三种礁膜属藻类的分子遗传多样性和亲缘关系的RAPD分析

用RAPD技术对礁膜、袋礁膜和宽礁膜进行了DNA多样性分析,这3种礁膜的基因组DNA分子量均约23Kb。在使用的88个随机引物中,有43个引物在所有样品中都能重复性较好地扩增出条带清晰的多态性片段,多态引物比例为48.86%,袋礁膜、宽礁膜和礁膜多态位点比例分别为55.93%、65.28%和53.14%。礁膜与宽礁膜、宽礁膜与袋礁膜以及礁膜与袋礁膜种间遗传距离分别为0.4118,0.4148,0.4375。通过对遗传距离分析,结果表明采自3个不同海区的样本为同一礁膜属的3个种,与传统分类鉴定结果相吻合。UPGMA和NJ法构建的种间分子系统树一致,结果是宽礁膜和礁膜之间的亲缘关系最近,宽礁膜与袋礁膜之间的亲缘关系较远,礁膜与袋礁膜之间的亲缘关系最远,这与宽礁膜与礁膜共有形态特征较多,袋礁膜与宽礁膜、礁膜共有形态特征少相验证。     

两面针与混伪品及近缘种DNA条形码鉴定研究

[目的]探讨DNA条形码技术对两面针真伪鉴定的可行性,为两面针种质资源的鉴定提供参考.[方法]对两面针及其常见混伪品和同属近缘种（10种31份样品）进行DNA提取、PCR扩增和双向测序,所得序列经CodonCodeAligner软件处理和人工校对,采用TaxonGap法比较rbcL、trnH-psbA和ITS2等3条序列的物种鉴定力大小;选择适用条形码在不同物种样品范围内进行分析,检查种内种间距离变化情况.[结果]ITS2和tmH-psbA两条序列对10个试验物种的鉴定效率均为100.0％,rbcL在实验物种范围内不存在最小种间遗传距离;ITS2序列在样品鉴定范围由12个物种33个数据扩大为33个物种132个数据时,鉴定成功率从100.0％下降至84.8％,种内变异大于种间变异的比例由71.4％上升至90.1％.[结论]ITS2和trn H-psbA序列可作为两面针真伪鉴定的标准条形码,实际应用中应注意确定物种鉴定样品数及种内充分取样.     

三种礁膜属藻类的分子遗传多样性和亲缘关系的RAPD分析

用RAPD技术对礁膜、袋礁膜和宽礁膜进行了DNA多样性分析,这3种礁膜的基因组DNA分子量均约23Kb。在使用的88个随机引物中,有43个引物在所有样品中都能重复性较好地扩增出条带清晰的多态性片段,多态引物比例为48.86%,袋礁膜、宽礁膜和礁膜多态位点比例分别为55.93%、65.28%和53.14%。礁膜与宽礁膜、宽礁膜与袋礁膜以及礁膜与袋礁膜种间遗传距离分别为0.4118,0.4148,0.4375。通过对遗传距离分析,结果表明采自3个不同海区的样本为同一礁膜属的3个种,与传统分类鉴定结果相吻合。UPGMA和NJ法构建的种间分子系统树一致,结果是宽礁膜和礁膜之间的亲缘关系最近,宽礁膜与袋礁膜之间的亲缘关系较远,礁膜与袋礁膜之间的亲缘关系最远,这与宽礁膜与礁膜共有形态特征较多,袋礁膜与宽礁膜、礁膜共有形态特征少相验证。     

原子吸收法测定中药两面针微量元素含量

运用火焰原子吸收分光光度法和石墨炉法对两面针样品中的金属元素Fe、Cu、Zn、Mg、Ca、Pb、Sn 的含量进行了测定.结果表明,试验方法简单,精密度和灵敏度高,回收率为98.26%-100.57%,结果可靠.两面针中中Ca、Fe、Zn含量较高.     

宽礁膜生活史各阶段细胞的超微结构

大型海藻细胞超微结构的研究,对于海藻的基础理论及应用研究具有十分重要的作用,本文比较系统地对宽礁膜游孢子、配子体、配子、合子和游孢子囊进行了电镜观察。研究结果表明,淀粉粒在各阶段细胞中的数量变化、初期合子外的胶质膜对合子的固着作用、游孢子囊的厚壁与其对不良环境的抵抗能力等都表明各阶段形体的超微结构与其生理功能是一致的。蛋白核的超微结构特征可作为礁膜属种类的一个分类依据,它是对以形态、生活史等为主要分类依据的有力补充。宽礁膜各阶段细胞内均具1个较大的蛋白核,有2条(游孢子囊时有时为3条)类囊体片层穿过蛋白核髓部,外有3～4枚或更多的淀粉鞘包被,籍此可将宽礁膜与其它礁膜属种类相区别。     

