.815h，对数期是3.20－5.28h，样品各点与其曲线的相关系数R^2=0.9975;SG-11A的倍增时间为1.02h，对数期是3.27－5.37h，R^2=0.9987，在无选择压力的条件下，连续传80代时质粒的保存率为0％。在K中这培养基中，SG－11的倍增时间为1.159h，对数期是2.50-4.92h，相关系数R^2=0.9922;SG-11B的倍增时间为1.163h，对数期是2.50－4.92h，相关系数R^2＝0.9698，连续转100代时质粒的保存率为65.6%。激光共聚焦显微镜观察结果表明：在试管限菌培养条件下，SG－11A主要定殖在水稻根部的伸长区和根毛区，并且在次生根形成处有菌团存在，在水稻根通气组织的细胞间隙和维管束导管内发现了SG－11A，在根的伸长区只是偶尔观察到了表达nifH-gfp的SG－11B。砂培条件下，在水稻根伸长区观察到了少量SG－11A的定殖，未检测到SG－11B。稻田土盆栽实验中，在水稻的根部既未检测到SG－11A也未检测到SG－11B。     

重寄生链霉菌F46与生防放线菌SC11融合菌株的筛选

利用重寄生链霉菌F46和生防放线菌SC11进行原生质体融合,通过菌落形态特征及颜色的差异分离获得8株融合菌株。皿内实验结果表明,包括F-S5,F-S8,F-S12,F-S15和F-S16在内的5个菌株保留了亲本 SC11较强的抑菌作用,其中F-S8只对粉红聚端孢(Trichothecium roseum)有较强的抑菌活性,抑菌率>60％;F- S12对粉红聚端孢(T.roseum)和大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)有抑菌作用,抑菌率接近60％;而其他3个菌株对5种靶标病原真菌皆有强的抑菌活性,抑菌率可达70％左右。在受抑菌丝再生能力测定中发现,菌株F-S15对粉红聚端孢(T.roseum)有永久抑菌作用;菌株F-S5对胶胞炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)以及菌株F-S15对大丽轮枝菌(V．dahliae)的永久抑菌作用比较显著。显微观察发现,受融合菌株抑制的菌丝均有不同程度的畸变。     

不同刈割周期对热研11号黑籽雀稗产草量及品质的影响

研究不同刈割周期对热研11号黑籽雀稗(Paspalum atratum cv. Reyan No.11)产草量及品质的影响。结果表明：间隔90d刈割周期粗蛋白质产量最高,达3897 kg/hm2;间隔75d刈割周期鲜草产量最高(135.8t/hm2);间隔120d刈割周期干草产量最高(38.6t/hm2);间隔120d刈割周期株高生长动态和分蘖数均高于其它处理;在品质方面,间隔90d刈割周期黑籽雀稗品质最好,粗蛋白质含量最高(13.13%),粗纤维含量最低(25.79%)     

链霉菌SR-11抑菌活性物质的理化性质初步研究

从四川各县姜土土壤中分离得到1株放线菌SR-11菌株,经初步鉴定为链霉菌属(Streptomyces).该菌株对姜瘟青枯假单孢杆菌及11种供试菌(其中包括3种病原细菌和8种病原真菌)都有较强抑制作用.对SR-11菌株发酵液的粗分条件和拮抗物粗品的性质进行了研究,结果表明,以体积比为1∶1的乙酸乙酯萃取活性物质最为可行,所得的橙黄色活性粗提物,在37～100℃,pH值3～11处理10～30 min以及胰蛋白酶和蛋白酶K处理1 h后,对青枯假单孢杆菌的抑菌活性不变,说明该物质对热、酸、碱及酶的稳定性强.粗品在官能团反应中,茚三酮反应呈阳性,坂口反应呈阴性,与新霉素的反应结果一致而与链霉素的反应结果相反,说明该物质不是链霉素而可能是新霉素.     

贵州省茶叶加工业"十一五"发展规划

根据贵州茶叶加工业的现状、存在的主要问题、发展的有利条件和发展前景,提出了贵州省茶叶加工业"十一五"发展的指导思想、基本原则与发展目标和规划布局,明确了六个方面的重点发展项目和五个方面的主要保证措施。     

半滑舌鳎hsd11b1l和hsd11b2基因的克隆及其温度响应的表达规律

皮质醇在鱼类应对外界环境压力的过程中起到重要调控作用,而hsd11b1l和hsd11b2具有调节体内皮质醇浓度的重要功能.本研究克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)hsd11b1l和hsd11b2基因的cDNA全长序列,分析了其序列特征,研究了其时空表达特征及温度响应的表达规律.结果显示,hs...     

Reproductive cycle in reared male common Japanese conger, Conger myriaster

Annual changes in gonadal histology, gonadosomatic index (GSI), and plasma 11-ketotestosterone (11KT) levels were investigated in reared male common Japanese congers, Conger myriaster. Young fish, 20–30 cm in total length and around 20 g in body weight, caught in November 1996 (group 1) and in September 1999 (group 2) were reared for 3 years in seawater at temperatures ranging from 10 to 20 °C.

In most fish, only spermatogonia occupied the testes for 1 year and a few months after capture. Spermatocytes appeared in February, and both spermatids and spermatozoa appeared in March, in 1998 for group 1 and in 2001 for group 2. Spermiation was observed from May to September and reduction in testis was observed after October in both groups. GSI and plasma 11KT levels changed with progression of spermatogenesis. Although GSI was less than 1.0 and the plasma 11KT level less than 1.0 ng/ml, in the first year in most fish, both increased in the second year of rearing. GSI peaked in June 1998 (5.3±3.0; mean±standard deviation) in group 1 and May 2001 (2.3±1.3) in group 2, and bottomed in October (0.3±0.1) in both groups. Plasma 11KT levels peaked in March 1998 (5.8±1.9 ng/ml) in group 1 and May 2001 (4.4±2.4 ng/ml) in group 2, and bottomed in August in group 1 and September in group 2 (around 0.1 ng/ml in both groups). Spermatogenesis and changes in GSI and plasma 11KT levels were repeated the following year in both groups.

These observations indicate that males have an annual reproductive cycle under rearing conditions. It is possible that wild male common Japanese congers also have multiple spawning seasons in their lives.