Anti-Inflammatory Activity of Orally Administered Monostroma nitidum Rhamnan Sulfate against Lipopolysaccharide-Induced Damage to Mouse Organs and Vascular Endothelium

We previously reported that rhamnan sulfate (RS) purified from Monostroma nitidum significantly suppressed lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammation in cultured human vascular endothelial cells. Here, we analyzed the effect of orally administered RS on LPS-induced damage to mouse organs and vascular endothelium. RS (1 mg) was orally administered daily to BALB/c mice, 50 μg of LPS was intraperitoneally administered on day 8, and Evans blue was injected into the tail vein 6 h later. After 30 min, LPS-treated mice showed pulmonary Evans blue leakage and elevated plasma levels of liver damage markers, whereas this reaction was suppressed in LPS + RS-treated mice. Immunohistochemical and Western blot analysis of mouse organs 24 h after LPS treatment showed significant neutrophil infiltration into the lung, liver, and jejunum tissues of LPS-treated mice and high expression levels of inflammation-related factors in these tissues. Expression levels of these factors were significantly suppressed in LPS + RS-treated mice. Analysis of lung glycocalyx showed a significant reduction in glycocalyx in LPS-treated mice but not in LPS + RS-treated mice. Levels of syndecan-4, one of the glycocalyx components, decreased in LPS-treated mice and increased in LPS + RS-treated mice. The current results suggest that orally administered RS protects organs and vascular endothelium from LPS-induced inflammation and maintains blood circulation.     

宽礁膜生活史各阶段细胞的超微结构

大型海藻细胞超微结构的研究,对于海藻的基础理论及应用研究具有十分重要的作用,本文比较系统地对宽礁膜游孢子、配子体、配子、合子和游孢子囊进行了电镜观察。研究结果表明,淀粉粒在各阶段细胞中的数量变化、初期合子外的胶质膜对合子的固着作用、游孢子囊的厚壁与其对不良环境的抵抗能力等都表明各阶段形体的超微结构与其生理功能是一致的。蛋白核的超微结构特征可作为礁膜属种类的一个分类依据,它是对以形态、生活史等为主要分类依据的有力补充。宽礁膜各阶段细胞内均具1个较大的蛋白核,有2条(游孢子囊时有时为3条)类囊体片层穿过蛋白核髓部,外有3～4枚或更多的淀粉鞘包被,籍此可将宽礁膜与其它礁膜属种类相区别。     

两面针林下栽培技术

两面针具有较高的药用和经济价值,是广西化工和医药产业的主要中药材品种。为了扩大两面针植物资源,人工栽培势在必行。2011～2013年在广西钦州进行林下栽培示范,文中从林地选择、整地、栽植密度、苗木类型及规格、苗木培育、栽植及抚育、病虫害防治等方面介绍了两面针林下栽培关键技术,选择大苗及林分透光率是关键因子。     

礁膜原生质体的分离及培养

为了开发礁膜人工育苗的新技术,以4％果胶酶和2％纤维素酶的甘露醇溶液,分离酶解经无菌处理的礁膜叶状体,在40mmol·L~(-1)CaCl_2,0.7mol·L~(-1)甘露醇,pH5.5,温度28℃,摇床速度50r·min~(-1)旋转振荡3h的条件下,1.0g湿重礁膜可获原生质体约2×10~6个。原生质体分离后依次用比重为1.030、1.026、1.022的消毒海水(添加N、P、Fe~(2 )、IAA、KB、Vit C)培养,2d后已形成明显的再生细胞壁,3～4d后细胞开始分裂,8d后形成由4～8个细胞组成的细胞团,以后原生质有不同的发育形态,较常见的是形成由一共同胶质膜包被的类似亲本的叶状体组织块,另一种是原生质体形成孢子囊,成熟后,可产生许多游动孢子,再由游动孢子发育成正常形态的膜状配子体,第三种发育形态为偏离亲本正常形态的管状体。     

宽礁膜孢子体阶段的研究

Based on the observation and comparative analysis, overall and systematic development of M．latissimum in the stages from conjugation of gamete to discharge of zoospore, on the sporophyte stage during the life history of M．latissimum is entirely expatiated in this article. Meanwhile, on the basis of the results of the experiment, we divided the sporophyte stage of M．latissimum into five periods : conjugation of gametes（gamete 7.5 μm×2.0 μm）, zygocyte （4-20 μm）, sporange （18-40 μm）, zoospore formation （sporange 35-55 μm） and discharge of zoospore （zoospore 9.4 μm×3 μm）. In this paper it may be in China to find the systemic acknowledgement on the division of the sporange stage during the life history of Monostroma as well as to the seedling cultivation in practice. 